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烟草组织培养生根

发布时间:2021-06-18 14:55:21

1、植物的组织培养怎么由部分组织变成试管苗生根?(比如草莓)

第一步:生根组织切块,植入灭菌培养试管中培养,加入促生根激素。
第二步:分苗,将密集生根的弱苗分到大的试管培养基中进一步培养,减少密度。
第三步:练苗,移栽之前打开培养试管,通风。
第四步:移苗,移苗至温室大棚的苗床地。
第五步:移栽,分苗,连同营养钵正式移入大田栽培。

2、植物组织培养,生根苗的切割要求

维生素B1和B6,用无机离子浓度低的White培养基。 氮源有铵态氮,硝态氮和可溶性有机氮,如:氨基酸或酰胺等。 加入各种氨基酸的水解酪蛋白,也能促进根的生长。
植物组织培养,生根\切割
维生素B1和B6,用无机离子浓度低的White培养基。 氮源有铵态氮,硝态氮和可溶性有机氮,如:氨基酸或酰胺等。 加入各种氨基酸的水解酪蛋白,也能促进根的生长。

3、烟草愈伤培养基的具体配方

在植物组织培养时,通过调节IAA和CTK的比值能影响愈伤组织分化出根或芽.CTK/IAA高时,愈伤组织分化芽;CTK/IAA低时,分化根;CTK/IAA比例适中维持愈伤组织不分化
2.2.1 愈伤组织诱导培养基制备
以MS培养基母液为基础,向洁净铝锅中顺序加入大量元素20×母液100mL,
微量元素100×母液20mL,铁盐100×母液20mL ,维生素100×母液20mL,肌醇
200×母液10mL,甘氨酸200×母液10mL,配制得MS培养基后,再加入0.5mg·L-1
的BA8mL,0.5mg·L-1的NAA8mL.然后加入实际配制培养基体积约2/3-3/4的蒸馏
水,加入40g蔗糖后搅拌使其溶化,用0.5mol·L-1的NaOH和0.5 mol·L-1的HCl调整
pH值至5.8-6.0.加入14g琼脂,将铝锅置于电炉上,搅拌加热使琼脂完全溶化,然
后用蒸馏水定容至终体积2L,继续加热几分钟使之混合均匀后分装于三角瓶中.
2.2.2烟草叶片愈伤组织诱导
取一无菌培养皿,用解剖刀切取1-2片无菌苗叶片置于无菌培养皿中,并用解
剖刀将叶片切成2mm2左右的小片,然后将其接种于准备好的培养基上,每瓶接种
5小片,一共接种6瓶.接种后的三角平置于24条件下黑暗培养1周,然后在同
样温度下有光照和全黑暗下培养3周直至愈伤组织形成(两种情况各置3瓶).观
察愈伤组织诱导结果,统计愈伤组织诱导率.
2.2.3器官分化及植株再生培养
将诱导的愈伤组织按类型分别转入分化培养基上,置于连续光照,温度20-
22 C条件下培养3周,统计愈伤组织再生植株情况.
3 结果与分析
3.1 愈伤组织诱导
3.3.1 愈伤组织诱导的总体情况
烟草愈伤组织诱导培养4周后,愈伤组织基本形成,即排除因生长时间不够而
未形成愈伤的情况.具体情况见表一中所示,6瓶培养物均有愈伤形成,且都未发
生污染,但诱导率几乎各不相同.其中, 在光照条件下培养的3瓶平均愈伤诱导率为
60.0℅, 在黑暗条件下培养的3瓶平均愈伤诱导率为46.7%.由于实验过程中,外植
体即烟草叶片取得偏小,接种时可能已有部分外植体的大部分细胞脱水死亡,使整
个实验的愈伤组织诱导率偏低,愈伤块偏小.

4、组织培养中常用的促进生根的措施有哪些?

促进插条生根的方法很多,目前使用最广的是用植物生长激素处理。此外还有环剥和其他药剂处理法。

(1)激素处理

常用的激素有:吲哚乙酸、吲哚丙酸、吲哚丁酸、萘乙酸、2,4-D等。其中效果较好的是吲哚乙酸、吲哚丁酸及萘乙酸。这些有机酸类可促使对生根有促进作用的有机物在插穗下部积累,从而促进发根。具体的处理方法有:

水剂处理:将插穗下端浸在生长素的水溶液或酒精溶液中。又可分为浓液速蘸法和溶液浸渍法。浓度较高用速蘸法,一般在溶液中浸5秒左右,然后扦插。浓度较低用浸渍法(一般10~100毫克/千克),将插穗茎部(2.5厘米)浸在溶液中经24~48小时后扦插。

粉剂处理:将插穗的下端蘸于生长素与木炭、滑石粉或其他粉末的干混合粉剂中,然后进行扦插。具体操作为:将插穗茎部(1.5~3厘米处)先行沾湿,滴去多余水分,然后蘸以粉剂即可马上扦插。

吲哚乙酸、吲哚丁酸及萘乙酸均难溶于水,所以在配制时应溶于开水或溶于95%浓度的酒精中,然后再用水稀释到所需浓度。粉剂的配制则可直接将生长素的结晶混入定量的木炭粉、滑石粉中,放在研钵中碾碎搅拌后使用。

配好的溶液和粉剂应保存在密闭的玻璃器皿中,放干燥、黑暗、冷凉的地方,吲哚乙酸在水溶液中易失效,应临时配制,萘乙酸,2,4-D可保持较长时间,粉剂在阴凉处可保持数月。

扦插时使用的浓度主要视树种、枝条木质化程度及处理时间而异。此外,气温高低、土壤酸碱度等均有一定影响。针叶树类一般要求较其他种类浓度高,用吲哚丁酸药剂处理浓度为20~80毫克/千克。吲哚乙酸溶液及萘乙酸溶液,对大多数种类宜用40~100毫克/千克,浸24小时。落叶乔灌木及藤本:浓度因插条木质化程度而异,对大部分易发根种类的半熟枝,可用10~12毫克/千克的吲哚乙酸溶液处理24小时,过浓则往往有药害。难发根的种类可用80~200毫克/千克浓度。粉剂则用4000毫克/千克浓度。若用溶液速蘸法处理,则浓度为2000~5000毫克/千克。

(2)高锰酸钾处理

高锰酸钾蘸根后可分解为氧气、二氧化锰、氧化钾等,氧气可促进氧化,增强呼吸作用,使插条内部的养分变为可给态,从而促进发根。二氧化锰能杀菌、有防腐作用。一般使用浓度为0.3%~0.1%。

(3)环剥处理

对不易生根的树种,在生长季环剥,到休眠期在该处剪下扦插。由于伤处养分集中而利于生根、发芽。

5、组织培养育苗生根时用什么培养基?

继代培养形成的不定芽和侧芽等一般没有根,要促使试管苗生根,必须转移到生根培养基上,生根培养基常用1/2MS培养基,无机盐浓度低有利于根的分化。同时,不同花卉诱导生根时所需要的生长素的种类和浓度是不同的,常用生长素萘乙酸、吲哚乙酸、吲哚丁酸。一般在生根培养基中培养1个月左右即可获得健壮根系。

6、请生物高手帮帮忙:生长素在浓度较高时不是应该当抑制根,促进茎生长么,为什么在烟草的愈伤组织培养中

这个问题比较麻烦
三种中,根最敏感,芽居中,茎最不敏感
而插条时,插的就是茎,所以做这题的时候答案都是茎的最适浓度做正确答案的

但这里不是长茎,所以很难理解,但选根的最适也不成,因为这里是茎分化成根,是根的分化,而不是促进根的生长,但是课本并没有指出根分化的最适浓度是多少,不过从植物组织培养中介绍,分根的生长素浓度高于分芽来看,只能选长茎的浓度了。

生长素太多,只长根不长茎叶;原因:这是因为植物对生长素浓度敏感性茎比根强,所以高浓度生长素对茎的生长是抑制作用,而对于根这个浓度属于低的,反而促进了根的生长。

7、有谁知道烟草组织培养的配方?多谢。。。

至少可以先用MS让它先长着。

8、组织培养中,愈伤组织能直接诱导生根吗

很多植物的愈伤都能直接诱导生根,使用适当的激素种类和配比就可以了。如NAA就是一种促进生根的激素,但要配合适当的细胞分裂素。

9、植物组织培养中,为什么一般先诱导生芽后诱导生根,而不是反过来

如果先诱导根,再诱导芽,两者的维管束很难对接,所以都是先诱导芽再生根,移栽后才保证成活。

10、组织培养的一般过程是怎样的

植物细胞组织培养
一.实验目的
植物细胞和组织培养的技术性强,要求无菌操作,通过本实验可初步掌握常规的组织培养技术,加深对无菌操作的了解.
二.实验原理
植物的全能性:植物体的任何一个细胞都具有生长分化成为一个完整植株的能力,称为植物的全能性.
植物组织培养就是利用植物的全能性进行离体无菌植物培养的一门技术.植物组织培养按其原始意义,就是指愈伤组织培养.但发展至今,其范围日益扩大,已包括植物和它的离体器官、组织、细胞和原生质体的离体无菌培养.因此,拥有几种不同水平的培养技术,即整体的、器官的、组织的、细胞的和原生质的培养技术.它们的涵义是:
1.植株培养.指以具备完整植株形态的材料(如幼苗和较大的植株)外植体的无菌培养.
2. 胚胎培养.指以从胚珠中分离出来的成熟或未成熟胚为外植体的离体无菌培养.
3. 器官培养.指以植物的根,茎,叶,花,果等器官为外植体的离体无菌培养,如根的根尖和切段,茎的茎尖,茎节和切段,叶的叶原基,叶片,叶柄,叶鞘和子叶,花器的花瓣,雄蕊(花药,花丝),胚珠,子房,果实等的离体无菌培养.
4. 组织培养.指以分离出植物各部位的组织(如分生组织,形成层,木质部,韧皮部,表皮,皮层,胚乳组织,薄壁组织,髓部等),或已诱导的愈伤组织为外植体的离体无菌培养.这是狭义的组织培养.
5. 细胞培养.指以单个的游离细胞(如用果酸酶从组织中分离的体细胞,或花粉细胞,卵细胞)为接种体的离体无菌培养.
6. 原生质体培养.指以除去细胞壁的原生质体为外植体的离体无菌培养.
本实验选择烟草和豌豆为材料,烟草(Nicotiana)属茄科植物,是重要的工业原料,也是植物组织培养的四大典型实验植物(烟草、矮牵牛、胡萝卜、芸苔)中重要的一种,它的研究的最为广泛,也始终领先于其他的植物材料,目前,66个烟草品种中,再生成植株的有16个种,通过花药培养再生成花粉植株的有12个种,通过原生质体培养再生成植株的有20个种,通过烟草的种内和种间原生质体融合再生成杂种的植物分别为3个和12个种.豌豆(Pisum sativum)属豆科植物,是粮食、饲料和重要的蔬菜作物,也是遗传学家和植物生理学家感兴趣和乐于采用的实验植物,豌豆的根、茎、子叶、下胚轴、上胚轴、花芽等外植体,皆可形成愈伤组织,其中茎尖、幼胚、幼叶等器官可成功的再生成植株.茎尖培养可包括小至十几微米的茎尖分生组织(生长点)和大至几十毫米的茎尖或更大的芽培养.在实践应用上,常采用生长点的培养使患病植物去病毒,以达到挽救优良品种,提高产量和质量之目的.
三.实验材料
仪器设备
1.酒精灯、100ml三角烧瓶,9厘米培养皿;
2.镊子、剪刀、解剖针;
3.双筒解剖显微镜;
4.光照培养箱或温室;
材料和试剂
1.材料 烟草无菌苗、豌豆幼苗.
2.试剂
(1)MS培养基,植物激素:NAA、6-BA等;
(2)饱和漂白粉液(次氯酸钠);
(3)70%酒精、100%酒精、酒精棉球;
(4)无菌水
四.实验步骤
1.烟草无菌苗的快速切繁—继代培养:(要求完全无菌操作)
每组一瓶烟草无菌苗,请细心操作,以免污染.
(1) 在实验台上,点着酒精灯,将双手用酒精棉球擦拭消毒,打开生长好无菌烟草苗的三角瓶,三角瓶的瓶口使用前后需在酒精灯外焰上烧过灭菌.
(2) 用灭菌的镊子轻轻捏出1株幼苗,用灭菌的剪刀将无菌苗剪成0.5-1厘米的小段,要求每段至少包含一个生长点,直接剪入盛有MS培养基的三角瓶中,每一个切段必须直接接触培养基,三角瓶口重新烧过灭菌,并重新封好口.
(3) 在光照培养箱中15~25℃,16小时光照条件下培养4周,可长成完整植株,能用于田间移栽.
2.豌豆苗的茎尖培养
⑴ 取发芽6天的豌豆幼苗10株,简取1厘米左右的茎尖,浸入70%的酒精中1分钟,再浸入饱和次氯酸钠溶液中消毒15分钟,(此步以后要求无菌)用无菌水中冲洗5次,在灭菌的滤纸上吸干水分,放入灭菌的培养皿中.
⑵ 在双目解剖镜下,用灭菌的解剖针剥去幼叶露出生长锥,用灭菌的解剖针挑取带着两至三个叶原基的生长锥.
⑶ 将挑好的茎尖移到MS+10.7μmol/L萘乙酸(NAA)+4.4μmol/L 6-苄基腺嘌呤(6-BA)的培养基上诱导愈伤组织形成,用封口膜将培养皿封好.
[4]在恒温培养箱中,26℃下,培养六周,形成愈伤组织,经继代后,可用于生根培养.
第46批a7 2014-12-06

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