1、怎样固定收集的标本
(一)取材时必须注意以下问题: ①取出所有送检的标本,量其大小,称其重量,描写其色泽,质地,形状和肉眼所见表面情况。当标本切开后,应详细描写其切面的颜色,硬度,病变部位等,必要时绘图说明。 ②对于细小标本如肺支气管穿刺物标本胃肠镜活检标本[1]等,应将其染上伊红颜色后,用擦镜纸或特别脱水袋将其包上或装上,以防漏出脱水盒的小孔。 ③对于有传染性的标本,让标本彻底固定后再取材。如结核瘤标本等。 ④对于罕见特殊的标本,应小心保存好,在不影响诊断的情况下,尽量保存好大体标本。以利于教学标本,陈列标本的收集。 ⑤边取材边固定,组织标本较多的单位,取材经常要花上几个小时,如果从下午2:30开始取材,至5:30完成,那么先取的材料就可以多固定几个小时,如此可以防止固定时间不足,同时也可防止组织发生自溶。 ⑥对于骨髓穿刺的组织,可先用10%硝酸浸泡30分钟左右,然后再与其它组织进行处理。 ⑦骨组织和钙化组织,应彻底脱钙后,方能进行制作。具体用大头针能顺利扎入骨组织则可。 ⑧活检组织取材,不能太厚,以不超过2mm为宜。以防脱水不彻底,不利于制片。 ⑨每取完一例标本后,所有的工具如刀,剪,盘镊,切板等,必须用水冲洗干净,以免污染,混淆于其它病例。 ⑩组织取完即刻放入打印好号码的盒内,放入固定液中固定。
2、塑化人体标本为什么总是没有皮肤?
不是因为技术问题,是因为加上皮肤没有任何意义了,因为自己知道人体加上皮肤是什么样子
而标本没有皮肤它就可以显示出全是大小静脉的分布,可以让我们了解在活体标本上面通常无法看到的静脉回流血液的路径!
望采纳,谢谢
3、如何做骨头标本
选用未经防腐固定或经福尔马林固定三个月以内的动物尸体,将软组织大部分剔除,加蛋白酶浸蚀,从蛋白酶浸蚀液中依次取出骨头,流水冲洗,烤干,用脱脂剂脱脂,继后漂白,晒干用无色透明水晶漆喷涂于干燥骨标本表面,进行表面处理,再装置全副骨架即可。采用本发明的动物骨骼标本制作方法制作的骨骼,各部骨完整齐全,不损伤骨质,不损伤骨骼的微小结构,与真实活体内形状相同,脱脂干净、漂白良好、光亮洁净,经考察,在潮湿地区不霉变,可长期保存,骨骼标本制作周期短,质量优良。我做过。
4、皮肤软组织包括什么
除骨骼以外的一切皮下组织。
5、怎样处理病理标本
制作时将部分有病变的组织或脏器经过各种化学品和埋藏法的处理,使之固定硬化,在切片机上切成薄片,粘附在玻片上,染以各种颜色,供在显微镜下检查,以观察病理变化,作出病理诊断,为临床诊断和治疗提供帮助。
1.取材组织取材的方法是制作切片的一个重要程序,根据教学、科研及外检的具体要求取自人体(外科手术切除标本、活检标本、尸检标本)或动物,并确定取材的部位和方法。取材者需要掌握解剖学、组织学、病理学的基本理论知识,还要掌握实际操作技术,每个组织器官的取材都有一定的部位和方法,不能任意切取组织作为制片材料,不然,无法达到教学、科研和临床诊断的目的,具体要求如下:
(1)材料新鲜:取材组织愈新鲜愈好,人体组织一般在离体后,动物组织在处死后迅速固定,以保证原有的形态学结构。
(2)组织块的大小:所取组织块较理想的体积为2.0cm×2.0cm×0.3cm,以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部,但根据制片材料和目的不同,组织块的较理想体积也不同,如制作病理外检、科研切片,其组织块可以薄取0.1~0.2cm即可,这样可以缩短固定脱水透明的时间,若制作教学切片厚取0.3 ~0.5cm,这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。
(3)勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利,切割时不可来回锉动。夹取组织时切勿过紧,以免因挤压而使组织、细胞变形。
(4)规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材,病理标本取材按照各病变部位、性质的不同,根据要求规范化取材。
(5)选好组织块的切面:根据各器官的组织结构,决定其切面的走向。纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键,如长管状器官以横切为好。
(6)保持材料的清洁:组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等,可用水冲洗干净后再放入固定液中。
(7)保持组织的原有形态:新鲜组织固定后,或多或少会产生收缩现象,有时甚至完全变形。为此可将组织展平,以尽可能维持原形。
2.固定
(1)小块组织固定法:这是最常用的方法,从人体或动物体取下的小块组织,须立即置入液态固定剂中进行固定,通常,标本与固定液的比例为1:4~20,但组织块不宜过大过厚,否则固定液不能迅速渗透。故取组织块的大小一般为2.0cm×2.0cm×0.3cm。
(2)注射、灌注固定法:某些组织块由于体积过大或固定液极难渗入内部,或需要对整个脏器或整个动物体进行固定。这时宜采用注射固定或灌注固定法。将固定液注入血管,经血管分支到达整个组织和全身,从而得到充分的固定。
(3)蒸汽固定法:比较小而厚的标本,可采用锇酸或甲醛蒸汽固定法。如血液涂片,则应在血片未干燥前采用锇酸或甲醛蒸汽接触固定。
最常用的固定液有10%甲醛固定液和95%乙醇固定液。
3.脱水透明标本经过固定和冲洗后,组织中含有较多的水分,必须将组织块内的水分置换出来,这一过程叫做脱水。无论是用石蜡切片,还是用火棉胶切片,都必须除去组织中所含水分,因含水组织与石蜡、火棉胶等包埋材料不相容,常用的脱水剂为一系列不同浓度的乙醇。
脱水的步骤是:80%、90%、95%、100%各种浓度乙醇2小时,此过程可用脱水机自控完成。
丙酮也是一种脱水能力很强的脱水剂,但因其脱水能力很强,对组织有剧烈收缩作用,在制作科研、教学切片时一般不用该试剂。因乙醇、丙酮等不溶于石蜡,还要经过一个能溶于石蜡的溶剂替代过程称为透明。常用的透明剂有二甲苯、三氯甲烷、水杨酸甲酯等。
4.浸蜡、包埋
(1)使石蜡浸入组织中,取代组织中含有的透明剂。
(2)包埋:将浸蜡后的组织置于融化的固体石蜡中,石蜡凝固后,组织即被包在其中,称蜡块,此过程称为包埋。
5.切片和贴片
(1)修整蜡块:可视其组织的大小,在组织边缘约0.1~0.2cm处,切去余蜡部分,否则易造成组织皱缩不平。
(2)准备好切片用具:切片刀、毛笔、眼科镊子(弯)、漂烘温控仪
(3)安装蜡块:将修好的蜡块安装在金属或木制持蜡器上。
(4)安装切片刀:将切片刀安装在切片机的刀台上,把刀台上的紧固螺丝旋紧,使切片时不产生振动,能保持一定的切片厚度。
(5)切片的厚度:切片机的厚度调节器上刻有0~50μm或0~25μm,可任意选择其厚度,石蜡切片的厚度一般在4~6μm。
(6)切片
(7)铺片:用眼科镊子镊起蜡带轻轻平铺在40~45℃的水面上,借水的张力和水的温度,将略皱的蜡带自然展平。
(8)贴片、烘片:待切片在恒温水面上充分展平后,将蜡片捞到载玻片的中段处倾去载玻片上的余水,置入60~65℃恒温箱内或切片漂烘温控仪的烘箱内烤片15~30分钟,脱去溶化组织间隙的石蜡。
6.染色和封片常用的染色方法是苏木素-伊红(Hematoxylin-Eosin)染色法,简称H.E染色法。这种方法对任何固定液固定的组织和应用各种包埋法的切片均可使用。苏木素是一种碱性染料,可使组织中的嗜碱性物质染成蓝色,如细胞核中的染色质等;伊红是一种酸性染料,可使组织中的嗜酸性物质染成红色,如多数细胞的胞质、核仁等在H.E染色的切片中均呈红色。
H.E染色程序如下:脱蜡、脱苯、复水、染色、脱水、透明、封固
常规苏木素染色中的对比染色是用伊红,近年来在英、美国家的一些实验室则采用焰红(phloxine),此外也有用桔黄G(OrangeG)、比布里希猩红(Biebrich scarlet)、波尔多红(Bordeaux red)等作为对比染色。伊红为染胞质、胶原纤维、肌纤维、嗜酸性颗粒等常用的染料。
6、怎样留取粪便标本?
1、答:取标本时应从粪便内部挑取,存放于清洁的便盒内,一般取1个花生米大小的便量即可,不得混入尿液和水;应挑取异常部分,如痢疾患者应挑取脓血粘液部分;其它特殊检查时,应遵照医嘱执行。2、查大便潜血试验前应注意什么?答:要吃3天“潜血饭”。即限制食肉、动物内脏、血等,禁食含有铁、铜、叶绿素制剂、碘化钾、溴化物及酚红等成分的药物和食物,以免出现假阳性结果。3、怎样留取尿标本?答: 用体检单位准备的一次性干净容器。一般留中段尿。女性应冲洗外阴并避开经期,防止混入阴道分泌物或月经血;男性应避免精液、前列腺液的混入污染,否则会造成蛋白定性及镜检细胞的假阳性。尿液标本留后应立即送检,以避免因曝光、日照、细菌滋生而影响检查结果。4、查餐后2小时血糖应从何时记时间?答:餐后2小时血糖应从进食第一口饭开始记时间。糖尿病患者测餐后2小时血糖前必须同平时一样,按时按量吃饭用药,以了解平时血糖控制情况。
7、尸体解剖关节的标本制作的流程
一般尸体解剖的主要步骤与要求
(一)[体表检查]
称体重,量体长,观察发育、营养状况,检查体表有无黄疸,发疳,出血点,疤痕,创口等,及其部位,大小;眼、耳、鼻、口腔等有无溃疡、分泌物或液体流出,外生殖器有病变,浅表淋巴结肿大否;有无尸冷、僵、腐败现象。
(二)[体腔检查]
(1) 胸、腹壁皮肤切开及剥离:根据情况,选择Y形、T形或直线切口切开皮肤。切开腹膜时,先切一小孔,插入两指,再从两指之间剪开,以免划破内脏。剥离胸壁皮肤时,应注意将胸肌一并剥离,但勿损及肋间肌。
(2) 腹腔检查:检查腹腔内有无积液和积气,腹膜情况,各器官的位置。与关系,有无粘连,肝脾肿大否,其边缘在锁骨中线肋缘下及剑突下几厘米,检查左右横膈的高度。
(三)[胸腔检查]
(1) 必要时在胸腔未切开前检查有无气胸。可有注射器吸水后,在第一肋间处自胸壁刺入,观察有无气体自水面下上升。
(2) 在肋骨软骨联接线内侧约0.5cm处,将第二肋骨到肋弓的软骨切断,紧沿胸骨后壁将横及纵隔割离,注意勿损及心包及大血管,然后检查胸腔有无积液,其量及性质,必要时涂片检查与细菌培养。
(3) 切断第一肋骨,分离胸锁关节,将胸骨及肋骨取下,观察各器官的位置,两肺表面情况,胸腺是否已经脂肪化。锯开胸骨,看骨髓造血情况。
(4) 自心尖部向上,作人形剪开心包,检查腔内液量,心包膜内壁情况,必要时取心血作细菌培养。
(5) 疑有空气体栓塞时,将心包剪开一小口,用镊子拉紧切口两侧心包膜,心包腔内注满水,然后,在水上剪开右心房及肺动脉,观察有无气泡逸出,或者先结扎进出心脏的大血管,取出心脏,淹没于水下剪开右心,观察有无气泡逸出。
(四)[各脏器的取出]
各器官取出前,应仔细检查周围情况及与其他器官的关系,检查有困难时,一时不能明确者,可与其它器官一并取出,然后再仔细检查。检查各器官前,应称其重量,量大小。
(1) 心脏的取出与检查,在体内剖开右心,检查肺动脉有无栓塞后,将心脏提起,从根部或心包膜内壁分别剪断上、下腔静脉,(于距瓣膜2cm处)肺静脉和主动脉(于距瓣膜5cm处),取出心脏,(若有心、血管畸形,则应将心脏连同肺脏一并取出)。检查心脏增大否,外膜光滑度,有无渗出物等,心脏按血流方向剖开,测量各瓣膜的周径及左右心室的厚度。
A:右心剖开法:第一步,用刀或剪将右心从上、 下静脉入口处直线剖开,如欲避免破坏窦房结,从下腔静脉向上,剖至房室间沟上1cm处,向右心耳剪开,保持上腔静脉口完整,上腔静脉至少保留1cm。第二步,从此线中点沿心脏右缘剖至心尖部,检查三尖瓣,并用手指检查动脉有无血栓或狭窄。第三步,从心尖部沿心室中隔剖至肺动脉,检查肺动脉瓣。
B:左心剖开法:第一步,用刀或剪将左心房从左、右静脉入口之间作直线剖开,以手指检查二尖瓣是否狭窄。第二步,从此线的左端沿心脏左缘剖开至心尖剖。第三步,从心尖部沿心室中隔,避开肺动脉剖开肺动脉剖开主动脉,检查二尖瓣与主动脉瓣。
剖开有瓣膜病变的心脏时,应注意避免破坏有病变的瓣膜。
心脏剖开后,检查心肌厚度、硬度、色泽、心内膜光滑度,瓣膜周围有无增厚,及赘生物,有无狭窄或关闭不全,检查冠状动脉开口情况。
(2) 肺脏的取出:可由肺根部将主支气管和血管切断取出,或与颈部器官一并取出。 如两层胸膜间有粘连,需细心分离,勿损及肺,如粘连牢固,可连同胸膜壁层一并剥离,取出肺脏。取出后检查其表面情况。切开检查肺切面的改变,有无病灶、气肿、萎陷等,肺门淋巴结肿大否,切面情况。
(3) 颈部器官的取出:A,充分分离颈部皮肤与软组织,用长刀刺入割断舌下系带,紧沿下颌骨内面向左、右尽量地将下颌与舌间的软组织分离。B,将舌拉下,自硬腭后缘割离软腭,注意应将两侧扁桃体完全取下。C,将舌、咽、喉头、气管、食管、肺拉下于横膈上将食管、下腔静脉及主动脉切断,连同胸腔器官一并取出。
(4) 腹腔及盆腔器官的取出:
一般先将脾脏摘出,继之取出小肠、肾上腺、肝、胆囊、胃、十二指肠、胰,最后取出肾及盆腔器官。
① 将脾脏提至腹腔前方,割断脾门部血管,取出脾脏。检查其大小,重量,硬度,表面色泽。切面有无外翻;有无糊状物刮下,脾门血管及脾小体、脾小梁的情况等。
② 小肠与大肠的取出前, 应检查肠系膜 淋巴结及血管,找出空肠的起端,切断,自肠系膜附着处将肠割下,直至直肠处将其切断取出,肠的断端应钳紧或结扎,以免粪便污染腹腔。待其他器官检查完毕后再检查肠。先量其长度,在肠系膜附着处沿纵轴剪开肠腔,检查粘膜有无病变,腔内有无寄生虫等,必要时可保持肠与肠系膜的关系,并将其一并取出。
③ 十二指肠在原位从前面剪开,用手挤压胆囊:看胆道通畅否。沿胃大弯剪开胃,检查粘膜病变,将胃及十二指肠从后壁分离,与胰脏一并取出,在检查胰脏前,注意观察脾静脉有何变化。检察胰脏重量,大小,硬度,作多横切面,检查切面情况。
④小心分离肾上腺周围组织,取出肾上腺,分离右侧肾上腺时,将肝向上方推,注意分离与皮肤上腺相连的肝组织,肾上腺取出后,作多人横切面,检察皮质与髓质的特征,有无出血等。
⑤取出肝与胆囊前,应仔细检查胆管、门静脉、肝静脉,然后剪断肝门的胆管及血管,分离镰状韧带,将门静脉及肝背部部一段下腔静脉与肝一并取出。检查肝的大小,重量,硬度,色泽,注意检查肝静脉及腔静脉,切面外翻否,小叶结构清楚否及有无其它病变。
⑥分离肾周围脂肪结缔组织,将肾提出,凸面向上剖开,注意包膜剥离要难否,检查表面的性状,切面皮质及髓质纹理是否清楚,肾盂粘膜有无病变。然后连输尿管一起取出肾脏。
⑦盆腔内器官的取出:先分离腹膜及周围组织,再取盆腔器官,男性可将直肠、膀胱一并取出,结肠断端应结扎或缝合。
(五)脑与脊髓的取出:
1、从两耳后经头顶部作一切口,将刀插入切口,切开头皮,向前后剥离,划好锯线。此线自前额中心处向左右两侧延伸,经耳廓上缘,再向后向上延至枕外隆突近处,按锯线切断两侧颞肌。锯时注意锯到抵抗力减少时即停止,然后用凿凿开,注意勿损及硬脑及脑组织。
2、取脑时,将两侧额叶向上,向后提起,依次切断视神经,内颈动脉,漏斗,动眼神经,再剪开小脑天幕两侧,用左手将脑手托起,切断其余神经,然后用脊髓刀尽量切取较长的一段脊髓与脑一起取出,脑一般需固定5-10天后再切开检查,脑的一般切法如下:
A、经四叠体上缘和大脑脚上方斜向切断中脑,分离脑干与大脑。
B、在灰结节部将大脑作冠状切开,检查各基底神经核,外囊,岛叶,下视丘,侧脑室,第三脑室,然后向前向后每隔0.5-2cm作多个切面检查。
C、向小脑蚓部作坐横切面,露出第四脑室底,脑桥经面丘,延髓经橄榄核中部作横切面检查。
D、如为脑膜炎,及脑室扩张等病例,可经额极及枕极的联线稍高处作水平切面检查。
3、用骨凿凿去鞍背和两栅床突,仔细取出脑垂体。必要时凿开中耳或将中耳取出。
4、脊髓的取出法,中线切开背部皮肤,及棘突两侧锯开,椎板,取下棘突及椎板。剪断硬脊膜外脊神经根。切断马尾,轻轻将脊髓连硬脊膜 一并取出,取出时,应避免牵拉挤压。也可人前面锯开椎体,取出脊髓。
(六)骨髓检查:
一般病例取小片胸骨及椎骨,观察共骨髓情况,血液病病例取一侧股骨纵行锯开,观察骨髓改变情况,股骨取法如下:先切断髌下韧带,然后沿膝外侧、大腿外侧直到股骨大粗隆切开皮肤、肌肉,并分离出股骨,离断髋关及膝关节,取出股骨,填入长短相同的木棒,整复外形。
[采取细菌培养的方法]
1、心血培养标本:
(1) 用无菌镊子提起右心耳,在下腔静脉入口处的上方进行烧灼消毒,(用一有柄铜片在酒精灯上烧红,烧灼器官表面,面积约2*2cm).
(2) 用无菌吸管或注射器从消毒部位插入,顺下腔静脉入口推进,取血液2-3ml
(3) 在无菌操作下,将吸取之血液立即注入无菌的肉汤培养基,或有玻璃珠的培养瓶内,立即洗净吸管或注射器,以免凝固,若在右心取不到血液,可从下腔静脉吸取。
2、腔(胸腔、腹腔)内渗出液,心包腔内积液,必要时作细菌培养,采取液体时应尽量避免污染。采取脑脊液培养时,于尸检前用无菌手术,在第二及第三腰椎间隙作穿刺,取脑脊液2-3ml,置于无菌试管内送检。
3、肠内容物培养:在回肠末端及乙状结肠下端,或病变明显处的浆膜面经烧灼灭菌后剪开,用棉花拭子插入肠腔内,在粘膜面擦取粘液、渗出物粘膜,放入无菌试管或培养基内送检。
4、脏器细菌培养:脏器表面灼烧灭菌,切取不小于2*2*1.5cm的组织块,装无菌容器内送检。
5、脑组织作病毒分离:用无菌手术取大脑皮质,中脑,海马,脑桥组织块,每块不小于2*2*1.5cm,以冰瓶保藏迅速送检。路途遥远者,可将检材放入无菌甘油瓶内,在低温下送检[4]。
8、tct大夫取了标本后怎样放在载玻片上
采用液基薄层细胞技术:一、TCT技术;二、LCT技术;三、离心技术。最重要的是载玻片上涂有一层阳离子,吸附细胞的。
9、当取人体皮肤表面拭子标本培养出细菌时,可否判断有细菌感染?是否有临床意义
没有,皮肤不是无菌组织,有暂居菌和常居菌。除非是查处某些特定的细菌并且有临床症状才能确定细菌感染。一定要结合临床,培养影响因素很多的。
10、当取人体皮肤表面拭子标本培养出细菌时,可否判断有细菌感染?是否有临床意义?
咽拭子标本采集[目的]从咽部和扁桃体取分泌物作细菌培养或病毒分离。[用物]咽拭子培养管、酒精灯、火柴、压舌板、手电筒。[步骤]1.查对医嘱,标签贴于标本容器上,携用物至病人床旁。2.核对病人,解释取咽拭子培养的目的和方法。3.点燃酒精灯,嘱病人张口发“啊”音,暴露咽喉,用培养管内的消毒长棉签以灵敏而轻柔的动作擦拭两侧腭弓和咽、扁桃体上的分泌物。4.取毕,将试管口在酒精灯火焰上消毒,然后将棉签插入试管,塞紧。5.及时送检。[临床意义]如在痰及咽拭子分泌物中检测出致病菌,则视为呼吸道感染。可结合其他检查(X光透视、B超等)诊断呼吸道感染部位。呼吸道感染常见细菌有:葡萄球菌属、肺炎双球菌、流感嗜血杆菌、肺炎克雷伯氏菌、葡萄球菌、链球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌等。如培养出结核杆菌,则为肺结核。如培养出类酵母菌则考虑是否在感染期间使用抗生素不当或过量,应当立即停止使用抗生素,改用抗真菌药物,如两性霉素B、灰黄霉素、克霉唑等。最近不是猪流感么呼吸道疾病呀检查时都要用到的