1、在制备小鼠骨髓细胞染色标本过程中有哪几个主要步骤影响制片结果
在制备小鼠骨髓细胞染色体标本过程中以下几个步骤需要注意：
提前3-4小时候注射秋水仙素，时间太长或者太短都会影响染色体中期的数目和形态。
在低渗过程中时间和吹打都很重要，低渗过度染色体膨胀，染色后肥肥的，低渗时间不过染色后染色体颜色很深看不出条带。
滴片，如果是教学的实验,要求玻片是冰的,而且要倾斜，滴的高度一般在25-30CM，滴完要过酒精灯，让固定液蒸发。滴的数量不要太多否则会重叠.如果是医院里的染色体制片有专门的滴片机。
小鼠骨髓细胞染色体标本制作：
原理：
由于小鼠四肢骨内骨髓细胞中的造血干细胞是生成各种血细胞和原始细胞，具有高度的分裂能力，本实验采用这一材料，通过前处理，低渗，固定，制片，染色等步骤制得染色体标本，可观察到许多处于分裂中期的染色体，可以进行染色体组型分析；
试剂、试剂盒：秋水仙素、姬姆萨染液、固定液、低渗液、生理盐水；
仪器、耗材：天平、离心机、恒温培养箱、显微镜；
实验步骤
一、材料和方法
1. 材料：小白鼠。
2. 设备：天平，离心机，恒温培养箱，显微镜。
3. 药品：秋水仙素，姬姆萨染液，固定液，低渗液，生理盐水。
二、步骤
秋水仙素处理--取骨髓--低渗处理--固定--离心--再固定--再离心--滴片--染色--镜检--封片。
2、小鼠骨髓细胞可以直接用于染色体的制作的原因
骨髓细胞有丝分裂旺盛，所以不需要体外培养就可以直接做实验。外周血淋巴细胞几乎都是处在G0或者G1期，一般情况下是不分裂的。在培养基中加入植物凝集素时，淋巴细胞受到刺激时转化为淋巴母细胞，并开始进行有丝分裂。
3、制备小鼠染色体标本时,秋水仙素,氯化钾,乙醇,冰乙酸的作用分别是什么?
蛙骨髓细胞染色体玻片标本的制作
一、实验目的
1、了解动物细胞染色体制片的原理。
2、学习蛙骨髓细胞染色体制片的方法。
3、观察蛙染色体的数目和形态。
二、实验原理
小型动物染色体制片最好、最有效的材料就是骨髓组织。在骨髓细胞中，有丝分裂指数相当高，可直接得到中期细胞。为提高有丝分裂指数，实验前，于动物腹腔内注射一定量的秋水仙素溶液，取骨髓后，经低渗处理、固定、滴片、空气干燥后即可获得良好的中期分裂相。
三、实验材料、
蛙类
四、器具及药品
注射器，离心管、解剖器、离心机，冰箱、电子天平，显微镜，搪瓷缸，载玻片，烧杯，滴管，秋水仙素，KCl，甲醇、冰乙酸，乙醇。
五、实验步骤
一离心法（适合于个体大的蛙）
1、前处理
目的：改变细胞质的粘度，抑制或破坏纺锤体的形成，使染色体缩短和分散，获得较多中期分裂相。
实验前8-20小时，将蛙称重，按每克体重10-40ug的剂量（无尾类10-20ug，有尾类30-40ug）经腹腔注射秋水仙素溶液，秋水仙素溶液浓度100-1000ug/ml，按蛙大小来配。
2、取骨髓细胞
将蛙麻醉，用手术剪剥开腹腔，取下四肢骨，剔净肌肉，放到盛有0.046mol/l的KCl的小烧杯中洗一下，用镊子夹出来，剪掉两端关节，将装有0.046mol/l的KCl的注射器从骨一头插入，冲骨髓细胞于干净的离心管内，反复冲洗几次，直到骨变白为止。注意这一过程不要让组织块掉入离心管。
3、低渗处理
目的：使细胞吸水膨胀，细胞膜易破裂，有助于染色体的分散。
当骨髓细胞全部冲入离心管后，开始计时，即低渗开始。室温下低渗处理30-40分钟，在此过程中，要用吸管反复吹打。
另外取预先洗净的载玻片放入盛有蒸馏水的搪瓷缸中，置冰箱中冰冻。
4、固定
目的：尽快杀死细胞，使细胞尽可能保持原有的状况，并且还可以去掉细胞质。
将离心管两两平衡后，对称放入离心机内，以1000转/分离心10分钟，轻轻取出，弃上清液，沿管壁缓慢加入现配卡诺氏固定液6ml左右，并用吸管吹散细胞团，固定30分钟，平衡后再离心，弃上清液，加卡诺氏固定液进行第二次固定。
注意，固定液要现配，每次离心前都要平衡，离心的时间、速度均同第一次。由于每离心一次，细胞要损失30％左右，因此对个体小的蛙第二次固定也可省去，但固定次数少，细胞质不易去掉，影响效果，固定次数多，离心后细胞损失多。这一茅盾的解决有待多次实验的摸索，原则上大型蛙可固定2-3次，小型蛙1次。
4、比较植物材料和动物材料在制备染色体标本过程中的区别
植物
1 材料与方法
1.1 供试材料 试验用植株由校园内采集.
1.2 根尖制片
1.2.1 常规压片 通常是在早上9-10点采集葱兰的根然后在室温下放入0.1％秋水仙素溶液中进行预处理处理8 h.然后就在常温把材料放在卡诺氏固定液下固定10m,接下来就在1 mol／L盐酸溶液中解离到松软刚合适为止.最后是用蒸馏水将葱兰根冲洗干净,这样前处理就结束.处理完后就可以用醋酸洋红染色或改良苯酚品红染色[4].压片/涂片后选取典型的染色体,在40倍物镜及油镜下显微照相.
1.2.2 去壁低渗法 去壁低渗法也是把材料放0.1％秋水仙素溶液中进行预处理处理8 h.然后前低渗即是将根尖放在0.075 tool／L KCI低渗液中,在20～25℃条件下处理0.5h.接下来就是最关键的去壁,倒去KCI溶液,加入2.5％混合酶液,在25～30℃温度下处理2～5 h左右.去壁后要进行后低渗,使细胞完全胀,即是用20～30℃蒸馏水慢慢冲洗2～3次后,再将根尖放在0.075 tool／L KCI低渗液中处理.
动物
1)动物的选择,一般用小鼠,其繁殖能力强,易于饲养.我们常用的是它们的骨髓细胞和精巢,因其分裂指数较高,不用体外培养就可以得到分裂中期的细胞.
2)秋水仙素用量要注意,太多或处理时间过长,会导致染色体的过分凝缩或着丝点裂解,最终会引起染色体形态不正常,甚至被破坏或溶解.
3) 低渗处理很关键.低渗液的量、处理时间均与细胞的数量有关.低渗过度,细胞会破裂；低渗不足则染色体在一起,分散不开.
4) 离心速度或离心时间也能影响染色体标本的制备.离心速度过大或离心时间过长,则会引起细胞破裂；反之,离心速度过小或离心时间过短,则细胞沉降不下来,则会引起大量细胞的丢失.
5) 固定液要随用随配,固定彻底后再打散细胞团块,否则细胞容易破碎,染色体分散亦受到影响.
6) 载玻片要预冷.冷却不够,则会影响染色体的附着和铺展.
7) 用吸管吹散细胞时用力必须尽量轻柔,用力过大则会造成细胞破裂,而染色体也会弥散在溶液中,在随后的离心中将会丢失.
8) 滴片时的高度很重要,高度过低细胞不会破裂；过高则染色体过于分散甚至丢失,无法辨别出染色体的准确数量.
5、什么样的动物细胞可直接用于染色体标本制备
直接制备的话zd，就算是真皮层分裂旺盛的细胞，得到的分裂相也可能太少了，要制备比较多的染色体分裂相出来的话，可以对外周血液进行增内殖后制备起来多一点的，你可以取大鼠或者兔子静脉血，肝素钠抗凝，用细胞培养基（1640培养基混合小牛血清、抗生素、植物凝集素）37摄氏度进行48小时增殖。
当然要是您的条件不成熟的话，可以用小鼠的骨髓进行直接的染色体制备，容效果比真皮层细胞好的多。
6、在骨髓染色体标本制备实验中,低渗的作用是什么?
使细胞膨胀，染色体变得疏松。
7、骨髓细胞染色体标本制作时，为什么要
小鼠骨髓细胞的染色体标本一般百制备成什么片
首先要提前2小时向小鼠注射秋水仙素,处死小度鼠,剪下四肢,剔除肉等,剪碎骨,加生理盐水,离心取回细胞（离心管底部）,再经低渗处理,染色,滴冰片,镜检.很麻烦,具体的你可以去图书馆查阅答相关资料(动物染色体制备).
8、如何能制备出高分辨显带染色体标本
小鼠（或蟾蜍）中期染色体标本的制备（1）称出小白鼠或冬眠复苏后青蛙（蟾蜍）的体重，然后按每克体重4μg的剂量腹腔注射秋水仙素溶液（注意用0.9％生理盐水配制成0.8g/L）。（2）间隔3～4h后处死小白鼠，迅速取下2块股骨，去两端骨头，用2mL注射器冲洗出骨髓细胞（2mL在37℃下预热的含肝素生理盐水）。（3）静置片刻，待大块物质沉底后，小心地用滴管将骨髓细胞悬液移至刻度离心管中，以1000r/min离心10min。（4）弃去上清液，留下0.5mL，加入预热37℃的蒸馏水2～4mL。37℃水溶低渗10～15min，以1000r/min离心10min。（5）弃去上清液，留下0.5mL，加入新配固定液2mL，固定30min，离心（1000r/min）10min。（6）重复步骤五1～2次（固定15～20min）。（7）用剩下的0.5mL固定液制成细胞悬液，空气干燥法制片，吉姆沙（Giemsa）染色（40mL磷酸缓冲波加1mL吉姆沙染液）15～30min。蒸馏水冲洗，晾干后镜检，最后在油镜头下观察。可看到小白鼠有40条，20对染色体。 中期染色体是由两条染色单体组成。两条单体在着丝点处相连。由于着丝点区染色较浅故称内缢，也叫做主缢痕。在细胞分裂期间，纺锤丝与着丝点相连，有助于染色体向两极移动。着丝点将染色体分为两臂：短臂和长臂。在染色体臂上有时也能看到浅染内缢的节段，叫次缢痕（次缢痕与核仁形成有关，所以又叫做核仁形成区）。在染色体的一端，有时能看到次缢痕连一球形小体，叫随体。 根据着丝点位置的不同，可将染色体分为三种类型，即中着丝点染色体：着丝点的位置在染色体的中部或近中部，染色体长、短两臂几乎相等；亚中着丝点染色体：着丝点位置偏于一端，染色体的两臂有明显的差别；近端着丝点染色体：着丝点的位置几乎位于染色体的顶端，染色体短臂极小，有的几乎不易观察到。小鼠的染色体全部为端着丝点
9、小鼠骨髓细胞的染色体标本一般制备成什么片
小鼠骨髓细胞的染色体标本一般制备成什么片
首先要提前2小时向小鼠注射秋水仙素,处死小鼠,剪下四肢,剔除肉等,剪碎骨,加生理盐水,离心取细胞（离心管底部）,再经低渗处理,染色,滴冰片,镜检.很麻烦,具体的你可以去图书馆查阅相关资料(动物染色体制备).