1、由小鼠骨髓瘤细胞与一B细胞融合后形成的细胞克隆所产生的抗体称为
答案是A,这应该毫无疑问吧。
教材上对单克隆抗体应该有比较详尽的介绍,我来说说B、C、D选项。
多克隆抗体:天然抗原分子中通常含有多个不同的抗原表位,那么该抗原刺激机体后,多个B细胞克隆被激活,从而产生的抗体中实际上含有针对该抗原各个表位的免疫球蛋白,称为多克隆抗体。多克隆抗体获得的途径有:动物免疫血清、恢复期病人血清或者免疫接种人群。
单链抗体:单链抗体是利用基因工程技术在大肠杆菌中表达的人工合成抗体,只有完整抗体的一条链,因此得名为单链抗体。它是由抗体重链可变区和轻链可变区通过15~20个氨基酸的短肽连接而成。
嵌合抗体:以人-鼠嵌合抗体为例,它是一种通过基因工程技术制备的抗体,由鼠源性抗体的V 区基因与人抗体的C 区基因拼接为嵌合基因,然后插入载体,转染骨髓瘤组织表达的抗体分子。
2、制备小鼠骨髓染色体标本过程中有哪几个主要步骤影响制片结果
在制备小鼠骨髓细胞染色体标本过程中以下几个步骤需要注意:
提前3-4小时候注射秋水仙素,时间太长或者太短都会影响染色体中期的数目和形态。
在低渗过程中时间和吹打都很重要,低渗过度染色体膨胀,染色后肥肥的,低渗时间不过染色后染色体颜色很深看不出条带。
滴片,如果是教学的实验,要求玻片是冰的,而且要倾斜,滴的高度一般在25-30CM,滴完要过酒精灯,让固定液蒸发。滴的数量不要太多否则会重叠.如果是医院里的染色体制片有专门的滴片机。
小鼠骨髓细胞染色体标本制作:
原理:
由于小鼠四肢骨内骨髓细胞中的造血干细胞是生成各种血细胞和原始细胞,具有高度的分裂能力,本实验采用这一材料,通过前处理,低渗,固定,制片,染色等步骤制得染色体标本,可观察到许多处于分裂中期的染色体,可以进行染色体组型分析;
试剂、试剂盒:秋水仙素、姬姆萨染液、固定液、低渗液、生理盐水;
仪器、耗材:天平、离心机、恒温培养箱、显微镜;
实验步骤
一、材料和方法
1. 材料:小白鼠。
2. 设备:天平,离心机,恒温培养箱,显微镜。
3. 药品:秋水仙素,姬姆萨染液,固定液,低渗液,生理盐水。
二、步骤
秋水仙素处理--取骨髓--低渗处理--固定--离心--再固定--再离心--滴片--染色--镜检--封片。
3、由小鼠的B淋巴细胞(染色体数目40条)和小鼠骨髓瘤细胞(染色体数目60条)制备的杂交瘤(问题补充)
人家问的是常规下的染色体数,你硬是去分析有丝分裂后期,怎么行呢。再者,细胞处于分裂期的时间很短,别说分裂后期了。
4、如何取小鼠骨髓细胞
1、颈椎脱臼法处死小鼠(C57型小鼠),放在75%酒精中侵泡3-5分钟后,拎出后将小鼠铺于超净台上一个消毒托盘上。
2、无菌提取小鼠的四肢骨,用眼科镊小心捏起小鼠两髋关节之间的腹部皮肤,用眼科剪小心剪开皮肤,并分离两下肢的皮肤,往下在脚踝处剪断,往上在髋关节处剪断,这样可以游离出小鼠的两条下肢。
3、小心剥离肌肉,分别剪下Femurs(大腿骨)and Tibias(胫骨),剪去两端软骨,露出红色的骨髓腔。注意尽可能少的剪走骨髓腔。用纱布将骨头上的肌肉用纱布擦拭干净。
4、拿一支1ml的无菌注射器,每支吸取1mlHBSS液,并用无菌的针头套管将之轻轻拧弯。轻轻插入骨髓腔,冲洗骨髓腔以获得骨髓,一般用2-3ml培养基冲洗两次,可冲出绝大部分细胞。
5、过滤:用2OO目的滤网过滤,将滤网的中央插入到离心管里面25px处,然后用注射器吸取骨髓液,慢慢将骨髓液经滤网注入离心管中,去除残渣。
6、离心:将离心管放置离心机中离心10分钟(1350r/min)
7、去上清,加入1ml红细胞裂解液ACK,静置3分钟,再加9ml HBSS溶液,进行离心10分钟,弃上清。
8、用HBSS液洗涤骨髓细胞2次,室温,1350r/min离心10分钟。计数活细胞,用培养基调整细胞浓度至1X106个细胞/ml.
9、在试管中加入RPMI-1640培养基,然后再加入20ng/ml的细胞因子GM-CSF、5%FBS、0.1%的2-巯基乙醇,
10、吸取培养基加入到沉淀中混匀,24孔板铺板培养,每个孔1ml.
5、如何提取小鼠骨髓细胞?
1、颈椎脱臼法处死小鼠(C57型小鼠),放在75%酒精中侵泡3-5分钟后,拎出后将小鼠铺于超净台上一个消毒托盘上。
2、无菌提取小鼠的四肢骨,用眼科镊小心捏起小鼠两髋关节之间的腹部皮肤,用眼科剪小心剪开皮肤,并分离两下肢的皮肤,往下在脚踝处剪断,往上在髋关节处剪断,这样可以游离出小鼠的两条下肢。
3、小心剥离肌肉,分别剪下Femurs(大腿骨)and Tibias(胫骨),剪去两端软骨,露出红色的骨髓腔。注意尽可能少的剪走骨髓腔。用纱布将骨头上的肌肉用纱布擦拭干净。
4、拿一支1ml的无菌注射器,每支吸取1mlHBSS液,并用无菌的针头套管将之轻轻拧弯。轻轻插入骨髓腔,冲洗骨髓腔以获得骨髓,一般用2-3ml培养基冲洗两次,可冲出绝大部分细胞。
5、过滤:用2OO目的滤网过滤,将滤网的中央插入到离心管里面25px处,然后用注射器吸取骨髓液,慢慢将骨髓液经滤网注入离心管中,去除残渣。
6、离心:将离心管放置离心机中离心10分钟(1350r/min)
7、去上清,加入1ml红细胞裂解液ACK,静置3分钟,再加9ml HBSS溶液,进行离心10分钟,弃上清。
8、用HBSS液洗涤骨髓细胞2次,室温,1350r/min离心10分钟。计数活细胞,用培养基调整细胞浓度至1X106个细胞/ml.
9、在试管中加入RPMI-1640培养基,然后再加入20ng/ml的细胞因子GM-CSF、5%FBS、0.1%的2-巯基乙醇,
10、吸取培养基加入到沉淀中混匀,24孔板铺板培养,每个孔1ml.
6、如何从小鼠骨髓中分离和培养DC
拉颈处死小鼠,无菌剥离股骨和胫骨,用Hank’S冲出骨髓细胞,PBS洗
涤1次,用0.83%Tris—NH4CL裂解红细胞,RPMI1640培养液洗涤2次,调整细胞浓度为1×106个/mL,
并加入rmGM—CSF(1000 U/mL)和rmlL-4(500 U/mL),接种于24孔培养板,置于37~C,5%CO2孵箱中
培养.第3天轻轻摇动培养板,吸走大部分悬浮细胞,加人等量的培养液,并补足细胞因子.隔日半量换液
1次,第7天收集悬浮或稍微贴壁的细胞.
7、小鼠骨髓幼稚细胞和lymphocyte的区别
小鼠骨髓幼稚细胞和lymphocyte的区别
成年人的骨髓分两种:红骨髓和黄骨髓。
红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用,白细胞能杀灭与抑制各种病原体,包括细菌、病毒等;某些淋巴细胞能制造抗体。因此,骨髓不但是造血器官,它还是重要的免疫器官。
黄骨髓主要是脂肪组织,当人体贫血时,它可以转化为红骨髓。有些药物如氯霉素及呋喃类,在长期大量使用后,可影响骨髓造血功能,引起再生障碍性贫血.