1、如何从小鼠骨髓中分离和培养DC
拉颈处死小鼠，无菌剥离股骨和胫骨，用Hank’S冲出骨髓细胞，PBS洗
涤1次，用0．83％Tris—NH4CL裂解红细胞，RPMI1640培养液洗涤2次，调整细胞浓度为1×106个／mL，
并加入rmGM—CSF(1000 U／mL)和rmlL－4(500 U／mL)，接种于24孔培养板，置于37~C，5％CO2孵箱中
培养．第3天轻轻摇动培养板，吸走大部分悬浮细胞，加人等量的培养液，并补足细胞因子．隔日半量换液
1次，第7天收集悬浮或稍微贴壁的细胞．
2、如何提取小鼠骨髓细胞?
1、颈椎脱臼法处死小鼠(C57型小鼠)，放在75%酒精中侵泡3-5分钟后，拎出后将小鼠铺于超净台上一个消毒托盘上。
2、无菌提取小鼠的四肢骨，用眼科镊小心捏起小鼠两髋关节之间的腹部皮肤，用眼科剪小心剪开皮肤，并分离两下肢的皮肤，往下在脚踝处剪断，往上在髋关节处剪断，这样可以游离出小鼠的两条下肢。
3、小心剥离肌肉，分别剪下Femurs（大腿骨）and Tibias（胫骨）,剪去两端软骨，露出红色的骨髓腔。注意尽可能少的剪走骨髓腔。用纱布将骨头上的肌肉用纱布擦拭干净。
4、拿一支1ml的无菌注射器，每支吸取1mlHBSS液，并用无菌的针头套管将之轻轻拧弯。轻轻插入骨髓腔，冲洗骨髓腔以获得骨髓，一般用2-3ml培养基冲洗两次，可冲出绝大部分细胞。
5、过滤：用2OO目的滤网过滤，将滤网的中央插入到离心管里面25px处，然后用注射器吸取骨髓液，慢慢将骨髓液经滤网注入离心管中，去除残渣。
6、离心：将离心管放置离心机中离心10分钟（1350r/min）
7、去上清，加入1ml红细胞裂解液ACK，静置3分钟，再加9ml HBSS溶液，进行离心10分钟，弃上清。
8、用HBSS液洗涤骨髓细胞2次，室温，1350r/min离心10分钟。计数活细胞，用培养基调整细胞浓度至1X106个细胞/ml.
9、在试管中加入RPMI-1640培养基，然后再加入20ng/ml的细胞因子GM-CSF、5%FBS、0.1%的2-巯基乙醇，
10、吸取培养基加入到沉淀中混匀，24孔板铺板培养，每个孔1ml.
3、跪谢先，我要收集骨髓液，分离单核细胞提取DNA和RNA。应该怎样保存骨髓液呢
一般生物样品都是放在-80冰箱保存，不过如果是蛋白的话，-80冰箱保存两个月也会降解！RNA时间久更短了。
融化时，打一盒冰 ，样品放在冰上溶解。
运输条件一般有两种，一种是放冰袋到泡沫盒中，另一种就是放干冰到泡沫盒中，
4、如何取小鼠骨髓细胞
1、颈椎脱臼法处死小鼠(C57型小鼠)，放在75%酒精中侵泡3-5分钟后，拎出后将小鼠铺于超净台上一个消毒托盘上。
2、无菌提取小鼠的四肢骨，用眼科镊小心捏起小鼠两髋关节之间的腹部皮肤，用眼科剪小心剪开皮肤，并分离两下肢的皮肤，往下在脚踝处剪断，往上在髋关节处剪断，这样可以游离出小鼠的两条下肢。
3、小心剥离肌肉，分别剪下Femurs（大腿骨）and Tibias（胫骨）,剪去两端软骨，露出红色的骨髓腔。注意尽可能少的剪走骨髓腔。用纱布将骨头上的肌肉用纱布擦拭干净。
4、拿一支1ml的无菌注射器，每支吸取1mlHBSS液，并用无菌的针头套管将之轻轻拧弯。轻轻插入骨髓腔，冲洗骨髓腔以获得骨髓，一般用2-3ml培养基冲洗两次，可冲出绝大部分细胞。
5、过滤：用2OO目的滤网过滤，将滤网的中央插入到离心管里面25px处，然后用注射器吸取骨髓液，慢慢将骨髓液经滤网注入离心管中，去除残渣。
6、离心：将离心管放置离心机中离心10分钟（1350r/min）
7、去上清，加入1ml红细胞裂解液ACK，静置3分钟，再加9ml HBSS溶液，进行离心10分钟，弃上清。
8、用HBSS液洗涤骨髓细胞2次，室温，1350r/min离心10分钟。计数活细胞，用培养基调整细胞浓度至1X106个细胞/ml.
9、在试管中加入RPMI-1640培养基，然后再加入20ng/ml的细胞因子GM-CSF、5%FBS、0.1%的2-巯基乙醇，
10、吸取培养基加入到沉淀中混匀，24孔板铺板培养，每个孔1ml.
5、单克隆抗体中的骨髓瘤细胞从哪里提取?是不是在提取小鼠的免疫细胞的胰脏中？
不是提取小鼠胰脏中免疫细胞。是从骨髓中提取癌变的细胞，这类细胞具有永生性，骨髓瘤细胞在体外培养条件下无限增殖，但不能产生抗体。B淋巴细胞能产生抗体，不能在体外增殖。二者融合以后就能无限增殖又能产生抗体。
6、骨髓如何储存？
现在国家有这种项目 叫做脐带血库 省级单位有。 国家批准了14家。
零下86度冷冻保存
一般是取妇女生产时她的脐带血 备给她的小孩用
大人的脊髓牵扯到配型等问题 一般都不保存
7、做小鼠骨髓移植照光有什么要注意的
balb/c小鼠照8个Gy应该没有问题的，致死剂量是8.5
注意事项
1、小鼠是几周的，受体鼠最好是8周龄以上的
2、雄的比较容易活下来
3、骨髓单个核输注每只尾静脉1－2X10的7次方，你细胞是不是输得太少了
4、另外照完得老鼠要按裸鼠那样饲养，就是在SPF动物房养，用消过毒的笼子，食水都要消毒的
5、食用的水要用酸化水，PH值3－4的
6、如果小鼠照射完看着状态不好，可以腹腔给一点没有血清得培养基，如1640
7，想知道小鼠是不是造血衰竭死亡，你最好把刚刚死亡得小鼠骨髓切片，HE染色看一下，以前我碰见过小鼠别得细胞都恢复了，就是巨核恢复得慢，小鼠出血死掉。
8、当然放射源得数字不准，你可以摸一下照射得剂量梯度，如果照射的空白组死亡，而打同基因骨髓细胞的小鼠还活着，就是最佳的照射剂量了，
8、如何从小鼠骨髓细胞中提取DNA
拿到小鼠骨髓细胞样品，提取DNA，这样就得到 小鼠骨髓细胞DNA了。