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阻碍骨髓瘤细胞合成途径用到的HAT

发布时间:2021-05-13 04:26:51

1、单克隆抗体制备过程中所用的骨髓瘤细胞是一种基因缺陷型细胞,在含有此黄嘌呤、氨基酸

选C。
A:有题目可知骨髓瘤细胞之间形成的融合细胞依然基因缺陷,不能生长
B:脾细胞之间形成的融合细胞是不可增殖细胞,题目说“经过数代培养”,所以此时这些细胞早已凋亡,即使有也是很少的,可以忽略不计。
C:正确,他不仅可以增殖而且可以在此培养基生长
D:同B
谢谢,希望可以帮到你

2、HAT选择培养基的作用是筛选出什么(在单克隆抗体制备过程中)。

HAT选择培养基的作用是筛选出(杂交瘤细胞)。
HAT选择培养基含有次黄嘌呤、氨基喋呤和胸腺嘧啶,其中氨基喋呤可阻断DNA合成的主要途径。主要途径阻断后,依靠应急途径即在HGPRT(次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶)和TK(胸苷激酶)作用下,利用胸腺嘧啶和次黄嘌呤合成DNA,缺少其中一种,DNA合成不能发生。用于杂交的骨髓瘤细胞系均由经有毒药物诱导而成选择产生的代谢缺陷型细胞,细胞内均无TK或HGPRT,所以单个或融合骨髓瘤细胞在HAT培养液中将死亡。B细胞虽然有HGPRT和TK,但在体外通常培养条件下,尤其是在单个细胞环境下难于长期存活和增殖传代。因此只有杂交瘤细胞才能在HAT培养液中生长繁殖

3、正常细胞合成DNA有两条途径:a通路(主通路)和b通路(旁路).用于进行单克隆抗体制备的骨髓瘤细胞是DNA

①细胞融合方法有物理法、聚乙二醇的化学法、生物法,而该培养对细胞融合没有影响,故①错误;
②B淋巴细胞在体外不能增殖,不能再培养基上生存下来,故②正确;
③骨髓瘤细胞是b通路缺陷型,剩下的a通路被阻断也被抑制,不能合成DNA,故③正确;
④只有杂交瘤细胞具有a通路,能进行DNA的复制,且能无限增殖,能在培养基上生存下来,故④正确;
⑤骨髓瘤细胞相互融合的细胞也是b通路缺陷型,剩下的a通路被阻断也被抑制,不能合成DNA,故⑤正确;
⑥B淋巴细胞和B淋巴细胞相互融合的细胞本身就不能增殖,会被淘汰,故⑥正确.
故选B.

4、为什么可以利用HAT培养基筛选出杂交瘤细胞

在HAT培养基中含有次黄嘌呤(H)、氨基蝶呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)。
由于选用西黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶缺陷型(HPRT-)骨髓瘤细胞或胸腺嘧啶核苷激酶缺陷(TK-)骨髓瘤细胞为亲本,该细胞只能通过全合成途径合成DNA。因为淋巴细胞具有合成DNA的两条途径,因此杂种细胞通过互补作用获得HRPT或TK基因,可应用培养基中次黄嘌呤及腺嘧啶核苷,通过不就合成途径合成DNA。
在HAT培养基中,HPRT-或TK-亲本骨髓瘤细胞死亡,B淋巴细胞在一般培养基中不能长期生长,一般于二周内均死亡,只有杂种细胞存活。

5、单克隆抗体制备过程中所用的骨髓瘤细胞是一种基因缺陷型细胞,其合成核酸的途径能被氨基喋呤阻断.现将从

A、筛选出杂交瘤细胞不止一种,能分裂繁殖,产生抗体,则专一性抗体检验呈阴性;故A正确.
B、筛选出一种杂交瘤细胞,能分裂繁殖,产生抗体,专一性抗体检验呈阳性;故B正确.
C、没有活细胞,一定产生抗体;故C错误.
D、细胞全部死亡,不能产生抗体;故D正确.
故选C.

6、效应T细胞与骨髓瘤细胞合成单克隆抗体么?

一种效应b细胞只能分泌一种一种抗体,所以可以用效应B细胞与骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞,选择可以产生抗体的杂交瘤细胞就可以制造单克隆抗体。
制造生物导弹是用抗体将药物带到病变部位,通常用磷酯分子包裹。如果用效应t细胞有一下几个问题
效应t细胞高度分化,不分裂,不易获得大量效应t细胞
不同的人的效应t细胞不同,如果乱用会造成排斥反应。

7、筛选杂交瘤细胞的50xhat怎么配制

1.在HAT培养基[属于选择性培养基,含有次黄嘌呤(H)、氨基喋呤(A)和胸腺嘧啶核苷(T)]中进行选择性培养,未融合的脾细胞因不能在体外长期存活而死亡;未融合的骨髓瘤细胞合成DNA的主要途径被培养基中的氨基蝶呤阻断,又因缺乏次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶(HGPRT),不能利用培养基中的次黄嘌呤完成DNA的合成过程而死亡。只有融合的杂交瘤细胞由于从脾细胞获得了次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶,因此能在HAT培养基中存活和增殖。经过克隆选择,可筛选出能产生特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞,在体内或体外培养,即可无限制地大量制备单克隆抗体。
2.仅仅就“两个细胞的融合”而言有三种,有“瘤-瘤”型融合细胞、“瘤-B”型融合细胞、“B-B”型融合细胞。(实际上,还有未融合细胞、三细胞融合....等)

8、细胞融合问题请问两种细胞融合后,在筛选融合细胞是怎

选择性筛选的参照标准是自己定的,可以由融合前细胞的特性出发,找出其中之一的代谢特点.
比如在筛选杂交瘤细胞时,B细胞是可以进行细胞外途径的DNA合成的,但是寿命很短.而骨髓瘤细胞是没有细胞外源合成DNA这一途径的.所以我们提供的培养基可以是阻断细胞内源合成DNA途径的选择培养基,这样,单一的瘤细胞会合成不了DNA而死亡,单一的B细胞在一段时间后,也死亡.剩下的只有需要的杂交瘤细胞了.这是经典的HAT选择培养基的原理.缺失基因的细胞,是不能正常代谢的,一般是会死亡的,但在某些特殊实验中,人工培养一些缺陷型细胞,以便于标记特征,便于筛选也是可以的.找出的代谢特点还可以包括,温度差异,PH差异等,很灵活,也很困难.

9、SP2/0细胞特性,为什么不能在HAT培养基中生长?

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