骨髓涂片实验

1、求涂片免疫组化的具体步骤

112 方法: 抽取013ml 骨髓用涂有蛋
白甘油的硅化玻片涂片5～7 张, 同时
用EDTA 抗凝的试管抽取2ml 静脉血行
流式细胞(FCM) 检查。
113 免疫组化试剂来源: 来自福州迈
新公司即用型第二代免疫组化Elivision
TMplus 广谱试剂盒。
114 免疫组化步骤: ①石蜡涂片脱蜡
和水化后, 用PBS (PH714) 冲洗3 次,
每次3min。②根据每一种抗体的要求,
对组织抗原进行相应的修复。③每张涂
片加50ul3 %过氧化氢溶液, 室温下孵
育10min , 以阻断内源性过氧化物酶的
活性。PBS 冲洗3 次, 每次3min。④每
张涂片根椐需要加50ul 的第一抗体
( 如CD20 , CD3 , CD45RO , CD45RB ,
TdT, MPO , CD5 , CD79 , CD56 , CD79a ,
CD43 , CD5 , CD10 ) , 室温下孵育
60min。⑤除去PBS 液, 每张涂片加
50ul 聚合物( Polymer Enhancer) , 室温
下孵育20min , PBS 冲洗3 次, 每次
3min。⑥除去PBS 液, 每张涂片加50ul
酶标抗鼠/ 兔聚合物(Polymerized HRP -
Anti Ms/ Rb IgG) , 室温下孵育30min。
PBS 冲洗3 次, 每次3min。⑦除去PBS
液, 每张涂片加50ul 新鲜配制的DAB
或AEC 溶液, 显微镜下观察3～10min。
⑧自来水冲洗, 苏木紫复染, 011 %盐
酸分化, 自来水冲洗, PBS 返蓝。⑨涂
片经过梯度酒精脱水干燥, 用DAE 显
色, 中性树胶封固。

2、骨髓穿刺 骨髓活检 骨髓细胞学检查 骨髓涂片这几个有什么区别？

您好：骨髓穿刺是诊断血液科常用的一种诊断方法，骨髓活检是骨髓穿刺后送检的病理检查，可以进一步明确疾病类型。骨髓细胞学检查就是骨髓活检，骨髓涂片是穿刺后做检查之前做的涂片，是一种标本。

3、骨髓涂片镜检中低倍镜检验的内容包括哪些

取材、涂片、染色情况

骨髓有核细胞增生程度

巨核细胞计数（分类需要油镜）

有无特殊细胞

4、骨髓涂片是什么意思

成年人的造血细胞起源在骨髓里面，通过检查骨髓里面的原始及幼稚细胞，可以判断是否出现了血液系统的疾病（紊乱，停滞，障碍等等）。

成人的含有骨髓的骨骼（有的骨骼带腔隙，有的几乎不带），一般选择髂骨 和胸骨柄 的部分 穿刺，此部位骨髓含量丰富，易于穿刺采集。

穿刺采集的骨髓通过一定的技术均匀的涂布在玻片上，制成骨髓涂片，染色后，观察结果。

5、一张良好的骨髓涂片有什么要求

制血骨髓涂片应结合实际情况，若是再生障碍性贫血，可涂厚些，涂片要求头、体、尾分明，回髓小体丰答富，脂肪滴可见。骨髓涂片是判断有核细胞增生程度，骨髓涂片采用铁染色及不同的组化染色等可为缺铁性贫血及各类白血病提供诊断依据。低倍镜下选择细胞分布均匀部位观察骨髓片有核细胞增生情况，根据骨髓片中有核细胞的密度或有核细胞与成熟红细胞的比例来估计有核细胞的增生程度。分类记数100-200个白细胞，计算各类白细胞的百分率，描述红细胞形态，血小板数量和分布情况。如见到幼红细胞按分类100个白细胞中幼红细胞的数量来报告，并说明其阶段性有核细胞分类计数；计算粒、红比值；观察有无其他特殊细胞及寄生虫。

6、骨髓检查是怎么做的

首先告诉你，有点痛，在局部麻醉作用下能忍受，沉的感觉高于痛的感觉。骨髓穿刺术 的
1，目的
观察骨髓内细胞形态及分类，以协助诊断血液系统疾病；败血症或某些传染病需骨髓细菌培养及涂片检查某些寄生虫病；恶性肿瘤疑骨髓转移；用于骨髓移植等。
2．适应证
2．1 各类血液病的诊断。
2．2 败血症，某些传染病或寄生虫病需行骨髓细菌培养或涂片寻找疟原虫及黑热病原虫者。
2.3 网状内皮系统疾病的诊断。
2．4 恶性肿瘤疑骨髓转移者。
3．禁忌证
血友病及穿刺部位有感染及皮肤病时不宜做穿刺。
4．用物
清洁盘，骨髓穿刺包，2％碘酒和75％酒精，5ml和20ml灭菌注射器，无菌手套，2％普鲁卡因，清洁干燥玻片，推片，如做骨髓培养，另需20ml灭菌注射器、含培养基的细菌培养瓶，酒精灯，火柴。
5. 病人准备
5．1 患者需洗澡，更换清洁衣服。
5．2 向患者做好解释工作，以取得配合。
5．3 使患者树立信心，消除其恐惧、紧张心理。
6．方法
6．1 髂前上棘穿刺术
6．1．1 患者仰卧，取髂前上棘向后1～1．5cm的一段较宽镕缘为穿刺点，局部常规消毒后铺洞巾，局部麻醉应达骨膜。
6．1．2 术者左手拇指及食指分别在髂前上棘内外因定皮肤，右手持穿刺针垂直刺入达骨膜后再进1cm即达骨髓腔。
6．1．3 刺人骨髓腔时有落空感，当即抽出针芯，接上20ml无菌干燥注射器，抽取骨髓约0．2ml左右作涂片检查；如作培养，取3～5ml骨髓。
6.1．4 术毕即插回针芯，拔出针头，局部敷以无菌纱布，用胶布固定。
6．2 镕后上棘穿刺术
6．2．1 患者侧卧或俯卧，髂后上棘一般均突出于臀部之上，能骨的两侧；或取骸骨上缘下6～8cm与脊柱旁开2～4cm之交点为穿刺点。
6．2．2 穿刺针的方向几乎与背部垂直，稍向外侧倾斜。
6．3 胸骨柄穿刺术
6．3．1 患者仰卧治疗台上，肩背部垫枕使头尽量后仰，并转向左侧，以充分暴露胸骨上切迹。
6．3．2 术者立于患者头侧，先用左手揭指摸清胸骨上切迹，并紧贴胸骨柄上缘将皮肤向下压紧，右手持针由切迹中央沿胸骨柄水平方向进针，慢慢旋转刺入，达胸骨柄上缘骨板之正中深度约0．5～1.0cm。
6．4 脊椎棘突穿刺术
6．4．1 患者侧卧或反向坐于椅子上，两臂置于椅背，头枕臂上。
6．4．2 以上部腰椎棘突为穿刺点，左手拇指及食指在预定穿刺的棘突上下固定皮肤，右手持针由棘突之侧方或中央垂直刺入。
6．5 胫骨穿刺术(仅适用2岁以内的患儿)
6．5．1 患儿仰卧治疗台上，由助手固定下肢，选胫骨结节平面下约1cm(或肠骨上中l／3交界处)之前内侧面肠骨为穿刺点。
6．5．2 左手拇指及食指固定皮肤，右手持针，在骨面正中部与之成垂直方向刺入。
7．注意事项
7．1 术前应向患者说明检查目的与方法，以取得配合。
7．2 严格无菌操作，以防感染。
7．3 物品准备齐全。
7．4 穿刺针经皮肤达骨膜后，针应与骨面垂直，缓慢旋转进针，持针须稳妥，切忌用力过猛或针头在骨面上滑动。如已刺入骨髓腔，此时针头应固定不动。
7．5 抽取骨髓涂片检查时，应缓慢增加负压，当注射器内见血后应立即停止抽吸，以免骨髓稀释。同时要作涂片及培养者，应先抽骨髓少许涂片，再抽骨髓培养，不可并做一次抽出。取下注射器时，应迅速插回针芯，以防骨髓外溢。
7．6 胸骨柄穿刺时，要求穿刺角度一定要与胸骨柄平行，以防止针尖滑脱或刺穿胸骨柄后壁皮质。
8．护理
8．1 术中注意观察患者的面色、脉搏、呼吸。
8．2 拔针时用力按压穿刺点，至不出血为止。
8．3 术后24小时内观察穿刺部位有无血肿、出血及感染征象。
8．4 穿刺处换药1次／日。
8．5 嘱患者三日内勿洗浴。

7、骨髓细胞涂片和骨髓活检

?

8、骨髓象是靠骨髓穿刺得到涂片做的，还是根据骨髓活检？也就是说骨髓活检的结果算骨髓象吗？

骨髓象是通过骨髓穿刺液制备涂片进行显微镜观察。骨髓活检是骨髓组织病理学检验的一部分，抽取骨髓组织制备切片，再行观察。骨髓活检的结果跟骨髓象相比，适用于原发性或继发性骨髓纤维化，某些白血病以及淋巴瘤病人，优点是取材多，保持骨髓结构，显示骨髓细胞之间及组织之间的相互关系，造血细胞密度及百分比，造血组织的分布等，使医生能全面了解骨髓病理学改变。骨髓活检的结果成为骨髓象不是特别准确，但是医生通常用“象”来代表分布形态，比如血象，也不用太计较这个叫法。