1、如何促进小鼠骨髓中的中性粒细胞移动到外周
小鼠骨髓中性粒细胞的分离
实验器材：器械（眼科小直剪2把，小弯镊3把），无菌塑料滴管，15ml离心管，4mlEP管，培养皿，1ml注射器，70um尼龙筛网，低温离心机 试剂：PBS（1×，10×），HBSS，percoll，percoll储存液（percoll:10×PBS=9:1），percoll溶液（45%，81%，62%，55%，50%，分别用1×PBS稀释Percoll储存液到相应浓度）Histopaque1119，小鼠中性粒细胞缓冲液（MNB，既含0.1%牛血清白蛋白，1%葡萄糖的HBSS溶液）
材料：8-12周C57小鼠 实验步骤：
1.拉颈处死小鼠，分离其胫骨和股骨，用纱布将胫骨和股骨擦干净，置于75%酒精中浸泡5min
2.用小直剪剪掉骨髓两端，暴露骨髓腔，用MNB冲洗，每次1ml，胫骨冲洗两次，股骨冲洗3次。
3.冲洗液用70um尼龙筛网过滤，离心收集细胞，600g 4℃ 10min,低减速。 4.弃上清，用3ml45%percoll溶液重悬细胞
5.Percoll梯度准备：3ml81%，2ml62%，2ml55%，2ml50%percoll溶液 6.小心的将细胞悬液置于percoll梯度上，1600g,30min,10℃,无制动离心。 7.弃掉62%percoll层以上的溶液，收集62%-81%之间的percoll层。
8.10mlMNB洗两次，600g,10℃,10min,离心。弃上清，用3mlMNB重悬细胞。
9.将细胞悬液小心得置于3mlHistopaque1119上，1600g,10℃,30min,无制动离心，去除红细胞层。
10.收集1119和MNB之间的细胞层，10mlMNB 洗两次，600g, 4℃ 10min,低减速离心 11.按需要将细胞用培养基重悬到一定的浓度。
2、怎样提取骨髓
我就提取过骨髓，一般是从屁股左测或右侧两边的骨头上提取
3、如何取小鼠骨髓细胞
1、颈椎脱臼法处死小鼠(C57型小鼠)，放在75%酒精中侵泡3-5分钟后，拎出后将小鼠铺于超净台上一个消毒托盘上。
2、无菌提取小鼠的四肢骨，用眼科镊小心捏起小鼠两髋关节之间的腹部皮肤，用眼科剪小心剪开皮肤，并分离两下肢的皮肤，往下在脚踝处剪断，往上在髋关节处剪断，这样可以游离出小鼠的两条下肢。
3、小心剥离肌肉，分别剪下Femurs（大腿骨）and Tibias（胫骨）,剪去两端软骨，露出红色的骨髓腔。注意尽可能少的剪走骨髓腔。用纱布将骨头上的肌肉用纱布擦拭干净。
4、拿一支1ml的无菌注射器，每支吸取1mlHBSS液，并用无菌的针头套管将之轻轻拧弯。轻轻插入骨髓腔，冲洗骨髓腔以获得骨髓，一般用2-3ml培养基冲洗两次，可冲出绝大部分细胞。
5、过滤：用2OO目的滤网过滤，将滤网的中央插入到离心管里面25px处，然后用注射器吸取骨髓液，慢慢将骨髓液经滤网注入离心管中，去除残渣。
6、离心：将离心管放置离心机中离心10分钟（1350r/min）
7、去上清，加入1ml红细胞裂解液ACK，静置3分钟，再加9ml HBSS溶液，进行离心10分钟，弃上清。
8、用HBSS液洗涤骨髓细胞2次，室温，1350r/min离心10分钟。计数活细胞，用培养基调整细胞浓度至1X106个细胞/ml.
9、在试管中加入RPMI-1640培养基，然后再加入20ng/ml的细胞因子GM-CSF、5%FBS、0.1%的2-巯基乙醇，
10、吸取培养基加入到沉淀中混匀，24孔板铺板培养，每个孔1ml.
4、牛骨髓是怎么提取出来的
1、牛骨髓提取方法：
选完整的脊椎骨,在醋里轻浸以下10分钟左右,在清水中洗净,切成你想要的几段长,再沸水中轻煮以下,就能顺利取出骨髓,再切除两端.就是你想要的。
2、牛骨髓，药剂，为牛科动物黄牛或水牛的骨髓。高蛋白、低脂肪及含优质有机钙的富营养原料，很多壮骨粉、补钙产品所用原料就是来自牛骨髓。
5、单克隆抗体中的骨髓瘤细胞从哪里提取?是不是在提取小鼠的免疫细胞的胰脏中？
不是提取小鼠胰脏中免疫细胞。是从骨髓中提取癌变的细胞，这类细胞具有永生性，骨髓瘤细胞在体外培养条件下无限增殖，但不能产生抗体。B淋巴细胞能产生抗体，不能在体外增殖。二者融合以后就能无限增殖又能产生抗体。
6、如何从小鼠骨髓中分离和培养DC
拉颈处死小鼠，无菌剥离股骨和胫骨，用Hank’S冲出骨髓细胞，PBS洗
涤1次，用0．83％Tris—NH4CL裂解红细胞，RPMI1640培养液洗涤2次，调整细胞浓度为1×106个／mL，
并加入rmGM—CSF(1000 U／mL)和rmlL－4(500 U／mL)，接种于24孔培养板，置于37~C，5％CO2孵箱中
培养．第3天轻轻摇动培养板，吸走大部分悬浮细胞，加人等量的培养液，并补足细胞因子．隔日半量换液
1次，第7天收集悬浮或稍微贴壁的细胞．
7、骨髓是从哪里抽取的怎样抽取呢？谢谢指教
不知道是不是你要的?呵呵
有二种主要方法
1、抽取骨髓造血干细胞：捐献者作全麻或局麻，从捐献者髂骨中抽取骨髓血。
2、外周血中采集干细胞：给捐献者注射动员剂，进行血液成分单采术，从捐献者外周血中采集造血干细胞。
中国造血干细胞捐献者资料库提倡哪种方法采集造血干细胞？
中国造血干细胞捐献者资料库提倡的采集方式是从外周血中采集造血干细胞。用科学方法将骨髓血中的造血干细胞大量动员到外周血中，从捐献者手臂静脉处采集全血，通过血细胞分离机提取造血干细胞，同时，将其它血液成份回输捐献者体内。
8、如何提取小鼠骨髓细胞?
1、颈椎脱臼法处死小鼠(C57型小鼠)，放在75%酒精中侵泡3-5分钟后，拎出后将小鼠铺于超净台上一个消毒托盘上。
2、无菌提取小鼠的四肢骨，用眼科镊小心捏起小鼠两髋关节之间的腹部皮肤，用眼科剪小心剪开皮肤，并分离两下肢的皮肤，往下在脚踝处剪断，往上在髋关节处剪断，这样可以游离出小鼠的两条下肢。
3、小心剥离肌肉，分别剪下Femurs（大腿骨）and Tibias（胫骨）,剪去两端软骨，露出红色的骨髓腔。注意尽可能少的剪走骨髓腔。用纱布将骨头上的肌肉用纱布擦拭干净。
4、拿一支1ml的无菌注射器，每支吸取1mlHBSS液，并用无菌的针头套管将之轻轻拧弯。轻轻插入骨髓腔，冲洗骨髓腔以获得骨髓，一般用2-3ml培养基冲洗两次，可冲出绝大部分细胞。
5、过滤：用2OO目的滤网过滤，将滤网的中央插入到离心管里面25px处，然后用注射器吸取骨髓液，慢慢将骨髓液经滤网注入离心管中，去除残渣。
6、离心：将离心管放置离心机中离心10分钟（1350r/min）
7、去上清，加入1ml红细胞裂解液ACK，静置3分钟，再加9ml HBSS溶液，进行离心10分钟，弃上清。
8、用HBSS液洗涤骨髓细胞2次，室温，1350r/min离心10分钟。计数活细胞，用培养基调整细胞浓度至1X106个细胞/ml.
9、在试管中加入RPMI-1640培养基，然后再加入20ng/ml的细胞因子GM-CSF、5%FBS、0.1%的2-巯基乙醇，
10、吸取培养基加入到沉淀中混匀，24孔板铺板培养，每个孔1ml.