骨髓巨细胞12

1、巨细胞病毒高出参考值是什么原因

巨细胞病毒(cytomegalovirus , CMV)【临床意义】
1.CMV如所有疱疹病毒一样广泛存在，除先天性感染、器官移植、输血以及潜伏病毒被激活等原因外，其他传染方式均不明了。人巨细胞病毒（HCMV）感染在人群中普遍存在，35岁以上的人有抗体者占80％。HCMV在健康人群中绝大多数表现为隐性或轻症状感染。病毒可长期存在于咽部、涎腺、子宫颈、阴道分泌物、精液、乳汁以及血液中。当人免疫功能低下时，常导致严重的感染，部分病例可因此丧生。如1/3以上的骨髓移植患者可并发有症状的CMV感染并导致间质性肺炎，是目前导致骨髓移植失败的重要原因之一。
2．年龄相关性发病率研究提示，在人的一生中围生期和生殖期发生CMV感染的危险性增高。围生期感染可通过宫颈分泌物和母乳来传播，而在性成熟期血清转化的突然升高则提示性病传播的可能性。虽然产前CMV感染的发生频率较低，但它可通过胎盘由母亲传递给胎儿，并成为新生儿精神发育迟缓和其他先天性缺陷的主要感染性原因。2000名婴儿中只有1名会出现严重的巨细胞包涵体病（CID)，而获得宫内无症状性感染的却有10倍之多。
3．在出生最初3周的新生儿尿液、呼吸道分泌物或者其他体液分离出HCMV是先天性感染最敏感和特异的确诊依据。尿液所含的病毒量较高，因此为首选的标本。由于母体IgG抗体能被动通过胎盘，IgG抗体测定在HCMV先天性感染诊断方面的应用价值有限。由于母体的IgM不会通过胎盘屏障，因此新生儿血清中出现CMV特异性IgM抗体，高度提示先天性或新生儿感染的可能性。如果婴儿具有典型症状，其HCMV抗体的滴度持续与母体的相当或者更高，存在先天性感染的可能性很大。如果母体和婴儿的HCMVIgG抗体均为阴性，可排除先天性HCMV感染。
4．如果没有实验室检查的支持，如病毒分离、IgM特异性抗体阳性或IgG特异性抗体水平显著升高，临床上不能诊断CMV感染。

2、巨细胞病毒到底是指那一种病？

【巨细胞病毒(Cytomegaoviyns,CMV)】:是一种疱疹病毒组DNA病毒。分布广泛,有与其他动物皆可遭受感染，引起以生殖泌尿系统，中枢神经系统和肝脏疾患为主的各系统感染，从轻微无症状感染直到严重缺陷或死亡。
巨细胞病毒(Cytomegalovirus CMV)亦称细胞包涵体病毒，由于感染的细胞肿大，并具有巨大的核内包涵体，故名。
一、生物学性状
CMV具有典型的疱疹病毒形态，其DNA结构也与HSV相似，但比HSV大5%。本病毒对宿主或培养细胞有高度的种特异性，人巨细胞病毒(HCMV)只能感染人，及在人纤维细胞中增殖。病毒在细胞培养中增殖缓慢，复制周期长，初次分离培养需30～40天才出现细胞病变，其特点是细胞肿大变园，核变大，核内出现周围绕有一轮“晕”的大型嗜酸性包涵体。
二、致病性
CMV在人群中感染非常广泛，我国成人感染率达95%以上，通常呈隐性感染，多数感染者无临床症状，但在一定条件下侵袭多个器官和系统可产生严重疾病。病毒可侵入肺、肝、肾、唾液腺、乳腺其他腺体，以及多核白细胞和淋巴细胞，可长期或间隙地自唾液、乳汗血液、尿液、精液、子宫分泌物多处排出病毒。通常口腔，生殖道，胎盘，输血或器官移植等多途径传播。
(一)先天性感染
妊娠母体CMV感染可通过胎盘侵袭胎儿引起先天性感染，少数造成早产、流产、死产或生后死亡。患儿可发生黄疸，肝脾肿大，血小板减少性紫斑及溶血性贫血。丰活儿童常遗留永久必性智力低下，神经肌内运动障碍，耳聋和脉络视网膜炎等。
(二)围产期感染
产妇泌尿道和宫颈排出CMV，则分娩时婴儿经产道可被感染，多数和症状轻微或无临床症状的亚临床床感染，有的有轻微呼吸道障碍或肝功能损伤。
(三)儿童及成人感染
通过吸乳、接吻、性接触、输血等感染、通常为亚临床型，有的也能导致嗜异性抗体阴性单核细胞增多症。由于妊娠，接受免疫抑制治疗，器官移植，肿瘤等因素激活潜伏在单核细胞、淋巴细胞中病毒，引起单核细胞增多症、肝炎、间质性肺炎、视网膜炎、脑炎等。
(四)细胞转化和可能致癌作用
经紫外线灭活的CMV可转化啮齿类动物胚胎纤椎母细胞。在某些肿瘤如宫颈癌、结肠癌、前列腺癌、Kaposis肉瘤中CMV DNA检出率高，CMV抗体滴度亦高于正常人，在上述肿瘤建立的细胞株中还发现病毒颗粒，提示CMV与其疱疹病毒一样，具有潜在致癌的可能性。
四、免疫性
机体的细胞免疫功能对CMV感染的发生和发展起重要作用，细胞免疫缺陷者，可导致严重的和长期的CMV感染，并使机体的细胞免疫进一步受到抑制，如杀伤性T细胞活力下降，NK细胞功能减低等。
机体原发感染CMV后能产生特异性抗体和杀伤性T淋巴细胞，激活NM细胞。抗体有限CMV复制能力，对相同毒株再感染有一定抵抗力，但不能抵抗内源性潜伏病毒的活化，及CMV其他不同毒株的外源性感染。而通过特异性杀性T淋巴细胞和抗体依赖细胞毒性细胞能发挥最大的抗病毒作用。
五、微生物学诊断
唾液、尿液、子宫颈分泌液等标本离心沉淀，将脱落细胞用姬姆萨染色镜检，检查巨大细胞及核内和浆内嗜酸性包涵体，可作初步诊断。
分离培养可将标本接种于人胚肺纤维母细胞中，由于CMV生长周期长，细胞病变出现慢，为了快速诊断，可将培养24小时的感染细胞固定，用DNA探针进行原位杂交，检测CMV DNA。
用ELISA检测lgM抗体和lgG抗体，适用于早期感染和流行病学调查。LgG抗体可终身持续存在，lgM抗体与急性感染有关。
不论是初次感染或复发感染，当病毒血症时，可用葡聚糖液提取外周血单个核细胞，制成涂片，加CMV单克隆抗体，采用免疫酶或荧光染色，检测细胞内抗原。
近年应用免疫印迹法和分子杂交技术直接从尿液，各种分泌物中检测CMV抗原和DNA是既迅速又敏感，准确的方法。
六、防治原则
丙氧鸟苷(ganciclovir DHPG)有防止CMV扩散作用。如与高滴度抗CMV免疫球蛋白合用，可降低骨髓移植的CMV肺炎并发症死亡率，如果耐丙氧鸟苷的CMV感染可选用磷甲酸钠，虽能持久地减少CMV扩散，但效果比前者差。国外研制CMV病毒活疫苗，能诱导产生抗体，但排除疫苗的致癌潜能，有待解决

3、巨细胞病毒是一种什么病？谢谢你们！谢谢！

巨细胞病毒是一种疱疹病毒组DNA病毒，亦称细胞包涵体病毒，会引起以生殖泌尿系统、中枢神经系统和肝脏疾患为主的各系统感染，从轻微无症状感染直到严重缺陷或死亡。巨细胞病毒感染以后一般没有明显的症状，主要通过病毒筛查而检查出来。如果检查出巨细胞病毒感染，最好是积极治疗。治疗主要使用抗病毒的药物，比如丙氧鸟苷。这种病大多数属于母婴传染。生孩子前最好做检查，如果检查出有病毒感染，要积极用药治疗，阻断母婴传播。

4、巨细胞病毒（CMV-IgGII) 结果是142 IU/ml 参考值<12

巨细胞病毒（CMV）是一种疱疹病毒，分布广泛。 CMV感染可引起泌尿生殖系统，中枢神经系统，肝，肺和血液循环系统病变，可能是恶性肿瘤的发生有关。新报告的艾滋病，巨细胞病毒感染可能有关。常通过性交传播。因此列为性传播疾病。
更广泛的人群中，巨细胞病毒感染可引起全身各器官组织病变，胎儿，婴儿造成严重损害，甚至死亡，可能与宫颈癌等恶性肿瘤的发病率。因此，了解CMV积极预防巨细胞病毒感染是非常重要的。

[病理]
CMV [病原体]
唾液中的病毒属于疱疹病毒亚科，是一种病毒，人类疱疹病毒组。 ，由分子量约150X106线性双链DNA。其最大的由162个壳微粒（病毒壳粒）正二十面体构成。典型的疱疹病毒结构。形式的单纯疱疹病毒和水痘 - 带状疱疹病毒非常相似，难以区分。
CMV只有在组织培养的人成纤维细胞的增殖，但不能在其他动物细胞的生长，增殖速度很慢，而且其复制周期为36-48小时时间超过8个小时的疱疹病毒复制周期的。初步分离需要超过一个月的特殊细胞，细胞成为公园的扩展，一个巨大的细胞和细胞核，核的“光环”围绕大型嗜酸性包涵体。在生物体内的靶细胞是上皮细胞。广泛的交叉反应之间的各种人类巨细胞病毒株。的
CMV高达2小时的20％乙醚在生存。 pH值<5，或放置在56℃30分钟，或5分钟的紫外线照射可以是足够灭活。巨细胞病毒感染的抗冻结和解冻，或存储在-20℃或-50℃的不稳定，10％的家用漂白剂使其感染显著减少。的
CMV感染其特征在于典型的细胞质和核的夹杂物，也被称为巨细胞病毒的巨细胞。在人体组织中肥大细胞，引起巨细胞包涵体病。

发病机制中的原发感染，巨细胞病毒，在宿主细胞中无限期存在成潜伏状态。提示尸检肺，肝，胰腺，唾液腺，中枢神经系统及肠也可能是病毒潜伏的地方可能涉及的各种组织和器官。先天性感染的严重程度，和缺乏沉淀的抗体和T细胞响应于巨细胞病毒有关的能力。儿童和成人外周血中巨细胞病毒感染，抑制活化的细胞毒性T淋巴细胞表型，如果主机T-细胞功能受损，潜伏的病毒可能会复活，并导致各种综合征。组织移植巨细胞病毒激活引起的疾病条件的慢性刺激。一些有实力的T细胞免疫抑制剂如抗胸腺细胞球蛋白，临床CMV综合征的高发期。此外，CMV可以使用的功能的辅助因子，使潜伏感染艾滋病毒的活化。

感染的患者和他们的急性感染性疾病的人感染源的来源。已发现在血液，唾液，眼泪，尿液，精液，粪便，子宫颈和阴道分泌物，乳汁和其他的巨细胞病毒。传输的乳汁，唾液和尿液，可持续数星期至数年。

易感人群
巨细胞病毒在世界各地，人们有广泛的易感性。人是巨细胞病毒的唯一宿主。
血清学调查:40-100％的成年巨细胞病毒抗体流行的季节性趋势。
感染率在不同的国家和不同的经济状况有所不同。在亚洲和非洲，90％的人口受感染，其中大多数是在一个年轻的年龄，抗体，感染年龄较早，而西方国家的感染后期发生的。调查还显示，经济收入群体，低收入人群感染率较高。这位70岁的人群抗体阳性率超过20岁的人群中。女性易患年龄20-30岁的男性，年龄50-60岁，年龄在35岁后，男人和女人之间的抗体阳性率基本上是相同的。虽然身体已经产生循环抗体，但病毒仍能够持续或间歇性的排除，因此，是造成慢性或隐性感染。
大多数人一辈子巨细胞病毒感染，但主要是无症状的隐性感染。成人巨细胞病毒感染和免疫功能密切相关。病毒往往会持续一生，在潜伏感染的形式，只有当宿主的免疫状态失去平衡，如器官和骨髓移植，癌症，数学，妊娠和免疫抑制剂的应用等，潜伏的病毒复活。潜伏的病毒的复活和无症状携带者可能会导致病毒的传播。接受器官移植和免疫抑制治疗的结果，往往器官，并进入血液中潜伏的病毒，或免疫激活潜伏的病毒和巨细胞病毒感染的艾滋病患者的发病率很高的发病率。

巨细胞病毒传输途径的传播途径：
（1）先天性感染：妊娠（宫内感染），巨细胞病毒可通过胎盘传播给胎儿。
（2）获得性感染（围产期感染）：分娩时，如宫颈分泌物中病毒可通过产道传播给新生儿。
（3）产后乳汁分泌病毒，母乳喂养可直接传染给婴儿。
（4）长期接触，排毒，唾液，尿液，眼泪可以传播。
（5）同源性CMV感染可通过输血，器官移植传播。的同源性巨细胞病毒感染是一个严重的输血和器官移植，多次输血或原发和复发感染的危险性增加的大量输血，输入含白细胞血液，器官或骨髓移植后巨细胞病毒感染的风险较高的风险也很高。性传播
（6）：由于该病毒往往是存在于泌尿生殖道分泌物，精液或宫颈分泌物通过性交可直接蔓延。
由于从精液，宫颈分泌物，眼泪，粪便（口腔性欲，吻肛）感染。巨细胞病毒感染途径（中环）表表1

母亲到胎儿，新生儿，儿童，成人

阴道感染，接触感染

（唾液，尿）

输血
肝炎
呼吸道感染隐性感染

肝炎

呼吸道感染
>

→成熟不好的孩子体重增加慢免疫抑制剂引起的肺炎和
胃肠道黏膜
肝炎病毒血症
┌→无创
│ BR />└→感染 - →尿糖阳性的健康新生儿传染性单核细胞增多症传染性单核细胞增多症病毒在

传染性单核细胞增多症样疾病→病毒尿中红细胞增多症，肝功能障碍
短暂的血小板 />减少隐性感染输血

不明原因的发热无症状感染

→全身性巨细胞包涵体病
↓

，或精神发育迟滞的迹象生存

[免疫学杂志
巨细胞病毒感染可引起机体的免疫功能，尤其是细胞免疫功能下降。 CMV感染具有显着影响的胸腺和脾细胞，单核吞噬细胞，NK细胞和CTL细胞的功能。

实验室的胸腺，脾脏急性CMV感染的新生豚鼠，抑制，胸腺，T细胞的数量减少成年小鼠巨细胞病毒感染，88％的胸腺巨细胞病毒的检测。
巨细胞病毒感染脾功能受影响，脾淋巴细胞增殖活性降低ConA刺激脾细胞产生IL-2显着减少。
<br免疫细胞巨细胞病毒感染引起的免疫抑制细胞内病毒的复制有关。 CMV复制，其特征在于，所述单核吞噬细胞与巨细胞病毒感染的细胞，最容易具有重要的调节功能和单核吞噬细胞，T细胞，B细胞和一些尚未确定的单核细胞中的淋巴细胞在免疫反应中的效应子功能。巨细胞病毒感染可引起多种淋巴细胞免疫功能受损。的
巨细胞病毒感染的急性单核细胞增多症。外周血淋巴细胞的有丝分裂增殖反应，巨细胞病毒抗原和HSV抗原减弱，诱导干扰素的水平，CD4/CD8比值下降至1.7±0.7 0.2 +0.2降低T细胞活性。改变一些持续相当长的时间，10个月后的疾病，大多数患者T细胞亚群比例还没有完全恢复正常。
巨细胞病毒感染的免疫抑制作用是由大单核细胞感染病毒和CD8细胞功能障碍。单核吞噬细胞在抗CMV免疫中起着举足轻重的作用，不仅可以直接吞服，防病毒，更重要的是可以处理的免疫反应，目前的抗原，细胞因子的分泌，调节和扩展。当CMV感染，单核吞噬细胞功能的影响，巨细胞病毒感染引起的巨噬细胞的吞噬作用降低细胞内氧自由基减少，FC受体，补体受体表达的改变，和的抗原呈递功能低级农产品IL-1也减少了减少IL- 1和IL-2反应。 Moses等胸腺细胞增殖测定中，IL-1活性降低，IL-1产生的减少可以导致在TH / TS细胞比例失衡。
NK细胞拮抗作用的巨细胞病毒扩散。 NK细胞积极参与在整个过程中的抗巨细胞病毒感染的NK活力高，但不一定有一种保护性反应，但活动性感染的证据。 NK细胞不能防止出现原发性巨细胞病毒感染，但一旦感染了在场的，NK细胞，巨细胞病毒感染的早期，限制扩散，使感染的限制。 NK细胞，CTL细胞是抗CMV的重要效应细胞。在CMV复制早期，感染性病毒体的产生之前，他们可以切割被感染的细胞，使细胞之间的病毒流产的蔓延。在小鼠模型中，病毒的影响3-5天，由NK细胞介导的??抗病毒效应由IFN增强NK细胞活性。 6-21天，脾，外周血细胞杀伤活性的CTL。 NK细胞，CTL细胞活性的高低决定了巨细胞病毒感染的敏感性及感染恢复易于身体。巨细胞病毒感染的细胞，NK细胞和CTL细胞的活性也受到严重影响。此外，特定的细胞免疫防止CMV感染复发作用。是检测巨细胞病毒感染的肾移植受者的T细胞反应的发生，发现有20个14巨细胞病毒细胞毒性反应，6个细胞毒性反应者有严重的临床后果。因此，一个特定的T细胞存在，有防止CMV感染复发。

身体减少由巨细胞病毒感染，巨细胞病毒感染的毒力，有可能是多种的抗体的抗体。牛奶，宫颈分泌物，唾液，虽然特异性抗体，包括中和抗体。但仍可检测出巨细胞病毒抗体并不能阻止病毒的传播。不能阻止的宫内胎儿从母体被动获得的抗体，传播的感染的产道或牛奶。有研究表明，在小鼠腹腔或静脉注射致命CMV攻击前，0.2毫升高滴度的抗CMV球蛋白，可完全保护动物死亡。 CMV等，然后次要攻击，动物仍全部存活，表明抗体减少巨细胞病毒毒力的作用。

孕妇感染巨细胞病毒会发生什么？
孕妇巨细胞病毒感染，病毒可以通过胎盘感染胎儿，引起胎儿先天性感染，流产和死胎。
出生的婴儿先天性感染可无症状，但也有严重者可累及多器官，甚至导致死亡。症状可见肝脾肿大，黄疸，瘀点或特发性血小板减少性紫癜，脉络膜视网膜炎，小头畸形。所有的孩子都将有不同程度的听力，视力减退，意识，运动障碍，智力低下和其他活着。通过产道或在出生后的哺乳感染，是后天感染，一般症状轻微，预后良好，肝功能异常和个人。

[临床表现]
巨细胞病毒感染的症状是什么？
健康成人巨细胞病毒感染多无明显临床症状，部分患者可有传染性单核细胞增多症，性能，发热，乏力，咽喉痛，淋巴结肿大，肌肉疼痛，多发性神经炎，外周血异型淋巴细胞，脾肿大的症状。
孕期宫内感染给胎儿，易发生自发性流产和死胎或早产可能会损坏。新生儿症状可见肝脾肿大，黄疸，肝炎，血小板减少性紫癜，溶血性贫血，神经系统的退行性变，小头畸形，智力低下，视力，听力障碍。
新生儿感染可无全身症状，有的仅表现为呼吸障碍的症状，有的肝功能异常。没有神经系统的损害。

巨细胞病毒感染的自然史是一个非常复杂的，排毒原发感染后，往往几个星期，几个月，甚至几年，然后到潜在感染。经常复发感染，再解毒。即使多年后原发感染后，潜伏的病毒再活化，再感染时可有不同抗原性病毒株。巨细胞病毒感染的临床表现的个体的免疫功能和与年龄有关。示于表2，无论是从垂直传输，并行传输或医源性感染的症状和体征是多种多样的。
表2CMV感染性疾病的临床过程和疾病的类型（Baerlocher）
严重的类型：黄疸，贫血，肝脾肿大，血小板减少，感染的新生儿（先天性）
减少性紫癜，违反中央神经系统，肺炎，心肌炎）
B。温和型：假死，心脏肥大，高胆红素血症
2。出生后无症状期，哺乳期的CMV再感染（先天/后天？）
A.全身
B。呼吸系（百日咳样）C类型。肝脾肿大
。胃肠型
?肾型？
3。后天型
一。型流感
B。单核细胞增多症型
?呼吸型
D。胃肠型戊型肝炎

F。由于特殊的医疗防御能力低
克。无症状型？
的4.1,2,3长期后果关于收购巨细胞病毒感染，常见于输血在临床组织细胞增生症的单核细胞后，由于免疫功能紊乱，精神，运动迟缓
血管，视网膜炎症，肺炎和胃肠道感染。多数网格 - 巴氏综合症的患者。

[诊断]
巨细胞病毒感染的临床表现不能确诊的，必须依靠实验室是指一个病毒分离从临床标本（或特异性抗体4倍以上的增加或持续的抗体效价），以明确诊断。
病毒隔离

最好的唾液，尿液，生殖道分泌物，乳汁，和白血细胞，接种到人体成纤维细胞的繁殖和分离，细胞病变效应（CPE可以观察到的巨细胞固定和HE染色）出现在数天或数周后，核内包涵体，核周晕和嗜酸性粒细胞胞浆内夹杂物，很象“猫头鹰眼”（猫头鹰的眼睛）也可以使用单克隆或多克隆抗体染色等方法检查。

两个最常用的是补体的血清抗体检测

综合测试（CF），间接免疫荧光法（IIF），免疫酶试验（EIA），间接血凝检测CMV-IgG和IgM抗体的试验（IHA）和放射免疫分析法（RIA）。当单份血清样品，以确定巨细胞病毒感染的历史，你应该立即离开的血清样本，和间隔2周，4周，8周，然后离开结合病毒分离的血清样品，可用于诊断为原发性感染。

DNA探针

已被广泛的CMV的32P标记的探针，一些标本，混合比病毒分离是更敏感的方法的灵敏度最高的检测中使用。

聚合酶链反应（PCR）

（一）标本收集和处理

采集标本，包括病人的血，尿，腺体组织。由全血制备的血沉棕黄层（血沉棕黄外套），可以存储在-80℃;尿标本，可以储存于液氮中。冷冻保存的标本应避免反复冻融。

尿标本2500r/min离心10分钟，以除去细胞碎片，并收集上清液。预处理尿液中含有PCR抑制剂，如所要求的聚乙二醇（PEG6000）：50？ L尿上清液与50？ L的20％PEG6000和25？ L-2摩尔/ L的NaCl，混合，在冰浴中6小时; 15000r/min离心30分钟沉淀收集。 6400r/min离心3分钟;尽可能抽吸除去上清液，将沉淀物悬浮于蒸馏水中。该悬浮液可直接用于PCR扩增，扩增应该是在100℃下进行加热10分钟的快速设置冰浴冷却。

（b）编制的模板DNA

1。血液标本制备模板DNA

A：中加入NaCl使血清终浓度的葡萄糖150mmol / L; 10？ l本血清在70℃45秒，直接进行PCR扩增。

方法B：制备的血沉棕黄层（BCP）：（1）的BCP，收取沉淀用PBS洗涤两次。 ②加入500？ ?6mol / L的盐酸胍同质化。 ③加入30？ ?10mmol / L的EDTA，10 mmol / L氯化钠，30？ L20％十二烷基肌氨酸钠和5？ ，?蛋白酶K（10mg/ml时），混合，60℃反应1h。 ④加入1130？ L乙醇沉淀1小时，-20℃。 ⑤通过离心收集沉淀的DNA。 ⑥进行洗涤两次，用70％的乙醇中，并最后将沉淀物悬浮于10毫摩尔/ L的Tris-HCl，1mmol / L的EDTA少量。 4℃备用。
2。冰冻组织标本制备模板DNA：①低温恒温器机切5到10吗？米冰冻组织块放置在1.5ml塑料管。 （2）配制缓冲液中加入10％福尔马林溶液。 ③10分钟1?2分钟，轻轻倒出上清液，离心分离后，用乙醇沉淀，洗涤2次。 ④干燥，在室温10?60分钟。 ⑤加入提取缓冲液（100mmol / L的Tris-盐酸，4毫摩尔/ L的EDTA，pH为8.0，400 G /毫升的蛋白酶K），从而使刚刚淹没的沉淀物（约50至100·L）的沉淀捣碎。福尔马林固定，石蜡包埋组织经脱蜡和干燥，请点击这里。 ⑥37℃放置在液体中。 ⑦放置在沸水中7分钟灭活蛋白酶K⑧通过离心收集上清液，取1?10的？ L可以进行PCR扩增。

3。尿液标本制备模板DNA：①100？ L尿上清液用100？升6 mol / L的异硫氰酸胍，7？升2mol / L的NaCl和20？ L玻璃粉末悬浮液（DNA PREP，日本旭硝子公司，日本东京）混合。 （2）在室温下搅拌10min，以6400r/min离心2分钟，收集沉淀物。 ③的沉淀物用50％乙醇洗涤，10mmo / L的Tris-HCl，pH7.4的50毫摩尔/ L的NaCl，洗一次，6400r/min离心1分钟。 ④同样的沉淀物用水洗涤2次，并收集沉淀物。 ⑤加入50？ L的蒸馏水在55℃，15分钟。 ⑥15000r/min离心2分钟，收集上清液（包括巨细胞病毒DNA），进行PCR扩增，此加热该悬浮液，在100℃下10分钟，并在冰浴中迅速冷却。的

（三）引物和探针

引，及探针的设计是根据公布的巨细胞病毒立即早期蛋白基因的启动子区域的四个外外显子序列的开始，晚期抗原gp64基因和磷酸化蛋白pp71基因序列。中常用的引物和探针的表3中列出。

（4）PCR扩增步骤

1.10×反应缓冲液：100毫摩尔/ L的Tris-盐酸，pH为8.4，500毫摩尔/ L的KCl，25毫摩尔/ L的氯化镁，2毫克/ ml的明胶。

的Taq DNA聚合酶：5U /？升。

10×dNTP浓度：4种的dNTP的各种2.0 mmol / L的。

底漆：100pmol的/ L.
2。常规PCR扩增

10×反应缓冲液反应混合物（50 L）？大号

10×dNTP的吗？ ?

模板DNA的5？升

Taq DNA聚合酶0.2？升（IU）

每种引物，0.5？升

蒸馏水3.8？升

加1?2滴矿物油。

反应混合物加热到94℃5分钟，然后30秒，在95°C，55°C 40年代，在72°C 60秒，35至40个扩增循环。

表3 CMV PCR扩增用引物和探针
引物

探针
序列（5'→3'）位置
片断

大小

IE1 CCACCCGTGGTGCCAGCTCC
早期基因
159（BP）

IE2
CCCGCTCCTCCTGAGCACCC

IE3（探头）
CT??

LA1
CCGCAACCTGGTGCCCATGG
晚GP64 139

LA2 CGTTTGGGTTGCGCAGCGGG

LA3（探头）
外显子1 /> 139

IE1b
GGAATCCGCGTTCCAATGCA

IE1a
AGATCGCCTGGAGACGCCAT
早
/> IE2a
ATGGAGTCCTCTGCCAAGAG
早期的外显子2
72

IE2b
CCGTGGCACCTTGGAGGAAG

IE3a
> GTGACCAAGGCCACGACGTT
外显子3月初
167

IE3b
TCTGCCAGGACATCTTTCTC

IE4a
ACAGATTAAGGTTCGAGTGC
外显子4月初
179

IE4b
CAATACACTTCATCTCCTCG

IE4c
TTACCAAGAACTCAGCCTTC
早期基因第4外显子
> 158

IE4d
GTGCGTGAGCACCTTGTCTC

IE4e TATACCCAGACGGAAGAGAAATTCA
早期基因第4外显子
426

IE4f
ATAAGCCATAATCTCATCAGGGGAG

PP1A
TAGCGCGCATACATCCCGAGTACAT <BR / PP71基因
316

Pp1b
ATGACGTTGCTCCGTGGAAAGAGACC
Pp71

3。的套筒式（嵌套）PCR扩增：①的反应混合物中相同的组合物（2），只有的引物IE2a和IE4b（包括整个外显子3的721B），每个100pmol。在94℃60秒，150秒，52℃72℃480S，扩增20循环。 ②取2？ L的扩增产物，引物各加100pmol的IE3a和IE3b额外的试剂。然后，在94℃60秒，150秒，52℃72℃180秒，扩增20循环。

（e）产品标识

放大分析的产品可以是固相杂交和液相杂交试验（膜）。

1。固相杂交：

①预杂交3×SSPE，5×登哈特，0.5％SDS和25％甲酰胺的解决方案。膜的扩增产物在42℃预杂交30?60分钟。 ②加入标记的探针（10cpm / G，2ng/ml），混合30?60分钟。 ③0.2×SSPE .01％SDS在室温下洗涤??膜3次，5分钟/次，洗，在60℃，10分钟/次，然后在室温下洗涤??一次??以上，5min /次。 ④放射自显影。
2。液相杂交和凝胶电泳：

①取1/10体积的扩增产物在0.5?1.0pmol在探头混合。 ②加入最终浓度为葡萄糖150mmol / L的NaCl，10毫摩尔/ L，钠，磷酸和1mmol / L EDTA溶液，使总体积为20？ ?③95℃10分钟，然后在56°C为60分钟。 ④离心10秒被添加的样品缓冲液中，在8％的聚丙烯酰胺凝胶上进行电泳。 ⑤电泳完成后，用溴化乙锭染色，然后将其暴露于X-射线胶片放射自显影。

HCMV DNA分子的碱基序列还没有被发现。虽然它的DNA的限制性内切酶片段长度多形性，但其基因??组中的离散性的是不清楚。可确定使用一个单一的引物对，进行PCR扩增，90％的人巨细胞病毒的野生型菌株;而使用不同HCMV序列的两套以上的引物，可以检测到几乎所有的病毒株。因此，在这种情况下，通过PCR用引物位于不同区域的基因组中的两个或多于两个的双。

HCMV模板DNA制备过程中，有时会产生一些小的DNA片段，PCR反应往往会导致一定程度的底部产品，从而影响测定结果。在这种情况下可以嵌套PCR法，其基本原理是使目标DNA的扩增是分为两个步骤：首先，使用一对引物用于扩增靶DNA，包括长的DNA片段，然后取少量使用引物扩增产物的目标DNA只那么第二放大。通过控制每个步骤，扩增循环数，以防止小的DNA片段所造成的假阳性。此方法也可避免假阴性结果。

PCR检测HCMV标本具有高灵敏度的。相当于几十个病毒DNA分子或1?5PFU这从HCMV感染的组织培养上清液中的病毒的DNA序列可以被检测到。可以检测到扩增产物的Southern杂交分析的尿液样本到1pgHCMV DNA序列的水平;利用这个系统，仅在4×104个细胞的病毒基因组，可以检测到与非放射性的寡核苷酸探针，增加了2×103倍相比，斑点杂交。

PCR技术检测HCMV感染的临床应用价值，因为前的临床症状的出现或感染的血清学证据的体液中病毒DNA，HCMV感染的早期指标可以用作。 HCMV感染通过胎盘，产道感染传播，受感染的新生儿死亡率较高，因此利用PCR的早期诊断和及时治疗，产前和产后护理也很重要。的关系，也可以使用这种方法，是否为HCMV与许多严重的疾病器官或组织移植供体的识别。此外，PCR检测的稳定性的指标，但也有半定量分析，并因此可以被用来作为一种手段的评价的各种抗病毒疗效。

[治疗]
发现在怀孕早期原发性巨细胞病毒感染，尽快尽可能终止妊娠。妊娠后期感染，应进一步检查胎儿畸形，并采取相应的治疗措施。抗病毒治疗的临床症状或先天性巨细胞病毒病。如阿糖胞苷，磺胺类配糖体，如干扰素，但效果还有待进一步观察。的
治疗巨细胞病毒感染，并且可以适用于各种的抗病毒制剂如GCV，抗巨细胞病毒的免疫球蛋白制剂，干扰素和转移因子。但这些药物不会从根本上解决问题，往往停药后反弹，这种病毒潜伏的病毒可作为艾滋病的原因之一，与来自不同国家的学者都致力于控制其感染。美国学者最近开发出两种活疫苗，在第一次测试后相当有效的。一种是由AD169病毒株，另从镇，菌株制成，已经清楚地表明抗巨细胞病毒的功效胃肠外给药后巨细胞病毒抗体增加，从而增强机体免疫功能。

[预防]
巨细胞病毒对人类的巨大危险，所以我们应积极预防其发生。
（1）锻炼身体的健身意识。提高机体的免疫功能和抗病能力，尤其是妇女的生育年龄，以减少巨细胞病毒对胎儿的严重危害。
（2）我们需要保护怀孕或患有慢性消耗性疾病，免疫功能低下的病人，让他们远离感染源。
（3）要注意环境卫生，饮食和健康。
（4）牛奶中的巨细胞病毒阳性不应该进行母乳喂养。
（5）免疫预防。尚在研究和探索。

你的结果是正常的 请放心

5、骨髓移植后18天骨穿检查巨细胞病毒是5.65怎么办

你好，巨细胞病毒感染是一种疱疹病毒感染，应积极抗病毒治疗。并提高免疫力。

6、骨巨细胞

?

7、巨细胞病毒是怎么回事

巨细胞病毒是一种疱疹病毒组DNA病毒，亦称细胞包涵体病毒，会引起以生殖泌尿系统、中枢神经系统和肝脏疾患为主的各系统感染，从轻微无症状感染直到严重缺陷或死亡。巨细胞病毒感染以后一般没有明显的症状，主要通过病毒筛查而检查出来。如果检查出巨细胞病毒感染，最好是积极治疗。治疗主要使用抗病毒的药物，比如丙氧鸟苷。这种病大多数属于母婴传染。生孩子前最好做检查，如果检查出有病毒感染，要积极用药治疗，阻断母婴传播。

8、什么是巨细胞病毒？

巨细胞病毒是一种疱疹病毒组DNA病毒，该病毒进入细胞内以后会导致细胞增大和肿大，且具有巨大的核内包涵体，是一种典型的疱疹病毒形态。人类和动物都可以遭受该病毒的感染，但人巨细胞病毒只能感染人。

人身上容易潜伏有巨细胞病毒，潜伏部位常在唾液腺、乳腺、肾脏、子宫颈、睾丸、白细胞以及其它腺体中，病毒可长期或间歇地自唾液、乳汁、尿液、精子及子宫颈分泌物中排出。但在大多数免疫正常个体呈无症状感染，而在免疫抑制个体、胎儿和婴幼儿如果感染则可出现明显病症。

该病毒被感染后容易引起以生殖泌尿系统，中枢神经系统和肝脏疾患为主的各系统感染，从轻微无症状感染直到严重缺陷或死亡。

(8)骨髓巨细胞12扩展资料

人巨细胞病毒的种类

1、根据病毒感染的时间可分为先天性感染和后面感染。先天性感染大多是由孕妇在怀孕过程当中接触到了该病毒，该病毒慢慢渗入胎盘导致胎儿感染，隐性的感染容易在新生儿分娩时被感染。

2、根据病毒感染的次序可分为原发性感染和再发性感染，原发性感染大多是因为宿主首次感染该病毒，且之前并没有产生任何抗体。再发性感染是潜伏在宿主体内的病毒被重新激活或增值，导致病毒异变并再次感染。