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骨髓细胞化学染色常用方法

发布时间:2021-04-03 07:58:33

1、试述什么是细胞化学染色,说明其基本步骤,并指出在临床中有哪些应用

您可以参考:
http://wenku.baidu.com/link?url=_

2、急求骨髓涂片铁染色法技术流程

1)4%的盐酸溶液.:40ml(38%浓盐酸)+340ml蒸馏水
2)40g/L亚铁氰化钾液
3)碱性复红:1g复红+10ml无水乙醇+90ml(5%石碳酸溶液),用时取3ml加100ML水.
4)37%甲醛

3、骨髓细胞检查报告中的化学染色中的POX阳性13%是指什么?

POX是细胞的过氧化物酶染色,染色后,在显微镜下观察,细胞中有蓝黑色颗粒的为阳性,POX阳性13%就是指呈阳性的细胞占总细胞数的13%

4、骨髓细胞染色常用什么方法,各是用于何种检测。

骨髓细胞内外铁染色,是进行贫血分类的常用组织化学染色方法,一般均采用普鲁士兰染色法,该法虽操作简便,但若掌握不好,常使玻璃上沉积大量污染铁,无法判定结果,我们曾查阅多种材料,对该项试验的一些细节问题均无详细介绍。最近我们参照各家材料,经过多次试验从玻片处理试剂配制、试验的时间、温度、最后漂洗的手法复染时间的控制等步骤上,对细胞内外铁染色的方法进行探讨,摸索出了一套较满意的染色方法,现介绍如下。

【作者单位】: 黑龙江省宝泉岭农场医院
【关键词】: 骨髓细胞 铁染色 染色方法 组织化学 试剂配制 玻片处理 氰化钾 贫血分类 普鲁士兰 染色法
【分类号】:R361
【正文快照】:
骨髓细胞内外铁染色,是进行贫血分类的常用组织化学染色方法。一般均采用普鲁士兰染色法,该法虽操作简便,但若掌握不好,常使玻璃上沉积大量污染铁,无法判定结果,我们曾查阅多种材料,对该项试验的一些细节同题均无详细介绍。最近我们参照各家材料,经过多次试验从玻片处理试剂

5、骨髓片、血涂片主要依据瑞氏染色观察细胞,为什么还需要其他化学染色?比如铁染色、过氧化物酶染色等。

骨髓片、血涂片主要依据瑞氏染色观察细胞,为什么还需要其他化学染色?比如铁染色、过氧化物酶染色

6、性白血病患者一般要做哪些细胞化学染色

急性白血病分为急性淋巴细胞白血病(简称急淋,ALL)和急性髓细胞白血病(包括M0、M1、M2a、M2b、M3、M4、M5、M6、M7)。由于急性白血病骨髓中是以原始和/或幼稚细胞增生为主,仅仅根据瑞氏染色下的细胞形态,容易做出错误的判断,因此不论急性白血病细胞形态学表现是否典型,均应做细胞化学染色。建议急性白血病应至少做:过氧化物酶染色POX、特异性酯酶染色、非特异性酯酶染色及过碘酸-雪夫反应PAS。

由于白血病细胞具有高度异质性,同一类型白血病在不同患者中,其细胞化学成分也不尽相同,经常会出现细胞化学染色结果不典型、摸棱两可或结果与形态结果不相符的现象,所以根据细胞形态学和细胞化学染色并不能对所有急性白血病的细胞类型做出正确的判断,还需要结合染色体检查、细胞免疫学检查及分子生物学检查等进行全面分析。

7、常用免疫组织化学染色方法有哪些

常用免疫组织化学染色方法, LSAB法.(SP法)(Labelled streptavidim biotln) 1.切片脱蜡至水. 2.0.3%H2O2甲醇处理切片10-20分钟. 3.水洗. 4.抗原修复. 5.PBS洗3次,1分钟/次. 6.加入血清孵育10分钟. 7.摔去血清,加入一抗孵育30-60分钟. 8.PBS洗3次,每次2分钟.加入二抗,孵育20分钟. 9.PBS洗3次,每次2分钟. 10.加入SP复合物孵育20-30分钟. 11.PBS洗3次,每次2分钟. 12.DAB-H2O2孵育5-10分钟. 13.PBS洗,水洗. 14.Harris苏木素染核5-10分钟. 15.水洗,分化 ,蓝化,脱水,透明并封固.

8、常用的细胞染色方法有哪些

常用的细胞染色方法有:

1、简单染色法,常用碱性染料如美蓝等进行简单染色;

2、革兰氏染色法,主要包括结晶紫初染、碘液媒染、乙醇(或丙酮)脱色以及番红复染四个过程;

3、瑞氏染色法,瑞氏染料溶剂主要是由伊红美蓝组成;

4、吉姆萨染色法,吉姆萨染色原理与结果和瑞特染色法基本相同;

5、细胞免疫荧光染色法,免疫荧光染色的主要原理是利用抗原抗体之间的特异性结合。

染色是生物显微玻片标本制作中最重要的环节之一。先把破坏细胞膜的选择透过性,再使用染色剂,将生物组织浸入染色剂内,使组织细胞的某一部分染上与其他部分不同的颜色或深度不同的颜色,产生不同的折射率,以便观察。

另外,银染法也较常用。当组织块浸入硝酸银溶液中时,有的组织结构能直接把硝酸银还原,使银粒附于其上,呈棕黑色或棕黄色。有些结构本身对硝酸银无直接还原能力,若加入还原剂,可使硝酸银还原沉淀显色。


(8)骨髓细胞化学染色常用方法扩展资料:

染色细胞固定有物理法与化学法,物理法为干燥和火焰固定,化学法最常用的是甲醛、乙醇、丙酮和醋酸等。

1、偶氮偶联法:利用人工合成的酶底物,在酶作用下,产生分解产物,再与重氮盐结合引起偶氮偶联,使其形成不溶性的偶氮色素,以此证明酶的存在。

2、联苯胺法:粒细胞和单核细胞中的过氧化物酶作用于过氧化氢,释放新生态氧,使无色的联苯胺形成蓝色沉淀。

3、普鲁士蓝法:细胞内、外铁与酸性亚铁氰化钾作用,形成蓝色亚铁氰化铁沉淀。

4、雪夫反应:过碘酸氧化细胞内糖类中乙二醇基形成乙醛基,醛基与雪夫试剂作用,使无色品红形成红色沉淀。

5、金属沉着法:其他尚有物理学方法,如脂溶性染料染色(显示脂质)、荧光显示、放射自显影以及体外活体染色亦常用于临床血液细胞学诊断。

9、血细胞染色方法是怎么建立的?

19世纪德国的化学工业、染料工业、制药工业的发展十分迅速。1856年,英国化学家W.H.帕金首先发明了染料的人工合成方法。不久,德国化学家A.W.霍夫曼相继合成了染料碱性品红和苯胺蓝。人们在应用染料过程中发现,其不仅可以染色布料、毛皮,而且还可以染色布料、毛皮,而且还可以使动物组织着色。更有趣的是,有些染料能使某些特定的细胞而不是所有的细胞着色,还有一些染料能使一种细胞的某一部分而不是整个细胞着色。于是,染料成了科学家观察有机体结构的一种非常有用的工具。起初,能应用于有机体染色的染料为数不多,19世纪末,随着德国染料工业的迅速发展,生产出了各种染料,极大地拓展了科学家观察研究的范围。医学家开始用特殊染料使有机体的组织和细胞染色,在显微镜下进行观察研究。

德国医学家艾利希正是在这种背景下发明血细胞染色方法的。艾利希的叔父魏格特是德国著名的病理学家和组织学家,也是细菌和组织染色方法的创立者。他发明的许多人体组织和细胞的染色方法,有些一直尚用至今。艾利希在魏格特的影响下,自幼爱好动物学和化学。在大学学习阶段,他就对化学染料与有机体组织细胞染色的关系产生了极大的兴趣,并开拓研究某些化学物质对动物组织的作用。他不仅对机体的化学过程充满兴趣,而且也十分关注机体中更小的成分——细胞的构造和成分。当时还很少有医生将化学与医学结合起来研究的,值得庆幸的是,斯特拉斯堡大学教授、艾利希的老师沃尔德耶尔恰好持有这种观点。沃尔德耶尔赞同艾利希的研究计划,并鼓励这个青年人在科学研究上走自己的路。在斯特拉斯堡大学学习期间,艾利希就发表了莱于化学物质在体内的分布及其与药物作用关系的论文。

虽然艾利希对用化学方法研究生命现象充满兴趣,但他对当时大学里死板的教学方法十分厌恶,所以艾利希经常逃课,尤其是化学课。结果是艾利希不能通过课程考试,不得不留级一年。然而,他并不懊恼,而是继续将时间都倾注在捣弄各种染料上。由于专心研究,不修边幅,以致于染料弄得到处都是。数年后,一位教授指着艾利希曾使用过的工作台说:“艾利希工作的痕迹实际上是不可摧毁的。”德国著名科学家罗伯特·科赫也时常提及一个有关艾利希的小故事:他去布雷斯劳大学鉴定白喉杆菌时,被邀请参观实验室。实验室的负责人指着艾利希的办公桌告诉他:这是艾利希的工作台。艾利希是一个非常出色的染料师,但考试却经常不极格。

当时,德国学生为了获得学位,经常在几所大学学习。艾利希曾在布雷斯劳大学、斯特拉斯堡大学、布赖斯高地大学、弗莱堡大学和莱比锡大学等多所学校学习过。在布雷斯劳大学时,他对实验室的工作十分感兴趣,他发明的染色技术揭示了许多细胞的基本构造。刚发现炭疽杆菌的科赫在布雷斯劳大学访问时曾与艾利希探讨了染色问题,从此,艾利希和科赫结下了深厚的友谊。

艾利希不仅热衷于实验观察,而且善于独立思考。在大学学习期间,一次在观察铅中毒死者的组织变化时,他发现凡是生前诊断为严重铅中毒病人的身体组织,在作尸体病理检查时,把组织浸入含铅溶液中,这些组织的细胞也最容易吸收和积蓄铅。艾利希敏锐地意识到人体的不同组织和器官对特定的化学物质可能存在着不同的“亲和力”。于是,他开始用各种染料对人体组织标本进行染色,以确定能使特定组织和细胞染色的染料及其之间的相互关系。

1878年,艾利希在莱比锡大学毕业并获医学博士学位。他的博士论文是关于染料应用于显微镜观察的理论和实践问题,主要内容是关于如何应用各种苯胺染料进行动物组织染色的理论和技术。这一问题包含了艾利希关于染料和染色方法的许多设想:实际上已经奠定了他今后为医学做出巨大贡献的思想基础。1891年,艾利希在一本关于有机体组织对染料的不同反应的著作中,介绍了血细胞的染色方法。1898年,他与同事又合作出版了一本论贫血的著作,总结了正常和病理情况下对血液的观察,内容包括血液观察的方法学、正常和病理情况下的红细胞、各种白细胞、淋巴细胞以及白血病的细胞特点等。

在研究过程中,艾利希发现染料分为酸性、碱性和中性三类,不同的染料对于白细胞内的颗粒染色结果不同,由此他第寻次提出了白细胞的分类方法。艾利希因为这些著名的观察和方法学的建立,被誉为现代血液学的奠基人。

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