如何保存血液骨髓标本

1、血培养标本为什么不能放冰箱保存

要放4度冰箱保存。不放的话血液中的物质会变性，裂解，导致标本以后就不能用了。尤其现在天气比较热，更不能在常温下放的时间太长。

2、人的血液如何保存?

最早期的输血，都是从供血者采取血液后即刻输给患者，不存在保存问题。现在一般都是输库存血，即血液在血库有一个短暂的保存期。为了输入最有效的血液。也就是说要保存细胞的生存力，使其能在输入后继续生存，能完成其应有的作用，为此必须设法解决在保存中可能引起的细胞损伤的各种问题，例如盛血容器、抗凝剂、保存液等问题，其中以后两者更为重要的。

（一）红细胞的储存损伤

把血液储存在液体基质中时，红细胞会发生一毓生物化学与结构上的改变，这些变化统称这为红细胞储存损伤。这些损伤是影响输血后红细胞生存与功能改变的主要原因。储存血液中发生了致死性伤害的红细胞在输入后很快被受体清除。通常衡量血液是否合格的标准是看血液输入24小时，后其存活的红细胞能否达到输入量的70%，如能达到70%即为合格。

储存损伤中重要变化之一就是红细胞中ATP的消失。ATP降解成ADP又成AMP，AMP脱胺后变成IMP，并再降解，这样下去核酸池可消耗殆尽。人红细胞缺乏合成腺嘌呤可在有5-磷酸核糖-1-焦磷酸盐存在时，在腺嘌呤磷酸核酸糖转移酶的作用下又合成AMP，并生成ATP.这就癖发人们向储存中加入腺嘌呤与磷酸，从而延长红细胞的生存期。虽然上述看法由来已久，并在实际中加以应用，但近来民有报告认为ATP含量没有直接关系，而是红细胞其它变化缩短了其生存期。

在储存早期，红细胞可由盘形变成球形，继之又可有膜脂质和蛋白的丢失，以及结构蛋白改变。最早期的形态与ATP的减少有关，并能因ATP含量的恢复而逆转，但严重的变形就不可逆的，并与输注后红细胞生存能力的沽少有关。

还有一些非代谢性因素可以影响细胞膜的稳定性。现用的聚氯乙烯储血袋中如含有DEPH成分，有利于防止细胞膜变形的作用，但其在血循环中的毒性作用尚有待研究。

（二）抗凝剂

1.枸橼酸盐：输血工作中所用的最重在的抗凝剂是枸橼酸盐。枸橼酸盐与所采血液中钙离子螯合，使其在凝血中反应中失去作用，在输积压后又被身体所代谢。枸橼酸盐是现在用的所有抗凝剂储存的基本抗凝物质。最常用的是枸椽三钠。除抗凝作用外，它还能阻止溶血的发生。

2.肝素：肝素可以用做抗凝液剂，但缺乏支持红细胞代谢的能力。肝素中，红细胞的ATP迅速消失，并伴有其它的储存损伤信输务血后生存能力下降，此外肝素的抗凝作用还可被肝素抑制因子及储存血液细胞释放中的凝血活酶类物质部分地中和。肝素抗涨血必须在采血后48小时内输入，这过去用肝素抗凝血主要是为了避免由枸橼酸抗凝血引起的低血钙症，以及用于新生儿换血症。目前这些问题由于应用浓缩红细胞而减少了。

（三）血液保存液

血液保存液除必须具备抗凝作用外，还应该有保护细胞生存的能力及功能的作用。针对这种要求，现在的保存液中主要成分有枸橼酸盐、葡萄糖、磷酸盐和腺嘌呤。根据配方不同分为ACD与CPD两大类，两者判别是CPD中加有腺嘌呤及磷酸盐，因此可延长红细胞的保存期达到35天，并使红细胞放氧功能增强。如只用枸橼酸盐，其有义气期仅为5天，溶液中的葡萄糖是红细胞代谢所必需的营养成分，可延长红细胞保存时间，且防止溶血；并可使细胞中的有机磷消失缓慢，防止红细胞储存的损伤。

ACD液PH较低，对保存红细胞不利，只能保存21天，且放氧能力迅速下降，这是其缺点。

由于成分输血的发展，各种成分又有各自的适应条件，例如浓缩红细胞可用晶体盐保存液或胶体红细胞保存液。还可以用低温冷冻保存方法。而血小板的最适当保存温度为22摄氏度（室温）。

3、血液保存

你需要和医生询问一下，一般血液样本应保存在2-8度，应该有专门的运输箱，放入冰盒。但是检测不同的项目，需要的储存条件应该是不同的，这个你应该问问大夫，或者让大夫与检验科的人员了解。

4、血样的保存方法

常用EDTA的钠盐或钾盐作为抗凝剂，能与血液中的钙离子结合成螯合物，而是钙离子失去凝血作用，从而阻止血液凝固。

1、1%肝素溶液0.1ml于试管内，旋转试管，使溶液均匀浸湿试管内壁，放入80～100℃烘箱烤干，每管能使5～10ml血液不凝。急性血压实验时可在充满生理盐水的动脉套管内注入肝素20～25mg。体内抗凝：500～1000u/kg。

市售的肝素注射液每1ml含肝素12500u（相当于肝素钠125mg，即1mg相当于100u）。应置冰箱内保存。

2、枸橼酸钠 3.8%的枸橼酸钠溶液1份可使9份血液不凝，用于红细胞沉降速率的测定。因其抗凝血作用较弱而碱性较强，不适用于供化验用的血液样品。做急性血压实验时则用5～7%的枸橼酸钠溶液。

3、草酸钾 常用于供检验用血液样品的抗凝。在试管内加饱和草酸钾溶液2滴（或10%溶液0.2ml），轻轻敲击试管，使溶液分散到管壁四周，置80℃以下的烘箱中烤干（烘烤温度过高，可使草酸钾分解为碳酸钾而失效），每管能使3～5ml血液不凝。供钾、钙含量测定的血样不能用草酸钾抗凝。

关于保存：
新鲜冰冻血浆在-20℃以下可保存1年

5、血液标本长期冷藏的处理流程是怎么样的

你好

6、血液如何保存

血液的保存是很严格的，不知你说的是哪种血液成份呢？一般的红细胞类是2-8度，全血也是一样。血小板是22-24度，血浆分新鲜的和冰冻的保存的时间与温度都不一样，血液的成份有很多，这只是其中的一种。保存期限也不同。

7、要做PCR的血液标本如何保存

最好是用淋巴细胞分离液把单个核细胞分离出来，然后-80℃保存。

外周血单个核细胞（Peripheral blood mononuclear cell,PBMC）的分离是免疫学研究中的一项基本技术。目前国内外分离PBMC的常用方法是葡聚糖-泛影葡胺密度梯度离心法（ficoll-hypaque density gradient centrifugation），用此方法分离PBMC纯度可达95％，淋巴细胞约占90％，其中T淋巴细胞占80％，B淋巴细胞占4～10％。ficoll-hypaque混合溶液，又称淋巴细胞分层液，在分离人PBMC时，要求其比重为1.077；分离小鼠单个核细胞时比重为1.080；分离大鼠单个核细胞时比重为1.084～1.087；分离马单个核细胞时比重为1.090。

【原理】  

血液中各有形成分的比重存在差异，利用比重为1.077、近于等渗的ficoll-hypaque混合溶液（又称淋巴细胞分层液）作密度梯度离心时，各种血液成分将按密度梯度重新聚集。血浆和血小板由于密度较低，故悬浮于分层液的上部；红细胞与粒细胞由于密度较大，故沉于分层液的底部；PBMC密度稍低于分层液，故位于分层液界面上，这样就可获得PBMC。

    【器材与试剂】

    1.刻度离心管、吸管、试管、毛细吸管、橡皮乳头、载玻片、盖玻片、离心机等。

    2.pH7.2 Hanks液、肝素、生理盐水溶液，淋巴细胞分层液。

    【方法】

1.静脉取血2ml，加入含肝素溶液(10～50u／m1血样本)的试管中，混匀，使血液抗

凝。用pH7.2 Hanks液将抗凝血稀释1倍。

2.吸取2ml淋巴细胞分层液置于刻度离心管中，然后将离心管倾斜45O角，用毛细滴管将稀释的全血沿管壁缓慢加至分离液上面，应注意保持两者界面清晰。

3.在18℃～20℃下，用水平离心机以2000r/min离心20min。离心后细胞分布如图。

 4.用毛细吸管轻轻插到混浊带，沿管壁轻轻吸出此层细胞，移入另一支离心管中。即要吸取所有单个核细胞，又要避免吸取过多的分层液或血浆，以免混入其他细胞成分。

5.用Hanks液洗涤细胞3次。第一次2000r/min ，10 min；第2～3 次1500r/min ，10 min，可去掉大部分混杂的血小板。

6.将沉淀细胞悬于培养基中备用。

        【注意事项】

    1、实验所用玻璃器皿应该洁净。如果制备的单个核细胞悬液用于细胞培养时，上述操作过程都要在无菌条件下进行，所用器材、试剂都应为无菌。

    2、实验中的细胞得率与室温及分层液比重等有关。分层液应避光4℃保存。

3、往淋巴细胞分层液中加入稀释全血时，不得将血液冲入分离液中，须保持两层液体的清晰界面。

8、亲子鉴定如何采血和数量及保存

用于亲子鉴定的血痕样本要求：5至6滴血保存在干净的四层以上厚度的纱布上，载血的纱布用干净的白纸包好即可，禁止用密封袋子捂住。一般注意供血人半年内没有做过骨髓移植或输血手术，如果有最好采集其他样本。用专业的采血针或是缝衣服针采血都是一样的，只是采血针直接采血就可以，缝衣服针建议用火烤一下，再用酒精消毒才采血。
原因-血液浸透四层纱布这个量够做实验。用纸质包血痕样本会因透气而利于更长时间的保存样本好样本。外源输血和骨髓移植可能对受体存在外源dna信息的干扰。