骨髓片化学染色

1、瑞氏染色的步骤是什么?

操作步骤：

1.滴加瑞氏吉姆萨A液(约0.5ml-0.8ml)涂片上，并让染液覆盖整个标本染色1min；

2. 再将瑞氏吉姆萨B液加于A液上面（滴加量为A液的2-3倍），以嘴或洗耳球吹出微风使液面产生涟漪状，使两液充分混合，染色3-10min。（染血片时间可略短，染骨髓片时间应视细胞量多少而异）

3.水洗（冲洗时不能先倒掉染液，应以流水冲去，以防有沉渣沉淀在标本上），干燥、镜检。

注意事项：

1. 染色时间须视何种标本，涂片厚度，有核细胞多少，何种细胞及室温等而定；通常染血液涂片时滴加B液后染2-4分钟，染骨髓片则应不少于8分钟；气温较低时，可适当延长染色时间。染色结果如出现嗜酸性粒细胞变碱，则考虑是否染色时间太长所致。

2.做骨髓涂片时，因为骨髓纤维蛋白含量较高，凝固较快，所以涂片过程要快。骨髓不可用草酸盐抗凝，否则会使血细胞核变形，核染色质致密，胞浆空泡形成，出现草酸盐结晶。

3.染液量需充足，勿使染液蒸发干燥，以防染料沉着于涂片上。

4.做细胞染色时，当天气寒冷或湿度较大时，应于37℃温箱中保温促干，以免细胞变形缩小或在染色时脱片。

5.染料放置时间越长，染色效果越好。

6. 本试剂应由专业人员使用。

拓展资料

Wrfeht和Giemsa都于1902年报告了各自的新的血液学染色剂，其主要特点是在制备多色性亚甲蓝（主要指天青B）方面做了改进，使血细胞和疟原虫着色较好，操作简便。

上述染色法均是含伊红和亚甲基蓝衍生物的复合染料。在临床检验工作中，瑞氏染色法常用于血液、其他体液、分泌物和排泄物涂片中各种细胞的染色，有利于在显微镜下观察细胞形态及对细胞进行分类检查。

【染色原理】

瑞氏染色分两相进行，第一相是酸性染料伊红与细胞中的碱性物质如血红蛋白、嗜酸性颗粒等结合；碱性染料天青B与细胞中的酸性物质如核染色质（chro－matin）、特异中性颗粒、血小板及富含核蛋白的胞质结合。第二相是天青B和伊红在适宜条件下形成紫色的天青B一伊红复合物（azure B－eosin complex），这种复合物是形成Romanowsky－Giemsa效应的基础。

Romanowsky－Giemsa效应包括：①白细胞核染色质染成紫色，疟原虫的染色质染成红色；②中性粒细胞的颗粒及血小板颗粒区染成紫色；③产生本效应必须有两种染料参与，一种是天青B，另一种是伊红。

Wittekind（1985）指出，天青B与DNA分子中的磷酸基结合，而伊红既与DNA分子中的阳离子部位结合，又与天青B结合，与天青B的结合力来源于电子供一受体的电子转移力，天青B的甲氨基（－NHCHs）与伊红分子中的叛基（－COOH）间形成氢键。因此，天青B是噻嗪类染料中能与伊红形成复合物的最佳选择，因为拥有四个甲基侧链的亚甲蓝不能以氢键与伊红结合。

甲醇除作为染料的溶剂，能将瑞氏染料解离成带正电荷的天青B和带负电荷伊红外，因其具有脱水力，还可将细胞固定为一定形态，并使蛋白沉淀为颗粒状、网状结构，增加细胞与染料的接触表面，增强染色效果。

细胞中的各种有机物质（特别是蛋白质）、染料等对环境的州值非常敏感。如环境偏酸，氢离子增多，降低对碱性染料的亲和力；增强伊红着色，出现异常红染；相反，则可出现异常蓝染。最佳环境应维持在PH值6 4～6、8.因此，必须使用缓冲溶液。

参考资料：

网络_瑞氏染色

瑞氏染色原理及方法_医学教育网

2、常规细胞化学染色阴性是什么意思

常规细胞化学染色阴性是什么意思
- 方法:骨髓涂片常规瑞氏染色,细胞化 学染色包括过氧化物酶(P0x)、特异性酯酶(...粒系的cE随着粒细胞的成熟而增加,M.、M:的原粒一般为阴性

3、骨髓瘤细胞中用染色体制片，其中片的类型是什么

染色与压片
(1) 醋酸洋红染色制片：取一处理好的根尖置于载玻片中间，用吸水纸吸去多余的保存液，用刀片将根尖分生组织切 1 ：。将其切成薄片，加一小滴醋酸洋红染色液．约 5 分钟后加盖玻片。用吸水纸放在盖玻片上面，左手按住载玻片，用右手拇指在吸水纸上对准根尖部位施加压力。或用铅笔的橡皮头轻敲盖玻片即可，使材料均匀分散，细胞分离压平。压力要适当，注意不要移动盖片。为增强染色效果，可将载玻片在酒精灯上稍加热，但不使其沸腾。以免染料沉淀。加热的作用不仅可以使材料软化和易于着色．而且可以破坏部分细胞质，使核和染色体有一个比较清爽的背景。如果整个细胞染色较浅，可沿盖片一侧，滴加少许染色液，使其慢慢渗入．放置片刻再进行加热，如此反复进行染色。
醋酸洋红常用于染色体的临时制片，其着色不强，分色效果也不甚佳，故不宜制作永久制片，
(2) 醋酸地衣红染色制片：由于地衣红很容易溶于酒精。所以材料从保存液中取出后，应当充分洗净后浸入 45 ％醋酸中再进行染色。染色时，将材料置于小试管中，加入含盐酸的 2 ％地衣红使材料浸没，在酒精灯上加热 2 － 3 秒钟．静置约半小时或更长时间，取出材料置载玻片上，加一滴不含盐酸的 l ％醋酸地衣红染色液。如醋酸洋红法操作进行压片。地衣红染色液染色，着色力比洋红强，染色较深，尤其对根尖等体细胞染色体的染色比洋红更显优越。
(3) 铁矾—苏木精染色制片法：这是用在根尖细胞有丝分裂染色体计数中效果最好的一种方法，对各种植物的染色体均可染上较深的颜色，分色清晰，照像效果较好．利于标本长期保存。

4、骨髓细胞染色常用什么方法，各是用于何种检测。

骨髓细胞内外铁染色,是进行贫血分类的常用组织化学染色方法,一般均采用普鲁士兰染色法,该法虽操作简便,但若掌握不好,常使玻璃上沉积大量污染铁,无法判定结果,我们曾查阅多种材料,对该项试验的一些细节问题均无详细介绍。最近我们参照各家材料,经过多次试验从玻片处理试剂配制、试验的时间、温度、最后漂洗的手法复染时间的控制等步骤上,对细胞内外铁染色的方法进行探讨,摸索出了一套较满意的染色方法,现介绍如下。

【作者单位】： 黑龙江省宝泉岭农场医院
【关键词】： 骨髓细胞 铁染色 染色方法 组织化学 试剂配制 玻片处理 氰化钾 贫血分类 普鲁士兰 染色法
【分类号】：R361
【正文快照】：
骨髓细胞内外铁染色,是进行贫血分类的常用组织化学染色方法。一般均采用普鲁士兰染色法,该法虽操作简便,但若掌握不好,常使玻璃上沉积大量污染铁,无法判定结果,我们曾查阅多种材料,对该项试验的一些细节同题均无详细介绍。最近我们参照各家材料,经过多次试验从玻片处理试剂

5、骨髓细胞检查报告中的化学染色中的POX阳性13%是指什么?

POX是细胞的过氧化物酶染色,染色后,在显微镜下观察,细胞中有蓝黑色颗粒的为阳性,POX阳性13%就是指呈阳性的细胞占总细胞数的13%

6、急求骨髓涂片铁染色法技术流程

1)4%的盐酸溶液.:40ml(38%浓盐酸)+340ml蒸馏水
2)40g/L亚铁氰化钾液
3)碱性复红:1g复红+10ml无水乙醇+90ml(5%石碳酸溶液),用时取3ml加100ML水.
4)37%甲醛

7、骨髓片、血涂片主要依据瑞氏染色观察细胞，为什么还需要其他化学染色？比如铁染色、过氧化物酶染色等。

骨髓片、血涂片主要依据瑞氏染色观察细胞，为什么还需要其他化学染色？比如铁染色、过氧化物酶染色

8、骨髓涂片过氧化酶染色:未见原始细胞增加,内对照正常什么意思

你的原始粒细胞高.说明核左移.有白血病的可能.你的中幼红细胞.晚幼红细胞都高.说明红细胞增生.看了你的骨髓片报告;我估计你的血象显示;白细胞是高的.血色素是低的.红细胞也偏低. 粒细胞性白血病的可能性比较大. 碱性磷酸酶异常.不排除骨病的可能。