骨髓来源的巨噬细胞的诱导步骤

1、gmcsf诱导巨噬细胞向m1型分化用什么浓度

(1)巨核细胞是生成血小板的一种细胞。
巨核细胞虽然在骨髓的造血细胞中为数最少，仅占骨髓有核细胞总数的0.05%，但其产生的血小板却对机体的止血功能极为重要。每个巨核细胞均可产生1000-6000个血小板。
生成血小板的巨核细胞也是从骨髓中的造血干细胞分化发展来的。造血干细胞首先分化生成巨核系祖细胞，也称巨核系集落形成单位（colony forming unit-megakaryocyte,CFU-Meg）。祖细胞阶段的细胞核内的染色体一般是2-3倍体。当祖细胞是2倍体或4倍体时，细胞具有增殖能力，因此这是巨核细胞系增加细胞数量的阶段。当巨核系祖细胞进一步分化为8-32倍体的巨核细胞时，胞质开始分化，内膜系统逐渐完备。最后有一种膜性物质把巨核细胞的胞质分隔成许多小区。当每个小区被完全隔开时即成为血小板，一个个血小板通过静脉窦窦壁内皮间的空隙从巨核细胞脱落，进入血流。
巨核细胞增殖、分化的调节机制类似于红细胞系生成的调节，至少受两种调节因子分别对两个分化阶段进行调节。这两种调节因子是：巨核系集落刺激因子（Meg-CSF）和促血小板生成素（thrombopoietin,TPO）。
(2)巨噬细胞，一般为圆形或椭圆形，功能活跃时，可呈多突形。细胞核圆形或椭圆形，染色较深。细胞质较丰富，功能活跃时内含有许多颗粒或空泡。具有变形运动和吞噬能力。
组织细胞或巨噬细胞：有吞噬能力，细胞形状不一，亦为多突起的星形细胞，注意与成纤维细胞的区别在于：细胞质中含有吞噬的台盼蓝颗粒。细胞质染色较深，细胞轮廓较明显。细胞核较小，圆形或卵圆形，染色较深，核内的结构看不清。
单核-巨噬细胞包括骨髓中的前单核细胞、外周血中的单核细胞、以及组织内的巨噬细胞(Mφ)。Mφ来源于血液中的单核细胞，而单核细胞又来源于骨髓中的前体细胞。单核-巨噬细胞是自体重要的免疫细胞，具有抗感染、抗肿瘤和免疫调节等重要作用。
(3)吞噬细胞：人类的吞噬细胞有大、小两种。小吞噬细胞是外周血中的中性粒细胞。大吞噬细胞是血中的单核细胞和多种器官、组织中的巨噬细胞，两者构成单核吞噬细胞系统。细菌被吞噬在吞噬细胞内形成吞噬体；溶酶体与吞噬体融合成吞噬溶酶体；溶酶体中多种杀菌物质和水解酶将细菌杀死并消化；菌体残渣被排出细胞外。

2、巨噬细胞是如何参加细胞免疫的?

MPS细胞的功能

巨噬细胞吞噬作用

MPS细胞具有重要的生物学作用，不仅参与非特异性免疫防御，而且是特异性免疫应答中一类关键的细胞，广泛参与免疫应答、免疫效应与免疫调节。

（一）免疫防御功能
病原微生物侵入机体后，在激发免疫应答以前即可被MPS细胞吞噬并清除，这是机体非特异免疫防御机制的重要环节。

（二）免疫自稳功能
机体生长、代谢过程中不断产生衰老与死亡的细胞以及某些衰变的物质，它们均可被单核吞噬细胞吞噬、消化和清除，从而维持内环境稳定。

（三）免疫监视功能
MPS细胞构成机体抗肿瘤免疫的重要一环。一般认为只有激活的巨噬细胞才能有效地发挥杀瘤效应，其机制可能是（1）吞噬肿瘤细胞；（2）借助抗瘤抗体的ADCC作用杀伤瘤细胞；（3）产生TNF、IL-1等细胞因子，直接或间接地发挥杀瘤作用；（4）产生某些酶及活性氧分子直接杀伤或抑制肿瘤细胞生长。

（四）抗原呈递功能
MPS细胞是最重要的一类抗原呈递细胞。外来抗原经单核吞噬细胞处理后呈递给T细胞，这是诱发免疫应答的先决条件。

（五）免疫调节功能
一方面抗原呈递作用，诱导免疫应答，分泌具有免疫增强作用的各类生物活性物质，增强免疫应答。另一方面分泌多种抑制物抑制过度激活的巨噬细胞，调控MPS细胞功能。

（六）其他功能
MPS细胞还广泛参与炎症、止血、组织修复、再生等过程。
相关内容的链接
造血干细胞
淋巴细胞系（I） T细胞
淋巴细胞系（II） B细胞
淋巴细胞系（III）第三群淋巴细胞
单核吞噬细胞系统
其他抗原呈递细胞
抗原呈递细胞的抗原呈递作用

3、单核细胞怎么诱导培养成巨噬细胞

【培养原理】
1．培养用细胞因子：
nGM-CSF(粒细胞巨噬细胞集落刺激因子)：
GM-CSF是一种造血生长因子，在体外可刺激中性粒细胞和巨噬细胞的集落形成，并具有促进早期红巨核细胞、嗜酸性祖细胞增殖和发育的功能。GM-CSF是最早被鉴定出来对于DC有作用的细胞因子之一。
GM-CSF在DC培养中的功能是促进单核细胞向大巨噬样细胞分化，细胞表面MHC
II类分子的表达得以提高，从而增强细胞的抗原递呈功能。此外，GM-CSF还可促进DC的存活。
nIL-4
(白细胞介素-4)
IL-4在由单核细胞诱导成DC的过程中发挥的作用是抑制巨噬细胞的过度生长，从而引导单核细胞向DC方向分化。若培养体系中不加IL-4，单核细胞将分化为巨噬细胞。同时，IL-4还有降低细胞表面表达CD14分子的能力。CD14表达水平的降低是单核细胞分化为DC的重要标志。
GM-CSF和IL-4共同作用可使单核细胞定向分化为未成熟DC(immature
DC)，此时的DC具有较强的抗原摄取和加工能力，但抗原递呈能力很弱。细胞表面中度表达MHC
I类、II类分子和B7家族分子(CD80,
CD86等)，但不表达CD14。
nTNF-a
(肿瘤坏死因子-a)
TNF-a可下调未成熟DC的巨胞饮作用和表面Fc受体的表达，使细胞内MHC
II类分子区室(class
II
compartment)消失，但能够上调细胞表面MHC
I类、II类分子和B7家族分子(CD80,
CD86等)的表达，使未成熟DC分化为成熟DC(mature
DC)，此时DC的抗原摄取和加工能力明显减弱，而抗原递呈能力显著增强，可极强的激活T细胞。

4、什么品牌转染试剂可以转染BMDM细胞（小鼠骨髓来源巨噬细胞）？转染效率高啊？

BMDM小鼠骨髓来源巨噬原代细胞转染siRNA或者质粒DNA的难度都是很大的，2020年1月西南医科大学中西医结合医院使用美国Zeta Life公司Advanced Transfection Reagent转染试剂，货号AD600150，成功转染BMDM细胞小鼠骨髓来源的巨噬细胞已发表文章，文章标题(A&P)compound
relievedcisplatin-

具体转染条件等可以咨询作者，希望对大家的细胞转染带来帮助。

5、小鼠骨髓诱导巨噬细胞求助

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6、请教外周血分单核细胞培养巨噬细胞的详细步骤

【培养原理】
1．DC培养用细胞因子：
nGM-CSF(粒细胞巨噬细胞集落刺激因子)：
GM-CSF是一种造血生长因子，在体外可刺激中性粒细胞和巨噬细胞的集落形成，并具有促进早期红巨核细胞、嗜酸性祖细胞增殖和发育的功能。GM-CSF是最早被鉴定出来对于DC有作用的细胞因子之一。

GM-CSF在DC培养中的功能是促进单核细胞向大巨噬样细胞分化，细胞表面MHC II类分子的表达得以提高，从而增强细胞的抗原递呈功能。此外，GM-CSF还可促进DC的存活。

nIL-4 (白细胞介素-4)
IL-4在由单核细胞诱导成DC的过程中发挥的作用是抑制巨噬细胞的过度生长，从而引导单核细胞向DC方向分化。若培养体系中不加IL-4，单核细胞将分化为巨噬细胞。同时，IL-4还有降低细胞表面表达CD14分子的能力。CD14表达水平的降低是单核细胞分化为DC的重要标志。

GM-CSF和IL-4共同作用可使单核细胞定向分化为未成熟DC(immature DC)，此时的DC具有较强的抗原摄取和加工能力，但抗原递呈能力很弱。细胞表面中度表达MHC I类、II类分子和B7家族分子(CD80, CD86等)，但不表达CD14。
nTNF-a (肿瘤坏死因子-a)

TNF-a可下调未成熟DC的巨胞饮作用和表面Fc受体的表达，使细胞内MHC II类分子区室(class II compartment)消失，但能够上调细胞表面MHC I类、II类分子和B7家族分子(CD80, CD86等)的表达，使未成熟DC分化为成熟DC(mature DC)，此时DC的抗原摄取和加工能力明显减弱，而抗原递呈能力显著增强，可极强的激活T细胞。

7、骨髓巨噬细胞是半量换液还是全量换液

大鼠骨髓来源巨噬细胞原百代培养需要贴壁2个小时就换液
系统名称应明确标明：酶的底物及所催化的反应性质.如果有两个底物都应写出,中间用冒号隔开.此外,底物的构型也应写出.
如谷丙转氨酶,其系统名称为L-丙氨酸：α度-酮戊二酸氨基转移酶；
再例如对催化下列反应酶的命名.?
ATP+D-葡萄糖→ADP+D-葡萄糖-6-磷酸
该酶的正式系统命名是：ATP：葡萄糖磷酸转移酶,表示知该酶催化从ATP中转移一个磷酸到葡萄糖分子上的道反应.它的分类数字是：E.C.2.7.1.1,E.C代表按国际酶学委员会规定的命名,第1个数字(2)代表酶的分类名称(转移酶类),第2个数字(7)代表亚类(磷酸转移酶类),第3个数字(1)代表亚亚类(以羟基作专为受体的磷酸转移酶类),第4个数字(1)代表该酶在亚-亚类中的排号(D葡萄糖作为磷酸基的受体).
如果其中一个底物是水,可以省去不写,如D-葡萄糖-δ-内酯水解酶,不必写成D-葡萄糖-δ-内酯：水属水解酶.

8、大鼠骨髓来源巨噬细胞原代培养需要贴壁2个小时就换液吗

大鼠骨髓来源巨噬细胞原代培养需要贴壁2个小时就换液
系统名称应明确标明：酶的底物及所催化的反应性质.如果有两个底物都应写出,中间用冒号隔开.此外,底物的构型也应写出.
如谷丙转氨酶,其系统名称为L-丙氨酸：α-酮戊二酸氨基转移酶；
再例如对催化下列反应酶的命名.?
ATP+D-葡萄糖→ADP+D-葡萄糖-6-磷酸
该酶的正式系统命名是：ATP：葡萄糖磷酸转移酶,表示该酶催化从ATP中转移一个磷酸到葡萄糖分子上的反应.它的分类数字是：E.C.2.7.1.1,E.C代表按国际酶学委员会规定的命名,第1个数字(2)代表酶的分类名称(转移酶类),第2个数字(7)代表亚类(磷酸转移酶类),第3个数字(1)代表亚亚类(以羟基作为受体的磷酸转移酶类),第4个数字(1)代表该酶在亚-亚类中的排号(D葡萄糖作为磷酸基的受体).
如果其中一个底物是水,可以省去不写,如D-葡萄糖-δ-内酯水解酶,不必写成D-葡萄糖-δ-内酯：水水解酶.

9、哪个品牌转染试剂可以转染BMDMs细胞(小鼠骨髓来源的巨噬细胞）？

已经发表文章转染BMDMs细胞(小鼠骨髓来源的巨噬细胞文章如下：

清华大学免疫学研究所发表文章

清华大学用invigentech产品

清华大学

清华大学免疫学研究所