小鼠骨髓移植实验步骤

1、猴头菌营养粉有什么作用

猴头菇的 功效与作用
性平、味甘。利五脏，助消化；具有健胃，补虚，抗癌，益肾精之功效；主治食少便溏、胃及十二指肠溃疡、神经衰弱、食道癌、胃癌、眩晕、阳痿等病症。年老体弱者食用猴头菇，有滋补强身的作用。

2、格拉诺赛特的药理毒理

1.药理作用（）本产品动员和增加正常或使用抗癌药物的小鼠外周血的造血干祖细胞。（2）本产品在许多中性粒细胞减少症的动物模型中（比如肿瘤化疗诱导的中性粒细胞减少症小鼠和骨髓移植小鼠等）可以观察到中性粒细胞数的恢复加速。（3）在肿瘤化疗诱发的中性粒细胞减少症的小鼠模型中，降低的抗感染能力可以恢复到正常水平，同时可以观察到抗生素疗效的增加。（4）在急性髓性白血病小鼠中，来格司亭能改善因肿瘤化疗引起的中性粒细胞减少症，同时缩短中性粒细胞减少症的周期。（5）在体外应用人外周血单个核细胞进行的混合淋巴细胞反应实验表明，来格司亭的作用并不干扰器官移植中使用的免疫抑制药物的作用。在体内的移植物抗宿主反应的实验中也不会干扰上述药物的作用。2.作用原理 （1）本制剂为一种结构与来源于人的粒细胞集落刺激因子（G-CSF）基本无差异的糖蛋白造血因子9.10)，作用于骨髓中的粒细胞系祖细胞，促进其向中性粒细胞分化和增殖。（2）在有本制剂存在的条件下，用小鼠骨髓细胞培养，测定集落形成的结果表明，本制剂作用于粒细胞/巨嗜细胞系集落形成单位（CFU-GM），但对红细胞（BFU-E、CFU-E）及巨核细胞系（CFU-Meg）的集落形成无促进作用（in vitro）12)。

3、用小鼠做造血干细胞移植实验时照射是为什么

小鼠皮下或相关器脏可以给细胞提供存活的条件,也在一些情况下为干细胞分化和分化后的成熟提供条件.同时为了使移植的细胞可以存活,免于免疫排斥,因此采用的小鼠一般都为免疫缺陷小鼠,也就是不会产生免疫反应.

4、做小鼠骨髓移植照光有什么要注意的

balb/c小鼠照8个Gy应该没有问题的，致死剂量是8.5
注意事项
1、小鼠是几周的，受体鼠最好是8周龄以上的
2、雄的比较容易活下来
3、骨髓单个核输注每只尾静脉1－2X10的7次方，你细胞是不是输得太少了
4、另外照完得老鼠要按裸鼠那样饲养，就是在SPF动物房养，用消过毒的笼子，食水都要消毒的
5、食用的水要用酸化水，PH值3－4的
6、如果小鼠照射完看着状态不好，可以腹腔给一点没有血清得培养基，如1640
7，想知道小鼠是不是造血衰竭死亡，你最好把刚刚死亡得小鼠骨髓切片，HE染色看一下，以前我碰见过小鼠别得细胞都恢复了，就是巨核恢复得慢，小鼠出血死掉。
8、当然放射源得数字不准，你可以摸一下照射得剂量梯度，如果照射的空白组死亡，而打同基因骨髓细胞的小鼠还活着，就是最佳的照射剂量了，

5、cyp1b1敲除是什么动物模型

cyp1b1敲除是什么动物模型
因此,本实验结合前期实验结果建立小鼠骨髓移植模型,探讨异基因骨髓移植CYP1B1敲除对小鼠生存状况的影响,旨在研究 CYP1B1基因敲除在小鼠骨髓移植

6、第一次筹建药理实验室方案(建立药理实验室怎样准备)

一套完整的的动物解剖用手术器械。
2.几十套大鼠、小鼠饲养笼、代谢笼、干湿温度计、秒表。
3.大小鼠、兔子灌胃器、研钵。
4.称动物体重用的天平，称动物脏器用的电子分析天平，扭力天平。
5.心电图机。
6.电冰箱、恒温干炒箱、离心机、显微镜、恒温水浴锅、高压消毒锅、超净工作台、分光光度计等。
7.一般常用消耗品如量桶、烧杯、注射器等。
8、细胞培养箱
9、无菌操作台
10、-80℃冰箱供保存细菌用
11、做Aems试验，还需要各种菌株，保存菌株、细胞用的液氮罐  
还有
小动物行为记录分析系统
Hateeras无创血压测量系统
大动物脑立体定位仪

　一。治疗药物监测(TDM)

临床治疗药物监测的目的是通过测定血液中或其它体液中药物的浓度并利用药代动力学的原理使给药方案个体化，以提高药物的疗效，避免或减少毒副反应，其中对于化疗药物及免疫抑制剂的使用，治疗药物监测显得尤为重要。现国内大多采用免疫法进行检测，该法对试剂的依赖程度高，试剂盒昂贵，检测药物种类有限，尤其不能区分原型药及代谢药，特异性及结果准确性较差。

为提高检测灵敏度及结果的准确性，为临床个体化用药提供更可靠的依据，我们采用高效液相色谱-质谱法(LC-MS/MS)进行血液中目标药物浓度的监测，采用先进的AB Sciex 4000QTRAP质谱仪进行检测。与传统的光谱法、免疫法相比，高效液相色谱-质谱法(LC-MS/MS)灵敏度及专属性高、重现性好，用目标离子特征性碎片定量，特异性强，干扰降低，更能准确反映目标药物的血药浓度，为临床应用治疗窗窄、毒副作用大、个体代谢差异大的药物提供了可靠的依据，减少因药物过量造成的毒副作用以及药量过低导致的疗效不佳，指导临床个体化用药。

二。 CYP450药物代谢酶基因多态性检测

为辅助个体化用药，我们现开展“CYP2C9*3、CYP2C19*2基因型DNA序列测定分析”项目，采用基于测序方法分析患者是否为纯合型、杂合型CYP2C9*3或CYP2C19*2基因型。细胞色素氧化酶P450(CYP450)是人类肝脏中一种重要药物代谢酶系统，能代谢多种内源性底物、药物和外源性化合物，主要包括三种超家族：CYP1、CYP2和CYP3。

CYP2C9是CYP2C亚家族中的一种同功酶，大约10%的临床常用药经由CYP2C9氧化代谢，包括甲苯磺丁脲、S-华法林、苯妥因、格列甲嗪、格列本脲、托拉噻咪、络沙坦、厄贝沙坦和许多非甾体类抗炎药物(如布洛芬、氯诺昔康、双氯芬酸和萘普生等药物)。迄今已发现CYP2C9存在30 种等位基因，CYP2C9*1 为具有强代谢活性的野生型基因，CYP2C9*3是中国人中最常见的弱代谢基因型，CYP2C9*3能显著地损害CYP2C9的催化功能，但对不同的底物药物催化代谢的影响不同，具有显著底物依赖性。弱代谢型CYP2C9导致酶活性降低，其药物代谢能力呈“正常基因纯合子 >; 正常基因与弱代谢基因杂合子>;弱代谢基因纯合子或杂合子”的趋势。

在血液病化疗和骨髓移植中，常用的抗癌药物如环磷酰胺、异环磷酰胺、依托泊苷等的代谢速度和CYP2C9的基因型相关。CYP2C9的基因型及共同服用的调节CYP2C9活性的药物均会影响这些药物的代谢速度。

CYP2C19是CYP2C亚家族中的一种同功酶，它参与多种药物的代谢，包括质子泵抑制剂、三环类抗抑郁药、抗癫痫药、抗精神病药、降糖药、抗凝药、抗疟疾药以及一些抗癌药物，如美芬妥英、安定、苯巴比妥、普耐洛尔、奥美拉唑、氯胍以及兰索拉唑、泮妥拉唑等。CYP2C19至少存在18种等位基因，CYP2C19*1 为具有强代谢活性的野生型，而其余基因型均导致代谢活性降低。CYP2C19*2在中国人群中的频率较高，与药物代谢关系最为密切，其它等位基因发生的频率很少。CYP2C19药物代谢能力呈现为“强代谢型基因纯合子 >; 强代谢型与弱代谢型基因杂合子 >; 弱代谢型基因纯合子或杂合子”的变化趋势。

在血液病化疗和骨髓移植中，常用的抗真菌药伏利康唑的代谢酶主要是CYP2C19，次要代谢酶为 CYP2C9和CYP3A4。15-20%的亚洲人群是CYP2C19弱代谢型，其中主要为CYP2C19*2基因型。CYP2C19的基因型及共同服用的调节CYP2C19活性的药物均会影响伏立康唑的血药浓度。

AB Sciex 4000QTrap质谱仪简介

AB Sciex 4000QTRAP四级杆-线性离子肼复合型质谱仪能在同一质谱上同时提供超高灵敏度的定量分析和定性分析功能，串联四级杆的扫描方式和线性离子肼的扫描方式相结合，使其在药物发现、毒理研究、代谢组学、法医学、临床研究等诸多领域发挥重要作用，它是超低含量组分的快速、自动化定量定性分析的最理想工具。它具有诸多优点：

1。串联四极杆和线性离子阱技术相结合，同一台质谱能同时提供超高灵敏度的定量和定性分析功能;

2。 m/z范围：5～2800 amu(四极杆模式);50～2800 amu(线性阱模式);

3。具有串联四极杆的母离子扫描、中性丢失扫描、MRM等独有的功能，从而保证了高灵敏度和特异性;

4。高灵敏度的全扫描MS、CID-MS/MS、多级质谱扫描(MS3)、增强多电荷扫描功能(EMC)、时间延迟碎裂功能(TDF)扫描功能，增强了定性分析能力;

5。线性离子阱技术具有更大的离子容纳能力和空间，因此克服了传统离子阱由于阱的体积小而带来的“空间电荷效应影响，离子容量和捕获效率比传统离子阱高;

6。 TurboV离子源，灵敏度高，适应流速范围宽，方便易用;

7。 Q2 LINAC高压碰撞室技术提高离子从接口到检测器的传输效率，有效消除记忆效应，降低MRM每个离子对的驻留时间，重现性好，适合于高通量、多组分分析。

7、关于小鼠骨髓瘤细胞

骨髓瘤细胞不是病毒。
骨髓瘤细胞是一种癌细胞，他对小鼠造成伤害就是通过不断增殖造成的。所以最后小鼠会腹水，这时候可以从腹水中提取单克隆抗体。小鼠最终会因为骨髓瘤细胞过度繁殖死亡。就和患癌症一样，但是小鼠在实验室中有很多，所以实验室还用这个办法制备单克隆抗体。