1、小鼠骨髓细胞染色实验中有哪些材料可用作制备染色标本,其基本特性是什么
在明视野下，若能看清的话就不要染色了。因为在无法观测清楚时，才会染色。通常染色剂会影响微生物的活性，更多的是使细胞死亡。即使是活性染料也有一定的影响。 根据经验 不染色完全可以看见显微结构 细胞膜 细胞壁 液泡 核 基本可以看见 叶绿体隐约可以看见 当然分辨率和光圈大小需要调整到最佳状态 鞭毛可以隐约看见 霉菌放线菌细菌的形态当然是不染色完全可以看 如果想看更细致些 比如线粒体 高尔基体 核膜 微囊体 膜泡等亚显微结构 需要用特定的分子染料进行染色再进行观察 如果你不需要做活体实验而只是观察的话，染色吧，清晰度好一些。
2、为何基因敲除需要用到嵌合体小鼠
嵌合体是指动物的两颗受精卵融合在一起成为一个个体并成长。遗传学上用以指不同遗传性状嵌合或混杂表现的个体，亦指染色体异常类型之一。转基因小鼠制备过程中必须要经历的一个过程，所以基因敲除小鼠必须要用到嵌合体小鼠。
3、如何取小鼠骨髓细胞
1、颈椎脱臼法处死小鼠(C57型小鼠)，放在75%酒精中侵泡3-5分钟后，拎出后将小鼠铺于超净台上一个消毒托盘上。
2、无菌提取小鼠的四肢骨，用眼科镊小心捏起小鼠两髋关节之间的腹部皮肤，用眼科剪小心剪开皮肤，并分离两下肢的皮肤，往下在脚踝处剪断，往上在髋关节处剪断，这样可以游离出小鼠的两条下肢。
3、小心剥离肌肉，分别剪下Femurs（大腿骨）and Tibias（胫骨）,剪去两端软骨，露出红色的骨髓腔。注意尽可能少的剪走骨髓腔。用纱布将骨头上的肌肉用纱布擦拭干净。
4、拿一支1ml的无菌注射器，每支吸取1mlHBSS液，并用无菌的针头套管将之轻轻拧弯。轻轻插入骨髓腔，冲洗骨髓腔以获得骨髓，一般用2-3ml培养基冲洗两次，可冲出绝大部分细胞。
5、过滤：用2OO目的滤网过滤，将滤网的中央插入到离心管里面25px处，然后用注射器吸取骨髓液，慢慢将骨髓液经滤网注入离心管中，去除残渣。
6、离心：将离心管放置离心机中离心10分钟（1350r/min）
7、去上清，加入1ml红细胞裂解液ACK，静置3分钟，再加9ml HBSS溶液，进行离心10分钟，弃上清。
8、用HBSS液洗涤骨髓细胞2次，室温，1350r/min离心10分钟。计数活细胞，用培养基调整细胞浓度至1X106个细胞/ml.
9、在试管中加入RPMI-1640培养基，然后再加入20ng/ml的细胞因子GM-CSF、5%FBS、0.1%的2-巯基乙醇，
10、吸取培养基加入到沉淀中混匀，24孔板铺板培养，每个孔1ml.
4、如何提取小鼠骨髓细胞?
1、颈椎脱臼法处死小鼠(C57型小鼠)，放在75%酒精中侵泡3-5分钟后，拎出后将小鼠铺于超净台上一个消毒托盘上。
2、无菌提取小鼠的四肢骨，用眼科镊小心捏起小鼠两髋关节之间的腹部皮肤，用眼科剪小心剪开皮肤，并分离两下肢的皮肤，往下在脚踝处剪断，往上在髋关节处剪断，这样可以游离出小鼠的两条下肢。
3、小心剥离肌肉，分别剪下Femurs（大腿骨）and Tibias（胫骨）,剪去两端软骨，露出红色的骨髓腔。注意尽可能少的剪走骨髓腔。用纱布将骨头上的肌肉用纱布擦拭干净。
4、拿一支1ml的无菌注射器，每支吸取1mlHBSS液，并用无菌的针头套管将之轻轻拧弯。轻轻插入骨髓腔，冲洗骨髓腔以获得骨髓，一般用2-3ml培养基冲洗两次，可冲出绝大部分细胞。
5、过滤：用2OO目的滤网过滤，将滤网的中央插入到离心管里面25px处，然后用注射器吸取骨髓液，慢慢将骨髓液经滤网注入离心管中，去除残渣。
6、离心：将离心管放置离心机中离心10分钟（1350r/min）
7、去上清，加入1ml红细胞裂解液ACK，静置3分钟，再加9ml HBSS溶液，进行离心10分钟，弃上清。
8、用HBSS液洗涤骨髓细胞2次，室温，1350r/min离心10分钟。计数活细胞，用培养基调整细胞浓度至1X106个细胞/ml.
9、在试管中加入RPMI-1640培养基，然后再加入20ng/ml的细胞因子GM-CSF、5%FBS、0.1%的2-巯基乙醇，
10、吸取培养基加入到沉淀中混匀，24孔板铺板培养，每个孔1ml.
5、做小鼠骨髓移植照光有什么要注意的
balb/c小鼠照8个Gy应该没有问题的，致死剂量是8.5
注意事项
1、小鼠是几周的，受体鼠最好是8周龄以上的
2、雄的比较容易活下来
3、骨髓单个核输注每只尾静脉1－2X10的7次方，你细胞是不是输得太少了
4、另外照完得老鼠要按裸鼠那样饲养，就是在SPF动物房养，用消过毒的笼子，食水都要消毒的
5、食用的水要用酸化水，PH值3－4的
6、如果小鼠照射完看着状态不好，可以腹腔给一点没有血清得培养基，如1640
7，想知道小鼠是不是造血衰竭死亡，你最好把刚刚死亡得小鼠骨髓切片，HE染色看一下，以前我碰见过小鼠别得细胞都恢复了，就是巨核恢复得慢，小鼠出血死掉。
8、当然放射源得数字不准，你可以摸一下照射得剂量梯度，如果照射的空白组死亡，而打同基因骨髓细胞的小鼠还活着，就是最佳的照射剂量了，
6、小鼠骨髓瘤细胞 是什么
骨髓瘤细胞是一种癌细胞，他对小鼠造成伤害就是通过不断增殖造成的。所以最后小鼠会腹水，这时候可以从腹水中提取单克隆抗体。小鼠最终会因为骨髓瘤细胞过度繁殖死亡。就和患癌症一样，但是小鼠在实验室中有很多，所以实验室还用这个办法制备单克隆抗体。