1、什么是细胞克隆
克隆技术
克隆,是英文“clone”一词的音译,在台湾与港澳一般意译为复制或转殖,是利用生物技术由无性生殖产生与原个体有完全相同基因组之后代的过程。
-{A|zh-cn:克隆;zh-hk:转植;zh-mo:转植;zh-tw:复制}-的英文‘clone’源于希腊语的‘klōn’(嫩枝)。在园艺学中,‘clon’一词一直沿用到20世纪。后来有时在词尾加上‘e’成为‘clone’,以表明‘o’的发音是长元音。近来随着这个概念及单字在大众生活中广泛使用,拼法已经局限使用‘clone’。该词的中文译名在中国大陆音译为‘-{克隆}-’,而在港台则多意译为“转殖”或‘复制’。前者‘-{克隆}-’如同copy的音译‘拷贝’,有不能望文生义的缺点;而后者‘复制’虽能大概表达clone的意义,却有不能精确并易生误解之憾。
克隆通常是一种人工诱导的无性生殖方式或者自然的的无性生殖方式(如植物)。一个克隆就是一个多细胞生物在遗传上与另外一种生物完全一样。克隆可以是自然克隆,例如由无性生殖或是由于偶然的原因产生两个遗传上完全一样的个体(就像同卵双生一样)。但是我们通常所说的克隆是指通过有意识的设计来产生的完全一样的复制。
在生物学上,克隆通常用在两个方面:克隆一个基因或是克隆一个物种。克隆一个基因是指从一个个体中获取一段基因(例如通过PCR的方法),然后将其插入另外一个个体(通常是通过载体),再加以研究或利用。克隆有时候是指成功地鉴定出某种-{A|zh-cn:表现型;zh-tw:显性}-的基因。所以当某个生物学家说某某疾病的基因被成功地克隆了,就是说这个基因的位置和DNA序列被确定。而获得该基因的拷贝则可以认为是鉴定此基因的副产品。
克隆一个生物体意味着创造一个与原先的生物体具有完全一样的遗传信息的新生物体。在现代生物学背景下,这通常包括了体细胞核移植。在体细胞核移植中,卵母细胞核被除去,取而代之的是从被克隆生物体细胞中取出的细胞核,通常卵母细胞和它移入的细胞核均应来自同一物种。由于细胞核几乎含有生命的全部遗传信息,宿主卵母细胞将发育成为在遗传上与核供体相同的生物体。线粒体DNA这里虽然没有被移植,但相对来讲线粒体DNA还是很少的,通常可以忽略其对生物体的影响。
克隆在园艺学上是指通过营养生殖产生的单一植株的后代。很多植物都是通过克隆这样的无性生殖方式从单一植株获得大量的子代个体。
什么是克隆?
克隆是英语单词clone的音译,clone源于希腊文klone,原意是指幼苗或嫩枝,以无性繁殖或营养繁殖的方式培育植物,如杆插和嫁接。
如今,克隆是指生物体通过体细胞进行的无性繁殖,以及由无性繁殖形成的基因型完全相同的后代个体组成的种群。克隆也可以理解为复制、拷贝,就是从原型中产生出同样的复制品,它的外表及遗传基因与原型完全相同。
中国克隆了什么?
蛙:1952年,未成功。
鲤鱼:1963年,中国科学家童第周早在1963年就通过将一只雄性鲤鱼的遗传物质注入雌性鲤鱼的卵中从而成功克隆了一只雌性鲤鱼,比多利羊的克隆早了33年。但由于相关论文是发表在一本中文科学期刊,并没有翻译成英文,所以并不为国际上所知晓。(源自:PBS)
古代神话里孙悟空用自己的汗毛变成无数个小孙悟空的离奇故事,表达了人类对复制自身的幻想。1938 年,德国科学家首次提出了哺乳动物克隆的思想,1996年,体细胞克隆羊“多利”出世后,克隆迅速成为世人关注的焦点,人们不禁疑问:我们会不会跟在羊的后面?这种疑问让所有人惶惑不安。然而,反对克隆的喧嚣声没有抵过科学家的执着追求,伴随着牛、鼠、猪乃至猴这种与人类生物特征最为相近的灵长类动物陆续被克隆成功,人们已经相信,总有一天,科学家会用人类的一个细胞复制出与提供细胞者一模一样的人来,克隆人已经不是科幻小说里的梦想,而是呼之欲出的现实。目前,已有三个国外组织正式宣布他们将进行克隆人的实验,美国肯塔基大学的扎沃斯教授正在与一位名叫安提诺利的意大利专家合作,计划在两年内克隆出一个人来。
由于克隆人可能带来复杂的后果,一些生物技术发达的国家,现在大都对此采取明令禁止或者严加限制的态度。克林顿说:“通过这种技术来复制人类,是危险的,应该被杜绝!”全国政协委员、中国科学院国家基因研究中心主任洪国藩也明确表示反对进行克隆人的研究,而主张把克隆技术和克隆人区别开来。
克隆人,真的如潘多拉盒子里的魔鬼一样可怕吗?
实际上,人们不能接受克隆人实验的最主要原因,在于传统伦理道德观念的阻碍。千百年来,人类一直遵循着有性繁殖方式,而克隆人却是实验室里的产物,是在人为操纵下制造出来的生命。尤其在西方,“抛弃了上帝,拆离了亚当与夏娃”的克隆,更是遭到了许多宗教组织的反对。而且,克隆人与被克隆人之间的关系也有悖于传统的由血缘确定亲缘的伦理方式。所有这些,都使得克隆人无法在人类传统伦理道德里找到合适的安身之地。但是,正如中科院院士何祚庥所言:“克隆人出现的伦理问题应该正视,但没有理由因此而反对科技的进步”。人类社会自身的发展告诉我们,科技带动人们的观念更新是历史的进步,而以陈旧的观念来束缚科技发展,则是僵化。历史上输血技术、器官移植等,都曾经带来极大的伦理争论,而当首位试管婴儿于1978年出生时,更是掀起了轩然大波,但现在,人们已经能够正确地对待这一切了。这表明,在科技发展面前不断更新的思想观念并没有给人类带来灾难,相反地,它造福了人类。就克隆技术而言,“治疗性克隆”将会在生产移植器官和攻克疾病等方面获得突破,给生物技术和医学技术带来革命性的变化。比如,当你的女儿需要骨髓移植而没有人能为她提供;当你不幸失去5岁的孩子而无法摆脱痛苦;当你想养育自己的孩子又无法生育……也许你就能够体会到克隆的巨大科学价值和现实意义。治疗性克隆的研究和完整克隆人的实验之间是相辅相成、互为促进的,治疗性克隆所指向的终点就是完整克隆人的出现,如果加以正确的利用,它们都可以而且应该为人类社会带来福音。
科学从来都是一把双刃剑。但是,某项科技进步是否真正有益于人类,关键在于人类如何对待和应用它,而不能因为暂时不合情理就因噎废食。克隆技术确实可能和原子能技术一样,既能造福人类,也可祸害无穷。但“技术恐惧”的实质,是对错误运用技术的恐惧,而不是对技术本身的恐惧。目前,世界各国对克隆人的态度多有“暧昧”,英国去年以超过三分之二的多数票通过了允许克隆人类早期胚胎的法案,而在美国、德国、澳大利亚,也逐渐听到了要求放松对治疗性克隆限制的声音。可以说,哪一个国家首先掌握了克隆人的技术,就意味着这个国家拥有了优势和主动,而起步晚的国家可能因此而遭受现在还无法预测的损失。如同当年美国首先掌握了原子能技术,虽然这项技术从一开始便展现着它罪恶的一面,但后来各国又不得不加紧这方面的研究和实验。单从这个角度上讲,对克隆人实验采取简单否定的态度也是值得探讨的。
至于人们担忧克隆技术一旦成熟,会有用心不良者克隆出千百个“希特勒”,或者克隆出另一个名人来混淆视听,则是对克隆的误解。克隆人被复制的只是遗传特征,而受后天环境里诸多因素影响的思维、性格等社会属性不可能完全一样,即克隆技术无论怎样发展,也只能克隆人的肉体,而不能克隆人的灵魂,而且,克隆人与被克隆人之间有着年龄上的差距。因此,所谓克隆人并不是人的完全复制,历史人物不会复生,现实人物也不必担心多出一个“自我”来。
所有克隆的物品及克隆时间
绵羊:1996年,多利(Dolly)
猕猴:2000年1月,Tetra,雌性
猪:2000年3月,5只苏格兰PPL小猪;8月,Xena,雌性
牛:2001年,Alpha和Beta,雄性
猫:2001年底,CopyCat(CC),雌性
鼠:2002年
兔:2003年3-4月分别在法国和朝鲜独立地实现;
骡:2003年5月,爱达荷Gem,雄性;6月,犹他先锋,雄性
鹿:2003年,Dewey
马:2003年,Prometea,雌性
狗:2005年,韩国首尔大学实验队,史努比(Snoopy)
猪:2005年8月8日,中国第一头供体细胞克隆猪
尽管克隆研究取得了很大进展,目前克隆的成功率还是相当低的:多利出生之前研究人员经历了276次失败的尝试;70只小牛的出生则是在9000次尝试后才获得成功,并且其中的三分之一在幼年时就死了;Prometea也是花费了328次尝试才成功出生。而对于某些物种,例如猫和猩猩,目前还没有成功克隆的报道。而狗的克隆实验,也是经过数百次反覆试验再得来的成果。
多利出生后的年龄检测表明其出生的时候就上了年纪。她6岁的时候就得了一般老年时才得的关节炎。这样的衰老被认为是端粒的磨损造成的。端粒是染色体位于末端的。随着细胞分裂,端粒在复制过程中不断磨损,这通常认为是衰老的一个原因。然而,研究人员在克隆成功牛后却发现它们实际上更年轻。分析它们的端粒表明它们不仅是回到了出生的长度,而且比一般出生时候的端粒更长。这意味着它们可以比一般的牛有更长的寿命,但是由于过度生长,它们中的很多都过早夭折了。研究人员相信相关的研究最终可以用来改变人类的寿命。
克隆人违背人类生命伦理
现代科技,特别是现代生命科技,要不要尊重伦理学原则,要不要倾听伦理的声音?有关专家针对一些科学狂人在美国秘密克隆人的做法指出——克隆人违背人类生命伦理,存在着极大的争议和难以解决的一系列法律等问题。
我国多家媒体近日转载了国外媒体报道的一条惊人消息:一群受邪教组织操纵的科学狂人,正在美国内华达州大漠深处进行着一项克隆人的秘密实验。他们根据英国科学家创造世界第一只克隆羊“多利”的同样原理,从一个今年2月份夭折的10个月大的美国女婴身上提取细胞制造克隆人。据称,“如果进展顺利的话,世界上第一个克隆人将于明年年底诞生。”
消息披露后,克隆技术及其带来的伦理学问题再一次成为人们议论的热点。如果这一消息属实的话,应当如何看待此事,如何正确地评价和思考这个问题,记者为此走访了国家人类基因组南方研究中心伦理、法律和社会部主任、上海社科院哲学研究所沈铭贤研究员。
沈教授说:自1997年英国罗斯林研究所成功地克隆出“多利”羊后,国外不断有人在名利的驱使下,提出并试图从事克隆人的研究。尽管各国政府明令禁止,但与克隆人有关的报道近两年来不止一次见诸报端。但是,这次速度这么快,又与邪教组织有关联,确实令人感到震惊。
痛失爱女的父母,希望通过克隆技术使女儿复活,这种心情是可以理解的。但如果科学家借此进行克隆人的实验,就值得讨论了。沈教授认为:即使撇开邪教不谈,这种做法也是不可取的。就“克隆人”这一个体而言,他会生活在“我是一个死去的人的复制品” 这样一个阴影中,这对他的心理会产生什么样的影响?
按照生命伦理学的观点,科学技术要从长远利益出发,造福整个人类。它必须遵循“行善、不伤害、自主和公正”这四项国际公认的伦理原则。“多利”羊的克隆成功经过了200多次的失败,出现过畸形或夭折的羊。而克隆人更为复杂,无疑会遇到更多的失败,如果制造出不健康、畸形或短寿的人,将是对人权的一种侵犯。
沈教授指出:现在科学界把克隆分为治疗性克隆和生殖性克隆两种。前者是利用胚胎干细胞克隆人体器官,供医学研究、解决器官移植供体不足问题,这是国际科学界和伦理学界都支持的,但有一个前提,就是用于治疗性克隆的胚胎不能超出妊娠14天这一界限。而对于生殖性克隆,即通常所说的克隆人,由于它在总体上违背了生命伦理原则,所以,科学家的主流意见是坚决反对的。联合国教科文组织、世界卫生组织和国际人类基因组伦理委员会和各国政府也都非常明确地表示,反对生殖性克隆。即使克隆人真的诞生了,我们还是要坚持这一基本立场。
现代科学技术是一把双刃剑,在其造福人类的同时也会带来一些负面效应。这就向我们提出了一个问题:现代科技,特别是现代生命科技,要不要尊重伦理学原则,要不要倾听伦理的声音?沈教授指出:现在有些科学家提出,只要科学上有可能做到的,就应该去做。事实上,这是错误的观点。如果技术上我们能制造出一种严重危害人类的超级生命,难道也可以去制造吗?一些科学狂人正是打着“科学自由”的旗号,去做一些危害人类的事。因此,我们要警惕现代科学技术被一些别有用心的人利用。另外,也不能把科学自由和伦理道德对立起来。现代生命科学发展的事实表明,伦理的规范和引导,并没有束缚科学的发展,倾听伦理的声音,有利于科学更健康、顺利地发展。
选自2000年11月8日《文汇报》文字
我们所说的生物技术的利和弊主要指的是克隆,其利和弊是
利:1) 克隆技术可解除那些不能成为母亲的女性的痛苦。
2) 克隆实验的实施促进了遗传学的发展,为“制造”能移植于人体的动物器官开辟了前景。
3) 克隆技术也可用于检测胎儿的遗传缺陷。将受精卵克隆用于检测各种遗传疾病,克隆的胚胎与子宫中发育的胎儿遗传特征完全相同。
4) 克隆技术可用于治疗神经系统的损伤。成年人的神经组织没有再生能力,但干细胞可以修复神经系统损伤。
5) 在体外受精手术中,医生常常需要将多个受精卵植入子宫,以从中筛选一个进入妊娠阶段。但许多女性只能提供一个卵子用于受精。通过克隆可以很好地解决这一问题。这个卵细胞可以克隆成为多个用于受精,从而大大提高妊娠成功率。
弊:1) 克隆将减少遗传变异,通过克隆产生的个体具有同样的遗传基因,同样的疾病敏感性,一种疾病就可以毁灭整个由克隆产生的群体。 可以设想,如果一个国家的牛群都是同一个克隆产物,一种并不严重的病毒就可能毁灭全国的畜牧业。
2) 克隆技术的使用将使人们倾向于大量繁殖现有种群中最有利用价值的个体,而不是按自然规律促进整个种群的优胜劣汰。从这个意义上说,克隆技术干扰了自然进化过程.
3) 克隆技术是一种昂贵的技术,需要大量的金钱和生物专业人士的参与,失败率非常高。多莉就是277次实验唯一的成果。虽然现在发展出了更先进的技术,成功率也只能达到2-3%。
4) 转基因动物提高了疾病传染的风险。例如,如果一头生产药物牛奶的牛感染了病毒,这种病毒就可能通过牛奶感染病人
5) 克隆技术应用于人体将导致对后代遗传性状的人工控制。克隆技术引起争论的核心就是能否允许对发育初期的人类胚胎进行遗传操作。这是很多伦理学家所不能接受的。
6) 克隆技术也可用来创造“超人”,或拥有健壮的体格却智力低下的人。而且,如果克隆技术能够在人类中有效运用,男性也就失去了遗传上的意义。
7) 克隆技术对家庭关系带来的影响也将是巨大的。一个由父亲的DNA克隆生成的孩子可以看作父亲的双胞胎兄弟,只不过延迟了几十年出生而已。很难设想,当一个人发现自己只不过是另外一个人的完全复制品,他(或她)会有什么感受?
所以说,科学技术有时就是一把双刃剑,有利也有没弊,没有标准答案!就看人们这样利用了!
2、tcr基因重排检测到单克隆重排什么意思?
基因重排指的是不同的淋巴细胞的Ig或者TCR片段在细胞分化过程中发生的重新排版列组合。
TCR和Ig基因权家族的单克隆重排是淋巴瘤细胞群的重要特征,用于辅助诊断淋巴瘤。
3、免疫五项检查可以查出多发性骨髓瘤吗
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4、tcr基因重排检测到单克隆重排
TCR,Ig基因重排检测
项目简介:
淋巴瘤是一种起源于淋巴结或者其他淋巴组织的恶性肿瘤,组织学上可见淋巴细胞和/或组织细胞的肿瘤性增生,淋巴恶性肿瘤的临床诊断,主要以组织形态学或者细胞形态学,结合免疫组化或者流式细胞计数免疫表型分型为主,能确诊大约90%-95%的病例,但仍有5%-10%的病例仅凭上述方法不能确诊。近年来,国外分子生物学技术证实,细胞的克隆形成能力(clonality)可协助肿瘤的诊断。淋巴瘤都存在克隆性增殖(肿瘤性增生)的淋巴细胞,在同一病人体内不论组织类型和病理分期,都表现为相同的克隆性淋巴细胞群。
淋巴细胞的基本特征之一,即B细胞中Ig基因和T细胞中的TCR基因的重排。基因重排指的是不同的淋巴细胞的Ig或者TCR片段在细胞分化过程中发生的重新排列组合。正常淋巴细胞未受任何刺激情况下,其基因重排是随机的,细胞表现为多家族和多克隆性,具有发挥各种细胞免疫作用的潜能。而在淋巴瘤发生过程中,在肿瘤特异性抗体或肿瘤相关抗原刺激下,淋巴细胞某一个或几个TCR或Ig基因家族会发生针对性和选择性重排,导致TCR或Ig基因单克隆性表达,使淋巴细胞呈现为克隆性增殖,导致在淋巴结,外周血或者骨髓细胞中出现1个或2个主要淋巴细胞克隆,为单克隆性。TCR和Ig基因家族的单克隆重排是淋巴瘤细胞群的重要特征,用于辅助诊断淋巴瘤。
Ig和TCR各自包含有众多的基因家族,每个家族都具有不同的基因片段,Ig家族包括有IgH,IgK和IgL,TCR基因家族包括有TCRG, TCRB, TCRA和TCRD,临床检测主要以检测B淋巴细胞的IgH以及T淋巴细胞的TCRG。IgH重排检测大约能检出91%的B系淋巴瘤,TCRG基因结构简单,只需要很少的PCR反应就能检测出全部可能的重排。在B细胞检测中增加IgK及T细胞检测中增加TCRB和TCRD的检测可以大大提高阳性检出率,减少假阴性率。我们建议同时检测。而IgL,TCRA克隆性重排检出率低,且重排类型有限,故临床重排意义不大。PCR扩增法具备简便,经济,省时,敏感,高效,易自动化,能用于FFPE标本检测等优点,因而广泛适用于临床诊断和科研。
检测方法:
从蜡块或者血液标本中提取基因组DNA,以PCR扩增法分析基因有无单克隆重排。
样本采集及送检要求
样本采集:
10%中性福尔马林固定的石蜡包埋蜡块或8-10片5-10μm切片;
5-10ml EDTA抗凝的外周血或骨髓血。
样本储存及稳定性:
FFPE标本:室温运输;
血液标本:2-8℃冷藏运输,采样后尽快送检(72小时至实验室佳)不可冷冻。
样本拒收标准:
FFPE标本:非10%中性福尔马林固定的;盛样本容器和/或检验申请单上信息缺失或不符;
血液标本:盛样本容器和/或检验申请单上信息缺失或不符;
未使用合适的抗凝剂;
送检样本容器破损,有渗漏或者选择不当;
出现溶血,严重凝血等情况的;
冷冻样本。
临床意义:
用于辅助诊断淋巴瘤与反应性增生;
用于鉴定淋巴瘤细胞谱系;
用于监测淋巴瘤患者治疗情况。
5、红细胞克隆大小参考值
针对PNH红细胞对补体敏感及缺少GPI蛋白的试验检查:①酸化血清溶血试验(Ham试验),PNH病态红细胞在pH6.4的条件下易被替代途径激活的补体破坏,正常红细胞则否。本试验有较强的特异性,被国内外视为诊断PNH的主要依据。②糖水溶血试验(蔗糖溶血试验),试验依据是PNH细胞在等渗低离子强度的情况下易遭补体破坏。本试验敏感性高,PNH患者约88%阳性,可做初筛试验,其缺点是易出现假阳性反应。③蛇毒因子(CoF)溶血试验。从眼镜蛇毒中可提取一种物质(称蛇毒因子),它本身没有溶血作用,但可在血清成分的协同下通过替代途径激活补体。在这种体系中PNH异常红细胞破坏,正常红细胞则否。本实验也有较强的特异性,敏感性比Ham试验强,比糖水试验略差。④PNH异常血细胞的检测和定量,PNH异常血细胞膜上缺乏GPI连接蛋白,可以用有关抗体结合流式细胞技术检测出缺乏这些膜蛋白的异常细胞。在GPI连接蛋白中,CD55、CD59存在于所有系列的血细胞中,且与临床关系密切,故常将这两种蛋白缺失作为PNH 克隆的标记。以流式细胞仪检测GPI缺陷的血细胞,当CD55-或CD59-细胞占3%~5%时即可检出,较前述方法敏感。在PNH患者的外周血中,CD59-红细胞所占的比例较CD55-细胞要高,CD59单抗比CD55单抗在诊断时更敏感。用CD59单抗检查PNH患者外同血细胞,CD59-细胞百分数均明显高于正常人,追踪观察几乎无一例漏诊,使其成为目前确立诊断最特异、最敏感且可定量的方法。在PNH克隆发展过程中,首先累及的是粒细胞,其次是单核细胞和红细胞,再次是淋巴细胞。因此,粒细胞CD59-最早被检出,其CD59-百分率最高,红细胞次之,淋巴细胞较低。故粒细胞CD59的检测对PNH有早期诊断价值,可远比Ham试验阳性为早。由于PNH异常细胞起源于造血干细胞,当外周血细胞尚无CD59-细胞时,骨髓细胞中可能巳经有CD59-细胞检出,因此检测骨髓细胞比外周血细胞更有意义。
6、免疫血检查能查出骨髓瘤的蜘蛛马迹
应用抗免疫球蛋白的重链抗体和抗免疫球蛋白轻链抗体,进行免疫荧光法检查,可发现骨髓瘤细胞呈阳性,但仅含有一种重链和一种轻链,与其血清中M蛋白(M protein)的重链、轻链类型一致。血清异常单克隆免疫球蛋白 异常单克隆免疫球蛋白增多引起的高球蛋白血症是本病的重要特征之一。血清清蛋白减少或正常,A/G比例常倒置。异常单克隆免疫球蛋白大量增多的同时,正常免疫球蛋白常明显减少。检测血清异常单克隆免疫球蛋白的方法有下述几种:
(1)血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳:异常增多的单克隆免疫球蛋白表现为一浓集的窄带,经密度扫描仪绘出的图像表现为一窄底高峰,其峰高度至少较峰底宽度大2倍以上,即M成分(或称M蛋白)。这是由于单克隆免疫球蛋白的相对分子质量大小、氨基酸组成、所带电荷完全相同,因而在电场的泳动速度完全相同的缘故。M成分可出现在γ区(IgG,IgM)、β或α2区(IgA),这取决于单克隆免疫球蛋白的类型。当M成分显著增多时,其他免疫球蛋白及血清清蛋白常明显减少。
(2)免疫电泳:单克隆免疫球蛋白在免疫电泳上表现为异常沉淀弧,在出现一种异常重链沉淀弧和一种异常轻链沉淀弧的同时,另一种轻链和其他类型重链常明显减少。根据免疫电泳结果可以确定单克隆免疫球蛋白类型,从而对多发性骨髓瘤进行分型,即IgG型、IgA型、IgM型、IgD型、IgE型、轻链型、双克隆或多克隆型、不分泌型。
(3)聚合酶链反应(PCR):近年来采用PCR技术检测免疫球蛋白重链基因重排作为单克隆B细胞——浆细胞恶性增生的标记,用于本病的诊断及与良性反应性免疫球蛋白增多的鉴别诊断。用上述方法检出单克隆免疫球蛋白后,尚需进行定量,目前多采用速率散射比浊法(rate nephelometry)确定免疫球蛋白浓度。
7、骨髓中可见克隆性增生的B细胞(约占有核细胞的7.31%)?
正常3%以下,基本看不到就对了,除非你在感冒!
8、红细胞、成熟粒细胞未检测到pnh克隆是好还是坏
针对PNH红细胞对补体敏感及缺少GPI蛋白的试验检查:①酸化血清溶血试验(Ham试验),PNH病态红细胞在pH6.4的条件下易被替代途径激活的补体破坏,正常红细胞则否。本试验有较强的特异性,被国内外视为诊断PNH的主要依据。②糖水溶血试验(蔗糖溶血试验),试验依据是PNH细胞在等渗低离子强度的情况下易遭补体破坏。本试验敏感性高,PNH患者约88%阳性,可做初筛试验,其缺点是易出现假阳性反应。③蛇毒因子(CoF)溶血试验。从眼镜蛇毒中可提取一种物质(称蛇毒因子),它本身没有溶血作用,但可在血清成分的协同下通过替代途径激活补体。在这种体系中PNH异常红细胞破坏,正常红细胞则否。本实验也有较强的特异性,敏感性比Ham试验强,比糖水试验略差。④PNH异常血细胞的检测和定量,PNH异常血细胞膜上缺乏GPI连接蛋白,可以用有关抗体结合流式细胞技术检测出缺乏这些膜蛋白的异常细胞。在GPI连接蛋白中,CD55、CD59存在于所有系列的血细胞中,且与临床关系密切,故常将这两种蛋白缺失作为PNH 克隆的标记。以流式细胞仪检测GPI缺陷的血细胞,当CD55-或CD59-细胞占3%~5%时即可检出,较前述方法敏感。在PNH患者的外周血中,CD59-红细胞所占的比例较CD55-细胞要高,CD59单抗比CD55单抗在诊断时更敏感。用CD59单抗检查PNH患者外同血细胞,CD59-细胞百分数均明显高于正常人,追踪观察几乎无一例漏诊,使其成为目前确立诊断最特异、最敏感且可定量的方法。在PNH克隆发展过程中,首先累及的是粒细胞,其次是单核细胞和红细胞,再次是淋巴细胞。因此,粒细胞CD59-最早被检出,其CD59-百分率最高,红细胞次之,淋巴细胞较低。故粒细胞CD59的检测对PNH有早期诊断价值,可远比Ham试验阳性为早。由于PNH异常细胞起源于造血干细胞,当外周血细胞尚无CD59-细胞时,骨髓细胞中可能巳经有CD59-细胞检出,因此检测骨髓细胞比外周血细胞更有意义。
9、多发性骨髓瘤是因为那种细胞克隆性而增值的
多发性骨髓瘤(MM)是一种恶性浆细胞病,其肿瘤细胞起源于骨髓中的浆细胞,而浆细胞是B淋巴细胞发育到最终功能阶段的细胞。因此多发性骨髓瘤可以归到B淋巴细胞淋巴瘤的范围。目前WHO将其归为B细胞淋巴瘤的一种,称为浆细胞骨髓瘤/浆细胞瘤。其特征为骨髓浆细胞异常增生伴有单克隆免疫球蛋白或轻链(M蛋白)过度生成,极少数患者可以是不产生M蛋白的未分泌型MM。多发性骨髓瘤常伴有多发性溶骨性损害、高钙血症、贫血、肾脏损害。由于正常免疫球蛋白的生成受抑,因此容易出现各种细菌性感染。发病率估计为2~3/10万,男女比例为1.6:1,大多患者年龄>40岁。
北京,史淑荣,中西医结合血液病医师
10、本人患再障,骨髓等报告如下,检测骨髓少见pnh克隆是否会转变成AA-PNH综合症。
病情分析:
你好,应考虑移植手术治疗的。
指导意见:
术后应采取排异相应措施的,应该避免生冷辛辣等不良刺激的