1、关于检测白血病的几项骨髓穿刺检查项目的问题
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2、骨髓免疫分型特异性抗原是什么意思
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3、白血病免疫形态学检查cd5阳性率为20%，其余阳性率均为0%，请问这是白血病吗？
摘要本研究的目的是探讨低分化急性髓系白血病(AML2Mo) 的细胞形态学、组织化学、免疫学特征及其诊断意义。用瑞氏2姬姆萨混合染色法及组织化学试剂对骨髓涂片进行染色分类,并采用流式细胞术作细胞免疫表型分析。结果表明,2 例患者均符合AML2Mo 分类诊断标准,髓过氧化物酶( POX) 染色阳性率均为阴性,糖原( PAS) 染色均为细颗粒阳性,髓系单抗CD33、CD13 阳性,T 淋巴系单抗CD2 、CD3 阴性,B 淋巴系单抗CD10、CD19、CD22 阴性。结论:骨髓细胞形态学,组织化学及免疫分型是诊断AML2Mo 的主要依据,采用多种单克隆抗体同时染色血细胞及进行多参数分析,有利于检测多种抗原在单个细胞上的表达,使AML2Mo 的诊断更加准确。
关键词 急性髓系白血病; 低分化急性髓系白血病; 细胞形态学; 免疫表型
中图分类号 R733171 文献标识码 A
The Morphological and Immunological Characteristics of Less2Differen2 tiated Acute Myeloid Leukemic CellsLAI Yi2Yan , TAN Huo , YE Xu , ZHOU Xu2Hong , FEN G Ying , ZEN G Lin2J uan Department of Hematology , The Second Af f iliated Hospital of Guangz hou Medical College , Guangz hou 510260 , Chi naAbstract The aim was to study the morphological , histochemical and immunological characteristics of less2differentiated acute myeloid leukemic cells , and their diagnostic significance. Wrigt2Giemsa and histochemical staining were used to stain bone marrow smears from 2 case of AML2Mo. Immunological phenotypes were determined with flow cytometry. The results showed that myeloperoxidase stainings of both cases were negative , PAS was positive with fine particles , CD33/ CD13 were positive , CD2/ CD3/ CD10/ CD19/ CD22 were negative. It is concluded that morphology , histochemistry and immunological phenotype on bone marrow smears are the main diagnostic basis for AML2Mo. The use of multiple monoclonal antibodies for staining may improve the accuracy.
Key words acute myeloid leukemia ; less2differentiated acute myeloid leukemia ; cell morphology ; immunotype
J Ex p Hematol 2003 ; 11 (4) :429 - 431
随着越来越多的单克隆抗体(McAb) 出现,我们对白血病细胞异质性的认识更加深刻,对形态学上难以识别的急性白血病(AML2Mo) ,可用组织化学和免疫学方法加以确诊。
病例和方法
例
例1 , 50 岁,因头晕、乏力、咳嗽20 天伴发热于2001年11 月到本院就诊。查体:一般状态良好,全身浅表的淋巴结不大,胸骨无压痛; 肝刚触及,脾肋下1 cm;皮肤巩膜未见黄染及出血点; 外周血白细胞3. 2 ×109/ L , Hb 69/ L , Plt 69 ×109/ L 。形态学检查:外周血涂片可见原始细胞66. 0 %。骨髓检查:增生明显活跃,原始细胞明显增多占78. 5 % ,粒系、红系明显减少。诊断AML2Mo 。例2 , 女性,59 岁,因发热,咽痛,纳差2 周入院。于2 周前出现右扁桃体渐渐肿大,曾在口腔科诊断为扁桃体炎,予抗炎治疗,症状未见好转。出现头晕,乏力,伴恶心,呕吐,送本院急诊查白细胞4. 0×109/ L , Hb 80/ L , Plt 76 ×109/ L 。查体:贫血貌,全身浅表淋巴结不大,胸骨压痛,肝脾肋下未触及,皮肤巩膜未见黄染及出血点。形态学检查:外周血涂片可见原始细胞76. 0 %;骨髓示增生活跃,原始细胞明显增多占86. 5 % ,粒系,红系明显减少。诊断AML2Mo 。
方法
形态学检查:骨髓及外周血涂片经瑞氏2姬姆萨混合液染色后,分别分类200 和100 个有核细胞,并经2位以上有形态学经验者进行类型确定。病例按常规做细胞化学各项检查: 包括髓过氧化物酶(POX) ;特异性酯酶( SE) ;非特异性酯酶(NSE) 和NSE 加氟化钠抑制(NSE + NaF) 试验;糖原( PAS) ;嗜中性细胞碱性磷酸酶(NAP) 等。免疫学检查:用相对密度为1. 007 的淋巴细胞分离液分离骨髓中的单个核细胞,对混含的红细胞用红细胞裂解液处理后,再按试剂说明进行标记染色,用美国BD 公司FACSort 流式细胞仪进行检测。荧光阳性细胞大于20 %作为相应抗原阳性的判断标准。所用细胞表面单克隆抗体包括: B 系列CD10 ,CD19 , CD20 和CD22 ; T 系列CD2 , CD5 和CD7 ;髓系列CD13 ,CD14 ,CD15 和CD33 ;巨核细胞标志CD41 和CD62 ;干/ 组细胞标志CD34 ,CD38 和HLA2DR。
结 果
例1 , 形态学和细胞化学:患者骨髓原始细胞明显增多,细胞分布较为均匀,蓝细胞少。细胞形态像淋系,胞体较小,呈圆形,染色质粗网状,核仁大而明显,1 - 2 个,胞浆量较为丰富,灰蓝色,无颗粒。组织化学检查: POX ( - ) ,NSE ( + ) ,NAP ( - ) , PAS( + ) 形态上显示细颗粒(附表) 。患者抗体阳性细胞CD34 : 87. 6 %; CD38 : 99. 6 %; CD33 : 95. 7 %;CD13 :93. 2 %; CD41 :0. 8 %; MPO :8. 5 %; CD3 和CD5 及CD10 ,CD19 ,CD20 和CD22 均阴性。例2 , 形态学和细胞化学:患者原始细胞在形态学不易分类。细胞大,胞浆量多少不一,灰蓝色,核染色质较粗。可见核出芽现象,核仁大而明显,1 - 2个,部分有空泡。组织化学检查所见: POX ( - ) ,NSE( - ) ,NAP ( - ) , PAS ( + ) ,为细颗粒/ 粗颗粒。抗体阳性细胞: CD34 : 93. 3 %; CD38 : 20. 1 %;
CD33 :7619 %; CD13 :64. 3 %; CD41 :3. 9 %; MPO :7. 4 %; CD3 ,CD5 ,CD7 ,CD10 ,CD19 ,CD20 和CD22均阴性。
讨 论
AML2Mo 是一组少见的急性髓系白血病。一般肝、脾、淋巴结肿大不明显,皮下出血少见。多数病人血像表现为白细胞、血小板减少。其细胞形态按FAB标准难于明确归类,仅凭形态学诊断AML2Mo 是困难的,免疫学分型和组织化学在诊断中起重要作用1987 年首次提出AML2Mo 的诊断条件,1991 年被FAB 协作组分型列入。骨髓中原始细胞1 型+ 2 型在非红系细胞中> 90 % ,形态学不符合FAB 分型中任何一型,无Auer 小体。常规细胞化学染色: POX和SBB 阴性或阳性率< 3 % ,PAS 和NSE 阴性或弱阳性。免疫表型无淋系分化抗原,而髓系分化抗原CD13 ,CD14 ,CD15 和CD33 至少一种阳性,或超微结构髓过氧化物酶(MPO) 阳性,血小板过氧化物酶性。
本报告2 例患者表型表现CD33 ,CD13 ,CD34和CD38 阳性,说明有相应的细胞谱系特异标志的显著表达,是诊断AML2Mo 的重要依据。髓系造血祖细胞标志CD34/ CD38 阳性表达,可排除淋巴瘤和幼淋巴细胞,提高AML2Mo 诊断率; CD3/ CD5/CD10/ CD19/ CS20/CD22 阴性,可排除ALL 。例1患者CD7 阳性, 说明白血病细胞的异质性高;CD14/ CD41 阳性细胞< 20 % ,可除外巨核系、单核系白血病;2 例患者MPO 均表达弱阳性。白细胞分化抗原基本上分为两大类,细胞谱系特异性抗原和分化阶段相关抗原,对于一个细胞,确定了这两种抗原的组成也就确定了它的系属性和分化程度。这些抗原的表达比较复杂,在胞膜、胞浆和胞核可有多种抗原,随细胞分化而先后表达,又可能相继消失。故需用多个McAb 联合检测,综合分析,方可作出正确的免疫分型诊断。组织化学检查:NSE染色阳性率
Table The histochemical examination for two cases of less2differentiated acute myeloid leukemia(略) Note : ※fine particles , ※※fine/ coarse particles
低,阳性物以稀散的弥散状为主,说明AML2Mo 细胞虽分化不好,部分细胞NSE 已形成,呈弱阳性反应,但没有特异性;AML2Mo 患者PAS 染色呈细颗粒,粗颗粒或珠状,表现阳性,在许多细颗粒、中颗粒弥散分布的基础上可见珠状和块状物阳性,与ALL阳性物颗粒量少而粗大、干净、清晰,在呈珠状和块状时很少有细小颗粒是不同的。作为与其它急性白血病鉴别诊断的依据之一,POX( - ) ,NAP( -) 对诊断和鉴别诊断AML2Mo 有重要意义。
迄今为止,形态学分析仍是白血病诊断和分类的基础。
在下列情况,形态学分析明显受到限制:①形态学和细胞化学染色不能确定白血病细胞分类系列; ②急性混合型白血病; ③态学上为ALL ,但缺乏淋系特异的抗原表达; ④白血病细胞表面抗原已发生改变,而形态学尚未见改变; ⑤T 和B 淋巴细胞白血病的分型。免疫学分型是区分白血病类型的重要手段,尤其在形态学无法作出正确判断时,对最后的确诊起关键作用。有时也因免疫标志交叉表达和特异性不强,而增加了诊断的困难。白血病细胞免疫学表型所反映的细胞分化水平,与FAB 细胞形态学分类有一定相关性,但二者又可能不完全一致。免疫学表型检测为传统的白血病细胞形态学、细胞组织化学染色提供了更多的信息。
最好去医院看看
4、T型急淋高危是否必须骨髓移植?【T型急淋高危】
从您提供的资料看，似乎染色体检查结果t(9;22)(q34;q11)和融合基因检查结果不太一致。如果融合基因也有bcr/abl阳性，那是建议做骨髓移植的。
（郑胡镛大夫郑重提醒：因不能面诊患者，无法全面了解病情，以上建议仅供参考，具体诊疗请一定到医院在医生指导下进行！）
北京儿童医院郑胡镛 http://zhenghuyong.haodf.com/
5、白血病需要做的检查项目有哪些
在确诊白血病之前，肯定是要做各项正规的检查的。需要做的检查项目有血常规、骨髓涂片、血涂片等，通过这些检查结果往往可以发现病人是不是已经得上了白血病。白血病具体检查项目专家介绍如下：1、血常规。血常规是平时我们经常做的一种检查，非常普通。看血常规化验，最主要看三个指标——白细胞计数、血红蛋白和血小板计数。一般白血病患者都会存在血常规指标异常。2、骨髓涂片。白血病的发病就是因为骨髓等的造血功能出现了问题，所以骨髓涂片是诊断白血病的主要依据。因此对于白血病患者，骨髓涂片检查是必不可少的。原理很简单，就是取0.5ml骨髓涂在玻璃片上，然后在显微镜下进行分析。骨穿在门诊就可以实施，并不影响日常生活。3、血涂片。血涂片也是经常做的一项检查，它的检查原理同骨髓涂片类似。不是所有白血病患者此项检查都是异常的。那为什么还要做呢?因其快捷、方便，可以让医生在第一时间就能判断疾病的大概种类，作出治疗、处理的决定。以上就是经常被大夫采用的几种白血病的检查项目，病人如果被大夫怀疑有患白血病的可能性，大夫就会让病人进行这些相关的检查。在检查的结果出来之后，病人应该问清楚自己的疾病的情况，最好是了解上面的各项数据的含义。
6、免疫分型CD系列-MDS/MPN是检查什么的？结果怎么样？
因为具有骨髓增生异常综合征mds的特点病态造血，又同时具有骨髓增殖性肿瘤mpn的特点外周血一到两系细胞增多而得名
7、骨髓报告如何看（ 流线细胞仪免疫分型分析 ）
白血病细胞可能分几群，R1群百分比高，根据白细胞表面抗原表达的不同分析，应该是淋系白血病。
8、我小孩是30号做的骨髓穿刺，做免疫分型，染色体检查等三个项目。国庆放假等8天骨髓血才做检查，行不行啊
骨髓染色体检查最好当天做。放假加班也得做！你需要到一个有做染色体的医院，负责任的医院。
9、白血病为什么能把人体多个部位的造血骨髓全部破坏了
急性髓系白血病（AML）相对于急性淋巴系（ALL）治愈率要高一些。白血病患者在接受骨髓移植后总体治愈率在40%，这个指标和年龄、病程还有免疫分型有密切知的关系。 约有12.5%的人会在移植过程中死亡，原因有感染、急性肝梗死、道排异反应等等。顺利出舱的病人，大约有50%会复发，因此治愈率在40%上下。AML系列的白血病人要好一些。关于预后的指标太专业，在这里公布楼主恐怕看了也头大。另外白血病患者需要在治疗后5年不复发才能宣布版治愈，复发率和生存时间成反比。这里指的5年在医学界市有争议的，一部权分医生认为是从缓解开始计算，而另一部分医生则认为应该用停止一切治疗开始。 骨髓移植的病人在出舱后的三个月相当关键，出舱后1年没有复发，那么复发的几率就很小了