骨髓提取

1、请问如何提取造血干细胞？

造血干细胞存在于骨头里，传统方式是用骨腔穿刺采集，现在则多通过注射动员剂，把骨腔里的造血干细胞释放出来进入血管，通过机器把造血干细胞从血液中分离出来。
在手术前，一般不采取先采集造血干细胞，因为操作复杂、费用更高。如果先采集，长期保存等待手术，就要把细胞放在液氮里面，由常温37摄氏度变为零下196摄氏度，使用时再恢复到常温。在这个过程中，细胞很容易失活，影响疗效。

干细胞是一种嗜碱性独核细胞，其大小约为8μm，呈圆形，胞核为圆形或肾形，胞核较大，具有2个核仁，染色质细质而分散，胞浆呈浅蓝色不带颗粒，在形态上与小淋巴细胞极其相似，但淋巴细胞体积较小，染色质浓染，核仁不明显且有细胞器。
造血干细胞（ Stem cell ，SC）是指骨髓中的干细胞，它具有自我更新能力并能分化为各种血细胞前体细胞，最终生成各种血细胞成分，包括红细胞、白细胞和血小板，它们也可以分化成各种其他细胞。造血干细胞包括三级分化水平，即多能干细胞（pleuripotent　stemcell），定向干细胞（Committedstem　cell）及成熟的子代细胞。造血干细胞的两个重要特征是，可分化成所有类型的血细胞和高度的自我更新或自我复制能力。
造血干细胞的移植是治疗血液系统疾病、先天性遗传疾病以及多发性转移性肿瘤疾病的最有效方法。与骨髓移植和外周血干细胞移植相比，造血干细胞移植的长处在于无来源的限制，对HLA配型要求不高，不易受病毒或肿瘤的污染。并且捐献造血干细胞对捐献者的身体并无很大伤害。

2、牛骨髓是怎么提取出来的

1、牛骨髓提取方法：
选完整的脊椎骨,在醋里轻浸以下10分钟左右,在清水中洗净,切成你想要的几段长,再沸水中轻煮以下,就能顺利取出骨髓,再切除两端.就是你想要的。
2、牛骨髓，药剂，为牛科动物黄牛或水牛的骨髓。高蛋白、低脂肪及含优质有机钙的富营养原料，很多壮骨粉、补钙产品所用原料就是来自牛骨髓。

3、如何提取造血干细胞？

传统方式是:

用骨腔穿刺采集，现在则多通过注射动员剂，把骨腔里的造血干细胞释放出来进入血管，通过机器把造血干细胞从血液中分离出来。

4、如何提取小鼠骨髓细胞?

1、颈椎脱臼法处死小鼠(C57型小鼠)，放在75%酒精中侵泡3-5分钟后，拎出后将小鼠铺于超净台上一个消毒托盘上。
2、无菌提取小鼠的四肢骨，用眼科镊小心捏起小鼠两髋关节之间的腹部皮肤，用眼科剪小心剪开皮肤，并分离两下肢的皮肤，往下在脚踝处剪断，往上在髋关节处剪断，这样可以游离出小鼠的两条下肢。
3、小心剥离肌肉，分别剪下Femurs（大腿骨）and Tibias（胫骨）,剪去两端软骨，露出红色的骨髓腔。注意尽可能少的剪走骨髓腔。用纱布将骨头上的肌肉用纱布擦拭干净。
4、拿一支1ml的无菌注射器，每支吸取1mlHBSS液，并用无菌的针头套管将之轻轻拧弯。轻轻插入骨髓腔，冲洗骨髓腔以获得骨髓，一般用2-3ml培养基冲洗两次，可冲出绝大部分细胞。
5、过滤：用2OO目的滤网过滤，将滤网的中央插入到离心管里面25px处，然后用注射器吸取骨髓液，慢慢将骨髓液经滤网注入离心管中，去除残渣。
6、离心：将离心管放置离心机中离心10分钟（1350r/min）
7、去上清，加入1ml红细胞裂解液ACK，静置3分钟，再加9ml HBSS溶液，进行离心10分钟，弃上清。
8、用HBSS液洗涤骨髓细胞2次，室温，1350r/min离心10分钟。计数活细胞，用培养基调整细胞浓度至1X106个细胞/ml.
9、在试管中加入RPMI-1640培养基，然后再加入20ng/ml的细胞因子GM-CSF、5%FBS、0.1%的2-巯基乙醇，
10、吸取培养基加入到沉淀中混匀，24孔板铺板培养，每个孔1ml.

5、骨髓是从血液里提取的,还是从骨骼里提取的?

骨髓是人体的造血组织，位于身体的许多骨骼内。

成年人的骨髓分两种：红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用，白细胞能杀灭与抑制各种病原体，包括细菌、病毒等；某些淋巴细胞能制造抗体。因此，骨髓不但是造血器官，它还是重要的免疫器官。黄骨髓主要是脂肪组织，当人体贫血时，它可以转化为红骨髓。有些药物如氯霉素及呋喃类,在长期大量使用后,可影响骨髓造血功能,引起再生障碍性贫血.

充填在骨髓腔和骨松质的间隙内，分为红骨髓和黄骨髓两类，红骨髓内涵不同发育阶段的红细胞和某些白细胞及脂肪组织。

骨髓

①藏于骨腔中的髓质。《素问·平人气象论》：“脏真下于肾，肾藏骨髓之气也。”
②指病在骨髓，喻疾病部位较深。《灵枢·寒热病》：“络脉治皮肤，……经脉治骨髓、五脏。”

什么是骨髓

骨髓是存在于长骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔，扁平骨（如髂骨、肋骨）和不规则骨（胸骨、脊椎骨等）的松质骨间网眼中的一种海绵状的组织，能产生血细胞的骨髓略呈红色，称为红骨髓。成人的一些骨髓腔中的骨髓含有很多脂肪细胞，呈黄色，且不能产生血细胞，称为黄骨髓。人出生时，全身骨髓腔内充满红骨髓，随着年龄增长，骨髓中脂肪细胞增多，相当部分红骨髓被黄骨髓取代，最后几乎只有扁平骨松质骨中有红骨髓。此种变化可能是由于成人不需全部骨髓腔造血，部分骨髓腔造血已足够补充所需血细胞。当机体严重缺血时，部分黄骨髓可转变为红骨髓，重新恢复造血的能力。

骨髓有什么作用

人体内的血液成分处于一种不断的新陈代谢中，老的细胞被清除，生成新的细胞，骨髓的重要功能就是产生生成各种细胞的干细胞，这些干细胞通过分化再生成各种血细胞如红细胞、白细胞、血小板、淋巴细胞等，简单的说骨髓的作用就是造血功能。因此，骨髓对于维持机体的生命和免疫力非常重要。

6、单克隆抗体中的骨髓瘤细胞从哪里提取?是不是在提取小鼠的免疫细胞的胰脏中？

不是提取小鼠胰脏中免疫细胞。是从骨髓中提取癌变的细胞，这类细胞具有永生性，骨髓瘤细胞在体外培养条件下无限增殖，但不能产生抗体。B淋巴细胞能产生抗体，不能在体外增殖。二者融合以后就能无限增殖又能产生抗体。

7、骨髓的基因组提取可以用提取血液基因组的试剂盒吗

这个好像不可以，因为它们的成分不同，你需要查一下相关的资料的。具体的步骤可以参考下面的：1.根据白细胞计数(个体每个细胞约含6pg基因组DNA，要获得30L gDNA 约需5×106个白细胞):取外周血5～30ml或骨髓1～6ml，加入0.1体积的2%EDTA， pH7.4，混匀。  2.抗凝血和骨髓于1500r/min离心10分钟，去上层血浆。 3.加入2倍体积的红细胞裂解液， 颠倒离心管使其混匀，于1500r/min 离心10分钟，弃去含Hb的上清，再加入5～10ml 红细胞裂解液， 同样混匀、离心、弃上清。  4.加入10ml PBS重悬白细胞沉淀，于1500r/min离心10分钟。弃上清。  5.加入2ml TES溶液重悬白细胞沉淀。  6.吸取白细胞液加入6ml DNA提取缓冲液中，边加边混匀。 7.加入蛋白酶K至终浓度为100～200mg/L，于37℃消化过夜或45～55℃消化3～4小时，其间振摇几次。  8.加入等体积饱和酚抽提，来回颠倒离心管并适当振摇以使其混匀，如太粘稠可追加适量TES溶液，于3500r/min离心10分钟， 吸取含DNA的水相至另一离心管。  9.加入等体积酚/氯仿/异戊醇(25∶24∶1) ，同上混匀，于2500r/min离心5～10分钟，余同上一步骤，可重复1～3次。10.加入等体积氯仿/异戊醇，混匀，2500r/min 离心5分钟， 吸取水相DNA至小烧杯中；加入0.2体积的10mol/L醋酸铵， 混匀；加入2倍体积无水乙醇，混匀；DNA自然沉淀出来，倒去液体。  11.加入10～20ml  70%乙醇洗DNA， 重复1～2次，每次均倒去液体，让DNA小块于室温干燥， 但不可过度干燥，以防其难于溶解。  12.加入1～10ml TE， pH8.0， 于室温或55℃水浴溶解DNA；再加入0.5体积7.5mmol/L醋酸铵， pH7.5，混匀；加入2倍体积无水乙醇， 混匀；沉淀DNA后倒去液体， 同样用70%乙醇洗DNA 2～3次， 再使DNA小块干燥。  13.用适量TE，pH8.0， 溶解DNA， 浓度以0.4～0.6g/L (ug/uL)为宜，于4℃保存。

8、骨髓如何抽取？

朋友，详细介绍给你了， 1．骨髓是人体的造血组织，位于人体许多骨骼内．成年人的骨髓分两种：红骨髓和黄骨髓．红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞．血小板有止血作用，白细胞能杀灭与抑制各种病原体，抱括细菌、病毒等；某些淋巴细胞能制造抗体。因此，骨髓不但是制血器官，它还是重要的免疫器官。黄骨髓主要是脂肪组织，当人体贫血时，它可以转化为红骨髓。 2．捐献骨髓会不会影响捐献者的身体健康？ 捐款骨髓不会影响人的健康。许多人认为捐献骨髓是抽取脊髓，这完全是一种误解。骨髓移植是需要人体内的红骨髓——造血干细胞。一个成年人的造血干细胞是3公斤，一名捐献者提拱不到10克的骨髓干细胞就能救活一名白血患者、因此不会减尽弱其免疫能力和造血能力。骨髓是在生能力很强的组织，对于健康捐献者，会在10天左右即可补足所捐献的干细胞量。 3．健康者在什么年龄段适合捐献骨髓？ 健康者在18～55岁均可捐献骨髓。 4．什么是骨髓移植？ 骨髓移植是指把骨髓中的造血干细胞从一个人体内移植到另一个人体内（一般是通过静脉输入）。确切地说，骨髓移植就是造血干细胞的移植。 5．什么人需要进行骨髓移植？ 人体血液系统及免疫系统的严重疾病，如白血病（俗称血癌）。淋巴瘤、再生障碍性贫血地中海贫血、重病放射病患者，继续生存的希望就是骨髓移植。我国每年约400万名各类疾病的患者等待着骨髓移植。 除了对捐献者的休重、血压等身体健康程度和献血条件一样外，捐献骨髓者一般要求在18周岁以上、45周岁以下，最好有献血或捐献血小板的经历，一旦抽样，配对也要求是身体、心理等都较成熟者，以便于救治患者，从严格意义上来说，捐髓实际上是捐献造血干细胞，一次性捐献量约20克左右，对身体没有影响，市民可在义务献血的同时填写一张自愿捐髓表，这样医院将有关资料输入信息库后，可随时约请志愿者救死扶伤。 样捐献骨髓 1.如何成为志愿捐献者？ 如果您年龄在18至55岁之间、身体健康，可拨打中华骨髓库骨髓捐献热线电话：（北京）010－65126600，（上海）021－62478117，或到区县级以上红十字会报名，并填写志愿捐献书及有关表格。 2.捐献骨髓有哪些步骤？ 1）报名后，骨髓库或红十字会安排您验血5毫升，并将化验的HLA分型结果储存在中国造血干细胞捐献者资料库中，供患者寻找配对。 2）供者与受者初步配型相同，骨髓库的工作人员会向您详细介绍捐献过程，同时请您接受全身检查。 3.如何抽取骨髓？ 抽取骨髓造血干细胞有两种方法：一是医生在供者的髂骨部位穿刺采集骨髓中的造血干细胞，术后一两天内有些疼痛，一周内就可完全恢复。二是用科学的方法有效地动员骨髓和其他部位的造血干细胞大量释放到外周血液中去，从供者的手臂静脉中采集，并通过机器将造血干细胞分离出来，剩余的血液回输到供者体内。 4.捐献骨髓会不会影响身体健康？ 许多人认为捐献骨髓是抽取脊髓，这完全是一种误解。骨髓移植需要的是人体内的红骨髓——造血干细胞。一个成年人的骨髓重量为3公斤，一名供髓者提供不足10克的骨髓造血干细胞就能挽救一名白血病患者的生命。骨髓是再生能力很强的组织，一般健康者捐献造血干细胞后在十天左右即可补足所捐的干细胞量。因此，捐献骨髓不会影响人的身体健康。

9、干细胞是从自己身上提取的吗？

有的是从自体脂肪，慢生命是通过异体来源于新生儿脐带组织或者脐血