1、小鼠骨髓细胞染色体标本制备和观察实验报告
首先要提前2小时向小鼠注射秋水仙素,处死小鼠,剪下四肢,剔除肉等,剪碎骨,加生理盐水,离心取细胞(离心管底部),再经低渗处理,染色,滴冰片,镜检。很麻烦,具体的你可以去图书馆查阅相关资料(动物染色体制备)。
2、在骨髓染色体标本制备实验中,低渗的作用是什么?
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3、植物染色体标本的制备的注意事项
植物染色体制片技术是植物细胞遗传学、染色体工程、植物细胞生物学、植物细胞分类学和物种生物学等众多学科的基本实验技术。植物染色体的研究由于和植物遗传育种工作的结合而获得良好的发展。因此,植物染色体的技术在这些研究工作中具有特别重要的意义[1-3]。Belling(1921)提出染色体压片技术后,植物压片已成为植物染色体研究中广泛应用的常规技术[1]。但是由于植物细胞有很坚实的细胞壁,染色体很难像动物染色体那样平整地贴在载玻片上。陈瑞阳(1982)提出了植物染色体标本制备的酶解去壁低渗法。本文以韭兰为材料,对植物染色体常规压片,去壁低渗法制片技术、染色效果进行了比较,以期在不同的材料及条件下选择适宜的染色体制片技术,从而获得较好的效果。
1 材料与方法
1.1 供试材料 试验用植株由校园内采集。
1.2 根尖制片
1.2.1 常规压片 通常是在早上9-10点采集葱兰的根然后在室温下放入0.1%秋水仙素溶液中进行预处理处理8 h。然后就在常温把材料放在卡诺氏固定液下固定10m,接下来就在1 mol/L盐酸溶液中解离到松软刚合适为止。最后是用蒸馏水将葱兰根冲洗干净,这样前处理就结束。处理完后就可以用醋酸洋红染色或改良苯酚品红染色[4]。压片/涂片后选取典型的染色体,在40倍物镜及油镜下显微照相。
1.2.2 去壁低渗法 去壁低渗法也是把材料放0.1%秋水仙素溶液中进行预处理处理8 h。然后前低渗即是将根尖放在0.075 tool/L KCI低渗液中,在20~25℃条件下处理0.5h。接下来就是最关键的去壁,倒去KCI溶液,加入2.5%混合酶液,在25~30℃温度下处理2~5 h左右。去壁后要进行后低渗,使细胞完全胀,即是用20~30℃蒸馏水慢慢冲洗2~3次后,再将根尖放在0.075 tool/L KCI低渗液中处理。
4、骨髓细胞染色体标本制备时,冰片滴片时滴液高度有什么要求
20cm以上(医学仿真实验答案
5、小白鼠细胞染色体标本为什么要选择骨髓细胞
主要是因为小白鼠骨髓细胞染色体都为近端着丝粒染色体!在显微镜的观察下呈现U型或者V型!
6、小鼠骨髓细胞染色实验中有哪些材料可用作制备染色标本,其基本特性是什么
在明视野下,若能看清的话就不要染色了。因为在无法观测清楚时,才会染色。通常染色剂会影响微生物的活性,更多的是使细胞死亡。即使是活性染料也有一定的影响。 根据经验 不染色完全可以看见显微结构 细胞膜 细胞壁 液泡 核 基本可以看见 叶绿体隐约可以看见 当然分辨率和光圈大小需要调整到最佳状态 鞭毛可以隐约看见 霉菌放线菌细菌的形态当然是不染色完全可以看 如果想看更细致些 比如线粒体 高尔基体 核膜 微囊体 膜泡等亚显微结构 需要用特定的分子染料进行染色再进行观察 如果你不需要做活体实验而只是观察的话,染色吧,清晰度好一些。
7、制备良好的动物染色体标本应注意哪些问题?为什么?
1)动物的选择抄,一般用小鼠袭,其繁殖能力强,易于饲养.我们常用的是它们的骨髓细胞和精巢,因其分裂指数较高,不用体外培养就可以得到分裂中期的细胞.
2)秋水仙素用量要注意,太多或处理时间过长,会导致染色体的过分凝缩或着丝点裂解,最终会引起染色体形态不正常,甚至被破坏或溶解。
3) 低渗处理很关键。低渗液的量、处理时间均与细胞的数量有关。低渗过度,细胞会破裂;低渗不足则染色体在一起,分散不开。
4) 离心速度或离心时间也能影响染色体标本的制备。离心速度过大或离心时间过长,则会引起细胞破裂;反之,离心速度过小或离心时间过短,则细胞沉降不下来,则会引起大量细胞的丢失。
5) 固定液要随用随配,固定彻底后再打散细胞团块,否则细胞容易破碎,染色体分散亦受到影响。
6) 载玻片要预冷.冷却不够,则会影响染色体的附着和铺展。
7) 用吸管吹散细胞时用力必须尽量轻柔,用力过大则会造成细胞破裂,而染色体也会弥散在溶液中,在随后的离心中将会丢失。
8) 滴片时的高度很重要,高度过低细胞不会破裂;过高则染色体过于分散甚至丢失,无法辨别出染色体的准确数量。
8、制备骨髓细胞染色体标本是怎样的
因为在之前你得到的染色体都处于不同的分裂期,预固定是为了使这些细胞及其染色体都固定在当前所处的时期,便于观察。
9、小鼠骨髓细胞的染色体标本一般制备成什么片
小鼠骨髓细胞的染色体标本一般制备成什么片
首先要提前2小时向小鼠注射秋水仙素,处死小鼠,剪下四肢,剔除肉等,剪碎骨,加生理盐水,离心取细胞(离心管底部),再经低渗处理,染色,滴冰片,镜检.很麻烦,具体的你可以去图书馆查阅相关资料(动物染色体制备).
10、制备小鼠骨髓染色体标本过程中有哪几个主要步骤影响制片结果
在制备小鼠骨髓细胞染色体标本过程中以下几个步骤需要注意:
提前3-4小时候注射秋水仙素,时间太长或者太短都会影响染色体中期的数目和形态。
在低渗过程中时间和吹打都很重要,低渗过度染色体膨胀,染色后肥肥的,低渗时间不过染色后染色体颜色很深看不出条带。
滴片,如果是教学的实验,要求玻片是冰的,而且要倾斜,滴的高度一般在25-30CM,滴完要过酒精灯,让固定液蒸发。滴的数量不要太多否则会重叠.如果是医院里的染色体制片有专门的滴片机。
小鼠骨髓细胞染色体标本制作:
原理:
由于小鼠四肢骨内骨髓细胞中的造血干细胞是生成各种血细胞和原始细胞,具有高度的分裂能力,本实验采用这一材料,通过前处理,低渗,固定,制片,染色等步骤制得染色体标本,可观察到许多处于分裂中期的染色体,可以进行染色体组型分析;
试剂、试剂盒:秋水仙素、姬姆萨染液、固定液、低渗液、生理盐水;
仪器、耗材:天平、离心机、恒温培养箱、显微镜;
实验步骤
一、材料和方法
1. 材料:小白鼠。
2. 设备:天平,离心机,恒温培养箱,显微镜。
3. 药品:秋水仙素,姬姆萨染液,固定液,低渗液,生理盐水。
二、步骤
秋水仙素处理--取骨髓--低渗处理--固定--离心--再固定--再离心--滴片--染色--镜检--封片。