1、骨髓细胞培养,有哪些细胞是贴壁的
而不是有些人说的。 而有些细胞可以悬浮生长这是由细胞的性质特点决定的。 有些细胞是必须要附着在支持物上才可以生长的。 这些细胞的生长都是需要添加血清的,比如肝细胞,胃上皮细胞等等,比如骨髓细胞白,血病细胞等等,加入血清后会贴壁
2、如何提取小鼠骨髓细胞?
1、颈椎脱臼法处死小鼠(C57型小鼠),放在75%酒精中侵泡3-5分钟后,拎出后将小鼠铺于超净台上一个消毒托盘上。
2、无菌提取小鼠的四肢骨,用眼科镊小心捏起小鼠两髋关节之间的腹部皮肤,用眼科剪小心剪开皮肤,并分离两下肢的皮肤,往下在脚踝处剪断,往上在髋关节处剪断,这样可以游离出小鼠的两条下肢。
3、小心剥离肌肉,分别剪下Femurs(大腿骨)and Tibias(胫骨),剪去两端软骨,露出红色的骨髓腔。注意尽可能少的剪走骨髓腔。用纱布将骨头上的肌肉用纱布擦拭干净。
4、拿一支1ml的无菌注射器,每支吸取1mlHBSS液,并用无菌的针头套管将之轻轻拧弯。轻轻插入骨髓腔,冲洗骨髓腔以获得骨髓,一般用2-3ml培养基冲洗两次,可冲出绝大部分细胞。
5、过滤:用2OO目的滤网过滤,将滤网的中央插入到离心管里面25px处,然后用注射器吸取骨髓液,慢慢将骨髓液经滤网注入离心管中,去除残渣。
6、离心:将离心管放置离心机中离心10分钟(1350r/min)
7、去上清,加入1ml红细胞裂解液ACK,静置3分钟,再加9ml HBSS溶液,进行离心10分钟,弃上清。
8、用HBSS液洗涤骨髓细胞2次,室温,1350r/min离心10分钟。计数活细胞,用培养基调整细胞浓度至1X106个细胞/ml.
9、在试管中加入RPMI-1640培养基,然后再加入20ng/ml的细胞因子GM-CSF、5%FBS、0.1%的2-巯基乙醇,
10、吸取培养基加入到沉淀中混匀,24孔板铺板培养,每个孔1ml.
3、大鼠骨髓来源巨噬细胞原代培养需要贴壁2个小时就换液吗
大鼠骨髓来源巨噬细胞原代培养需要贴壁2个小时就换液
系统名称应明确标明:酶的底物及所催化的反应性质.如果有两个底物都应写出,中间用冒号隔开.此外,底物的构型也应写出.
如谷丙转氨酶,其系统名称为L-丙氨酸:α-酮戊二酸氨基转移酶;
再例如对催化下列反应酶的命名.?
ATP+D-葡萄糖→ADP+D-葡萄糖-6-磷酸
该酶的正式系统命名是:ATP:葡萄糖磷酸转移酶,表示该酶催化从ATP中转移一个磷酸到葡萄糖分子上的反应.它的分类数字是:E.C.2.7.1.1,E.C代表按国际酶学委员会规定的命名,第1个数字(2)代表酶的分类名称(转移酶类),第2个数字(7)代表亚类(磷酸转移酶类),第3个数字(1)代表亚亚类(以羟基作为受体的磷酸转移酶类),第4个数字(1)代表该酶在亚-亚类中的排号(D葡萄糖作为磷酸基的受体).
如果其中一个底物是水,可以省去不写,如D-葡萄糖-δ-内酯水解酶,不必写成D-葡萄糖-δ-内酯:水水解酶.
4、骨髓细胞有哪些可以培养的细胞系
那就多了,大多数恶性血液病癌细胞都算。细胞系(cell line)指原代细胞培养物经首次传代成功后所繁殖的细胞群体。 也指可长期连续传代的培养细胞。(由此便引申出了后来的有限细胞系(FiniteCellLine)、无限细胞系(InfiniteCellLine)),因此,细胞系狭义的是指可连续传代的细胞(特定环境下口语和书面语都使用),广义是指可传代的细胞
中文名称:细胞系
外文名称:cell line
经过40-50次分裂的渡过第二次死亡危机的细胞,称之为细胞系。如细胞系的生存期有限,则称之为有限细胞系(FiniteCellLine);已获无限繁殖能力的细胞系,称连续或无限细胞系(InfiniteCellLine)。无限细胞系大多已发生异倍化,具异倍体核型,可能成为恶性细胞,因此本质上已是发生转化的细胞系。无限细胞系有永生性(不死性),但仍保留接触抑制和无异体接种致死;有的有永生性,异体接种有致瘤性,说明已恶性化。由某一细胞系分离出来的、在性状上与原细胞系不同的细胞系,称亚系(Subline)。
5、骨髓基质细胞原代培养好做吗
原代细胞(primarycell)是指从机体的组织(如人组织、小鼠组织、大鼠组织和兔组织等)经蛋白酶或其它的方法获得单个细胞并在体外进行模拟机体培养的细胞,称为原代细胞。一般认为,培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。在人工条件下使其原代细胞生存、生长、繁殖和传代,进行细胞生命过程、细胞癌变、细胞工程等问题的研究。细胞株(cellstrain)是通过选择法或克隆形成法从原代培养细胞中获得具有特殊性质或标志物的细胞称为细胞株。一般认为,细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。细胞系(cellline)是原代细胞经首次传代成功后即为细胞系。泛指一般可能传代的细胞。其中能够连续传代的细胞叫做连续细胞系或无限细胞系,不能连续培养的称为有限细胞系。大多数二倍体细胞为有限细胞系。由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代,或传代次数有限,可称为有限细胞系(finitecellline),如可以连续培养,则称为连续细胞系(continuouscellline),培养50代以上并无限培养下去。人类肿瘤细胞,在体外培养半年以上,生长稳定,并连续传代的即可称为连续性株或系。
6、骨髓瘤细胞与进行原代培养的细胞相比,该物质发生的主要变化是
骨髓瘤细胞具有无限增殖的特点,原代培养细胞经反复传代后,也可转变为回瘤细胞或永答久细胞,骨髓瘤细胞和原代培养细胞相比,主要变化在细胞核内的染色体上,骨髓瘤细胞之所以可以无限增殖,而不发生凋亡,主要是端粒酶的作用。
7、骨髓细胞经培养后是否能真的变成精子?
不可能 精子只能由精原细胞通过减数分裂产生的
8、临床:白血病。取材:骨髓。 方法:细胞培养+G显带。分析20个染色体分裂相:
这个报告结果的意思是:
染色体检查总共计数20个细胞分裂相,其中有14个分裂相结果是: 染色体总数46条,其中性染色体是XY,即男性同时未发现染色体异常。
另外6个分裂相是:染色体总数46,性染色体为XY,存在染色体异常,异常表现为: 9号染色体和17号染色体存在意味,即9号染色体和17号染色体相互交换了整条染色体臂并组成了新的稳定染色体。
综上,标本是由两种核型组成的嵌合体,且是平衡易位,可能在遗传中不会造成致死性死胎,流产之类,但是有可能产生具有家族种质性的肿瘤,因为这个核型是能稳定遗传的,而且不会产生致死性畸变。建议对整个家族进行筛查,以先证者为起点,对家系进行研究,可以确定肿瘤和一行核型的联系。