1、若要制备杂交瘤细胞，需取免疫后小鼠的B淋巴细胞（染色体数目40条），
杂交瘤细胞中有一个细胞核，染色体数目最多是100条。如果写200条也合理。
有丝分裂后期，着丝点断裂后，染色体数目加倍到200条。
2、穿心连对血小板生成有负作用吗
查来的：粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、粒／巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)等造血因子的应用，严重的粒细胞减少得以改善，而因血小板减少导致的出血则成为一直困扰临床医生的一个难题。血小板减少，严重地限制了临床上放、化疗的治疗剂量，从而影响了一些对放、化疗敏感的肿瘤的治疗效果。虽然输注新鲜浓集血小板悬液可以减少严重出血的危险，但也不可避免地增加了血源性感染、发热反应和产生输血相关的抗血小板抗体的概率，而且输注血小板费用昂贵，因此通过骨髓巨核细胞生成的刺激可能更是一个合理的选择。1994年血小板生成素(ThrombopoietinTPO)被克隆纯化成功，TPO作为一种特异性的细胞因子，已被证实是一种巨核细胞生成和血小板生成的刺激和调节因子，TPO在体外可以刺激巨核细胞克隆的生成，使巨核细胞分化标志物增多，在正常动物中应用TPO可以极大地增加循环血中血小板计数，同时使骨髓巨核细胞数目和体积增加。如何将TPO更有效地用于临床，国内外专家进行了多种偿试，积累了经验，但尚未有最后定论。本课题中我们通过放化疗造成骨髓受抑制、血小板减少的小鼠模型，之后在不同时间给予重组人血小板生成素()，通过观察小鼠血小板和骨髓巨核细胞数的变化情况，来研究rhTPO对放化疗后骨髓受抑制小鼠血小板以及骨髓巨核系统的刺激生成作用，并通过不同给药方式来比较治疗效果，以找出最佳给药方法。材料与方法采用动物试验方法，实验0天一次性给与Balb／C／J’鼠3．SGyX线照射及50mg／kg卡铂腹腔内注射制成骨髓受抑制、血小板减少模型，小鼠分为三个治疗组h＝10人采用放化疗前、后持续给药（Pre”OSt组X放化疗前给药（Pre组人放化疗后给药口OSt组）等三种不同给药方式，分别于实验一5－＋9天、－5——1天、门一门4天皮下注射rhTPO瞩0卜少kgl天人设对照组＊组，n习0L注射生理盐水。观察以下指标①血小板下降的最低值；②血小板持续低下时间t；（血小板小于基础值30％入③血小板恢复时间以血小板恢复至基础值50％八④小鼠胸骨骨髓病理，计数巨核细胞数（Mmm勺进而比较各治疗结果的差异。实验结果l一用药后血小板uLT）数量的变化：Pre”OSt组及Pre组自应用hTOP后第3天起，PLT开始升高，第6－7天达到高峰，平均值升高3－4倍。实验0天放化疗后，Pe／Post、Pre、PostJontrol四个组PLT开始有不同程度的下降，结果是：①PLT最低值分别为223。犯、1扬L28、217S30、77。二3（X10’／L）（与对照组相比P值均＜0．00l），②t；分别为l．7、3．3、l．5、6．5（天）（与对照组相比P值为＜o．OO二，＜o．05，＜O．00且）；③。为15、17．7上互．7、22（天）（与对照组相比P值为＜0．00，＜0．05，＜0．001）。2．骨髓巨核细胞计数：于实验第9＊天检测小鼠胸骨病理标本，结果第9天时Pre组及Pe／POSt组与对照组比较骨髓巨核细胞数明显升高u＜0．001人在第15天时POSt组骨髓巨核细胞数显示了明显升高的趋势。·2·讨论TPO是由332个氨基酸组成的糖蛋白，为原癌基因C－MPI的配体，主要产生于肝脏和肾脏。TPO的主要生物活性，也是最先发现的生物活性，是促进巨核细胞的成熟和血小板的生成，TPO作为一种造血细胞生长因子在正常动物中具有相对的谱系特异性，而对骨髓抑制的小鼠，TPO治疗不仅可以加速血小板的恢复，也可以加速红细胞和中性粒细胞的恢复。本研究给予小鼠一定剂量的放化疗造成小鼠骨髓抑制后，选择了三种不同的rhTPO给药方法实验。结果放化疗使对照组小鼠的血小板和白细胞迅速出现下降，分别于第9天和第11天降至最低，为基础值的10．4％和9．5％，分别经过22天和19．3天恢复到了基础值的50％（或以上人对照组的骨髓巨核细胞也在放化疗后受到明显的抑制。rhTPO治疗组显示了明显的升血小板的作用，与对照组相比在血小板下降最低值、血小板恢复速度等指标上均显示了较好的疗效，POSt组及Pre／Post组与对照组相比则差异显著。许多研究都证明了TPO的生血小板作用。Grossmann等以1－20KU门／鼠一9pyks）的不同剂量给正常小鼠连续注射7天治疗，在低剂量时表现出剂量依赖性的血小板增多，于第5天血小板数开始增加，8刁o天达到峰值。我们在实验中放化疗处理前给予rhTPO组也在5－7天内血小板数升高了3倍以上，显示了hO对正常小鼠明显升血小板作用。在对骨髓抑制小鼠的研究中Grossmann等用TPOSKU或的剂量治疗仍然得到了剂量依赖性模式的血小板计数的恢复，包括血小板最低点的升高和恢复的加快，但是各剂量之间的差异并不显著。Neelis等以5GyX线（亚致死量）照射恒河猴，使其骨髓造血抑制，在给予rhTPO门0pg／kg．d．二一Zld）治
3、小鼠骨髓瘤细胞与造血干细胞的染色体数目均可呈周期性变化吗
A、蛙的复红细胞进行无丝制分裂，无染色体出现；表皮细胞已高度分化，不再分裂，没有细胞周期，A错误；
B、由于小鼠骨髓瘤细胞与胚胎干细胞都能连续进行细胞分裂，具有细胞周期，所以两类细胞的染色体数目均可呈周期性变化，B正确；
C、牛的精细胞已经过减数分裂，不再分裂，没有细胞周期；精原细胞自身增殖时，进行有丝分裂，具有细胞周期，C错误；
D、人的胚胎干细胞能够进行连续的细胞分裂，具有细胞周期；人的成熟的红细胞不再分裂，没有染色体的出现，D错误．
故选：B．
4、如何取小鼠骨髓细胞
1、颈椎脱臼法处死小鼠(C57型小鼠)，放在75%酒精中侵泡3-5分钟后，拎出后将小鼠铺于超净台上一个消毒托盘上。
2、无菌提取小鼠的四肢骨，用眼科镊小心捏起小鼠两髋关节之间的腹部皮肤，用眼科剪小心剪开皮肤，并分离两下肢的皮肤，往下在脚踝处剪断，往上在髋关节处剪断，这样可以游离出小鼠的两条下肢。
3、小心剥离肌肉，分别剪下Femurs（大腿骨）and Tibias（胫骨）,剪去两端软骨，露出红色的骨髓腔。注意尽可能少的剪走骨髓腔。用纱布将骨头上的肌肉用纱布擦拭干净。
4、拿一支1ml的无菌注射器，每支吸取1mlHBSS液，并用无菌的针头套管将之轻轻拧弯。轻轻插入骨髓腔，冲洗骨髓腔以获得骨髓，一般用2-3ml培养基冲洗两次，可冲出绝大部分细胞。
5、过滤：用2OO目的滤网过滤，将滤网的中央插入到离心管里面25px处，然后用注射器吸取骨髓液，慢慢将骨髓液经滤网注入离心管中，去除残渣。
6、离心：将离心管放置离心机中离心10分钟（1350r/min）
7、去上清，加入1ml红细胞裂解液ACK，静置3分钟，再加9ml HBSS溶液，进行离心10分钟，弃上清。
8、用HBSS液洗涤骨髓细胞2次，室温，1350r/min离心10分钟。计数活细胞，用培养基调整细胞浓度至1X106个细胞/ml.
9、在试管中加入RPMI-1640培养基，然后再加入20ng/ml的细胞因子GM-CSF、5%FBS、0.1%的2-巯基乙醇，
10、吸取培养基加入到沉淀中混匀，24孔板铺板培养，每个孔1ml.
5、如何提取小鼠骨髓细胞?
1、颈椎脱臼法处死小鼠(C57型小鼠)，放在75%酒精中侵泡3-5分钟后，拎出后将小鼠铺于超净台上一个消毒托盘上。
2、无菌提取小鼠的四肢骨，用眼科镊小心捏起小鼠两髋关节之间的腹部皮肤，用眼科剪小心剪开皮肤，并分离两下肢的皮肤，往下在脚踝处剪断，往上在髋关节处剪断，这样可以游离出小鼠的两条下肢。
3、小心剥离肌肉，分别剪下Femurs（大腿骨）and Tibias（胫骨）,剪去两端软骨，露出红色的骨髓腔。注意尽可能少的剪走骨髓腔。用纱布将骨头上的肌肉用纱布擦拭干净。
4、拿一支1ml的无菌注射器，每支吸取1mlHBSS液，并用无菌的针头套管将之轻轻拧弯。轻轻插入骨髓腔，冲洗骨髓腔以获得骨髓，一般用2-3ml培养基冲洗两次，可冲出绝大部分细胞。
5、过滤：用2OO目的滤网过滤，将滤网的中央插入到离心管里面25px处，然后用注射器吸取骨髓液，慢慢将骨髓液经滤网注入离心管中，去除残渣。
6、离心：将离心管放置离心机中离心10分钟（1350r/min）
7、去上清，加入1ml红细胞裂解液ACK，静置3分钟，再加9ml HBSS溶液，进行离心10分钟，弃上清。
8、用HBSS液洗涤骨髓细胞2次，室温，1350r/min离心10分钟。计数活细胞，用培养基调整细胞浓度至1X106个细胞/ml.
9、在试管中加入RPMI-1640培养基，然后再加入20ng/ml的细胞因子GM-CSF、5%FBS、0.1%的2-巯基乙醇，
10、吸取培养基加入到沉淀中混匀，24孔板铺板培养，每个孔1ml.
6、由小鼠的B淋巴细胞（染色体数目40条）和小鼠骨髓瘤细胞（染色体数目60条）制备的杂交瘤（问题补充）
人家问的是常规下的染色体数，你硬是去分析有丝分裂后期，怎么行呢。再者，细胞处于分裂期的时间很短，别说分裂后期了。
7、下列选项中，两类细胞的染色体数目均可呈周期性变化的是
选择来B
“细胞的染色体数源目均可呈周期性变化”是指可以进行有丝分裂或是减数分裂
A蛙的红细胞与淋巴细胞--------蛙的红细胞属于无丝分裂，无周期性变化，细胞核先伸长，从核的中部向内凹进，缢裂成为两个细胞核
C人的胚胎干细胞与成熟红细胞---------哺乳动物的成熟红细胞没有细胞核，无法进行有丝分裂
D牛的精细胞与精原细胞-----------精细胞是单倍体细胞，不能再分裂了
8、两类细胞的染色体数目均可呈周期性变化的是
A
A.蛙不属于哺乳动物，故其红细胞有细胞核；
B.小鼠骨髓瘤细胞可以无线增值， 无限增值的细胞就是癌细胞，由于癌细胞内的原癌基因被激活，不在受有机体的控制，不停的在增值，由于癌细胞表面的糖蛋白减少，还很容易转移；
C.人的成熟红细胞无核，不存在分裂；
D.牛精原细胞进行减数分裂，精细胞不能进行分裂。
必修1《分子与细胞》这样定义：“细胞周期是连续分裂的细胞，从一次分裂完成到下一次分裂完成为止，这是一个细胞周期。”那么减数分裂符合这个概念吗？我认为减数分裂没有细胞周期。因为细胞周期的概念中有一个明确的定语修饰：连续分裂的细胞。由此可见，细胞周期是针对有丝分裂而言的。持不同观点的同行这样反问：减数分裂不也是经历了两次连续分裂，怎么会没有周期之说?对于减数分裂一定要注意：减数第一次分裂和减数第二次分裂共同叫做“一次减数分裂”，经过减数分裂后所产生的子细胞，没有也不再进行连续的分裂。而且细胞周期概念中还有一个“周期性”的内涵：一个周期后产生的子细胞又恢复到了初始状态（染色体解螺旋，条数不变），然后马上进入下一个周期。从这个意义上讲，减数第一次和第二次分裂的连续已经失去了周期性。所以减数分裂无所谓的细胞周期。