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骨髓干细胞体外培养

发布时间:2020-11-14 12:44:05

1、骨髓间充质干细胞与骨髓基质干细胞是同一种细胞吗

不是一种细胞,具体来源不同,但是都是干细胞,只是分别由基质细胞、间充质分离培养得到。只知道下面这些,希望有帮助

1、间充质干细胞(MSCs)是属于中胚层的一类多能干细胞,主要存在于结缔组织和器官间质中,以骨髓组织中含量最为丰富,由于骨髓是其主要来源,因此统称为【骨髓间充质干细胞】。骨髓间充质干细胞是胎儿和成年人保留在骨髓血液中的原始干细胞,具有强大的生命力,能被诱导分化为血管组织和骨组织,再生能力强;未分化的间充质细胞(undifferentiated mesenchymal cell)是保留在成体结缔组织内的一些较原始的细胞,它们保持着间充质细胞的分化潜能,在炎症与创伤时可增殖分化为成纤维细胞、脂肪细胞。间充质细胞常分布在小血管尤其是毛细血管周围,并能分化为血管壁的平滑肌和内皮细胞。位于器官之间、组织之间以至细胞之间,起连接、支持、营养、防御、保护和修复等功能。
一、具有强大的增殖能力和多向分化潜能,在适宜的体内或体外环境下不仅可分化为造血细胞,还具有分化为肌细胞、肝细胞、成骨细胞、软骨细胞、基质细胞等多种细胞的能力。
二、具有免疫调节功能,通过细胞间的相互作用及产生细胞因子抑制T细胞的增殖及其免疫反应 ,从而发挥免疫重建的功能。
三、具有来源方便,易于分离、培养、扩增和纯化,多次传代扩增后仍具有干细胞特性,不存在免疫排斥的特性。

2、基质细胞群包括成纤维细胞、网状细胞及巨噬细胞等,基质细胞在体外培养可形成CFU-F。造血干细胞被基质细胞包绕后才能增殖。血细胞是在基质细胞形成的网状支架中增殖和分化。

小知识: 干细胞的分类与来源

根据其发育阶段,于细胞可分为胚胎干细胞(Embryonic Stem Cell)和成体干细胞(Alt Stem Cell)。胚胎干细胞包括ES细胞(Embryonic Stem Cell)、EG 细胞(Embryonic Germ Cell);成体干细胞包括神经干细胞(Neural Stem Ce11, NSC)、血液干细胞(Hematopoietic Stem Cell,HSC)、骨髓间充质干细胞(Mesen chymal Stem Cell,MSC),骨髓基质干细胞,表皮干细胞(EPidexmis Stem Cell)等。

近年,发现不同胚层起源的成体干细胞在一定条件下也可相互转化。如肌肉组织的干细胞可以“横向分化”为血液细胞和脂肪细胞。

2、如何成为骨髓志愿者

凡年龄在18-55周岁,身体健康,经下列血液检查合格者,都可以成为造血干细胞捐献者。

丙氨酸氨基转移酶(ALT)≤40单位

乙型肝炎病毒表面抗原:阴性

丙型肝炎病毒抗体:阴性

艾滋病病毒抗体:阴性

梅毒试验:阴性

如果您适龄、身体健康(符合无偿献血条件)、志愿捐献造血干细胞,可与各地红十字会(或者中华骨髓库分库)的热线电话联系报名、填写志愿捐献书及有关表格,并抽取6~8毫升血液。组织配型实验室将会对您的血液进行HLA分型等检验,并把您的所有相关资料录入中国造血干细胞捐献者资料库的计算机数据库中。这样您就成为捐献造血干细胞的志愿者了。

捐献造血干细胞一般就是捐献骨髓,一般骨髓捐献的采集量是50-100ml(采集直接输入HLA匹配受体),如果是骨髓体外培养回输的话采集量是10ml。如果想要捐献骨髓,建议个人慎重考虑,官方声明捐献骨髓对身体无害,事实上捐献骨髓对身体是有很大影响的。人体骨髓腔中含红骨髓和黄骨髓,当人体少量失血(小于200CC)时,红骨髓产生造血干细胞,造血干细胞分化成血细胞补充人体所失血细胞;当人体大量失血(小于800CC)时,人体需要及时输血,体内少量黄骨髓转变为红骨髓,加速造血干细胞的生成;当人体大量失血大于800CC时,人体极度危险,不及时输血即死亡。人体中的红骨髓会随着年龄的增长而不断减少,所以捐献红骨髓后,在未来的几年里需要合理的调理身体,红骨髓的含量会得到一定的恢复。

3、关于造血干细胞

1.根据我国《献血者健康检查要求》“……眼底有变化的高度近视等”不能献血。
因为献血有可能破坏眼压平衡,轻微的血压波动对于高度近视者可能造成血管痉挛,影响视力。
所以,从保护献血者角度出发不提倡献血。
2.捐献造血干细胞一般就是捐献骨髓,一般骨髓捐献的采集量是50-100ml(采集直接输入HLA匹配受体),如果是骨髓体外培养回输的话采集量是10ml。如果想要捐献骨髓,建议个人慎重考虑,官方声明捐献骨髓对身体无害,事实上捐献骨髓对身体是有很大影响的。人体骨髓腔中含红骨髓和黄骨髓,当人体少量失血(小于200CC)时,红骨髓产生造血干细胞,造血干细胞分化成血细胞补充人体所失血细胞;当人体大量失血(小于800CC)时,人体需要及时输血,体内少量黄骨髓转变为红骨髓,加速造血干细胞的生成;当人体大量失血大于800CC时,人体极度危险,不及时输血即死亡。人体中的红骨髓会随着年龄的增长而不断减少,所以捐献红骨髓后,在未来的几年里需要合理的调理身体,红骨髓的含量会得到一定的恢复。

4、骨髓移植与造血干细胞移植有什么区别?

一、指代不同

1、骨髓移植:是通过静脉输注造血干、祖细胞,重建患者正常造血与免疫系统,从而治疗一系列疾病的治疗方法。

2、造血干细胞移植:患者先接受超大剂量放疗或化疗(通常是致死剂量的放化疗),有时联合其他免疫抑制药物,以清除体内的肿瘤细胞、异常克隆细胞,然后再回输采自自身或他人的造血干细胞,重建正常造血和免疫功能的一种治疗手段。

二、特点不同

1、骨髓移植:使用预处理方案可以制造空间、免疫抑制以及清除疾病。预处理方案的强度以既可以达到最大限度的防止移植排斥、又可达到患者对其副作用的耐受为目标,故有多种预处理方案可供选择。

2、造血干细胞移植:血缘关系供者造血干细胞移植和无血缘关系供者造血干细胞移植(即无关移植);按移植物种类分为外周血造血干细胞移植、骨髓移植和脐带血造血干细胞移植。

三、发展不同

1、骨髓移植:随着移植技术的提高,其疗效已经渐趋稳定。移植供者的选择困难成为制约移植的主要障碍。HLA不完全相合的亲属供者、HLA单倍体相合亲属供者及无关供者的应用及相关技术改进成为临床研究的热门课题,非清髓技术也带来了观念上的革命。

2、造血干细胞移植:有很多先进的药物从遗传学水平治疗这些患者,但是异基因造血干细胞移植仍是治愈这些疾病的惟一治疗手段。

5、干细胞都在骨髓里么

干细胞全身都存在.
人体干细胞分两种类型:
一种是全功能干细胞,可直接克隆人体;另一种是多功能干细胞,可直接复制各种脏器和修复组织。人类寄希望于利用于细胞的分离和体外培养,在体外繁育出组织或器官,并最终通过组织或器官移植,实现对临床疾病的治疗。
“原位培植皮肤干细胞再生新皮肤技术”不仅实现了利用于细胞复制皮肤器官,而且做到了人体原位皮肤器官的复制,从而使人类从干细胞体外培植组织成器官移植治疗,直接跨入了人体原位干细胞复制器官。科学家普遍认为:干细胞的研究将为临床医学提供更为广阔的应用前景。
干细胞具有经培养不定期地分化并产生特化细胞的能力。在正常的人体发育环境中,它们得到了最好的诠释。人体发育起始于卵子的受精,产生一个能发育为完整有机体潜能的单细胞,即全能性受精卵。受精后的最初几个小时内,受精卵分裂为一些完全相同的全能细胞。这意味着如果把这些细胞的任何一个放入女性子宫内,均有可能发育成胎儿。实际上,当两个全能细胞分别发育为单独遗传基因型的人时,即出现了各方面都完全相同的双胞胎。大约在受精后四天,经过几个循环的细胞分裂之后,这些全能细胞开始特异化,形成一个中空环形的细胞群结构,称之为胚囊,胚囊由外层细胞和位于中空球形内的细胞簇(称为内细胞群)所构成。
外层细胞继续发展,形成胎盘以及胎儿在子宫内发育所需的其它支持组织。内细胞群细胞亦继续发育,形成人体所须的全部组织。尽管内细胞群可形成人体内的所有组织,但它们不能发育为一个单独的生物体,因为它们不能形成胎盘以及子宫内发育所需的支持组织。这些内细胞群细胞是多能性的----它们能产生许多种类型的细胞,但并非胎儿发育所需的全部细胞类型。因为它们不是全能性的,不是胚胎,没有完全的发育潜能。如果内细胞群被放入女性子宫,它不会发育成胎儿。
多能性干细胞经历进一步的特异分化,发展为参与生成特殊功能细胞的干细胞。如造血干细胞,它能产生红细胞、白细胞和血小板。又如皮肤干细胞,它能产生各种类型的皮肤细胞。这些更专门化的干细胞被称为专能干细胞。
干细胞对早期人体的发育特别重要,在儿童和成年人中也可发现专能干细胞。举我们所最熟知的干细胞之一,造血干细胞为例,造血干细胞存在于每个儿童和成年人的骨髓之中,也存在于循环血液中,但数量非常少。在我们的整个生命过程中,造血干细胞在不断地向人体补充血细胞——红细胞、白细胞和血小板的过程中起着很关键的作用。如果没有造血干细胞,我们就无法存活。
干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞。它包括胚胎干细胞和成体干细胞。干细胞的发育受多种内在机制和微环境因素的影响。目前人类胚胎干细胞已成功地在体外培养。最新研究发现,成体干细胞可以横向分化为其它类型的细胞和组织,为干细胞的广泛应用提供了基础。
在胚胎的发生发育中,单个受精卵可以分裂发育为多细胞组织或器官。在成年动物中,正常的胜生理代谢或病理损伤也会引起组织或器官的修复再生。胚胎的分化形成和成年组织的再生是干细胞进一步分化的结果。胚胎干细胞是全能的,具有分化为几乎全部组织和器官的能力。而成年组织或器官内的干细胞一般认为具有组织特异性,只能分化特定的细胞或组织。
然而,这个观点目前受到了挑战。最新的研究表明,组织特异性干细胞同样具有分化成其它细胞或组织的潜能,这为干细胞的应用开创了更广泛的空间。按分化潜能的大小,干细胞基本上可分为三种类型:一类是全能性干细胞,它具有形成完整个体的分化潜能。如胚胎干细胞,它是从早期胚胎内的细胞团分离出来的一种高度未分化的细胞系,具有与早期胚胎细胞相似的形态特征和很强的分化能力,它可以无限增殖并分化成为全身200多种细胞类型,进一步形成机体的所有组织、器官。另一类是多能性干细胞,这种干细胞具有分化出多种细胞组织的潜能,但却失去了发育成完整个体的能力,发育潜能受到一定的限制,骨髓多能造血干细胞是典型的例子,它可分化出至少十一中血细胞,但不分化出造血系统以外的其他细胞。还有一类干细胞为单能干细胞(也称专能、偏能干细胞),这类干细胞只能向一种类型或密切相关的两种类型的细胞分化,如上皮组织基底层的干细胞、肌肉中的成肌细胞。
总之,凡需要不断产生新的分化细胞以及分化细胞本身不能再分裂的细胞或组织,都要通过干细胞所产生的具有分化能力的细胞来维持肌体细胞的数量,可以这样说,生命是通过干细胞的分裂来实现细胞的更新及保证持续生长。
随着基因工程、胚胎工程、细胞工程等各种生物技术的快速发展,按照一定的目的,在体外人工分离、培养干细胞已成为可能,利用干细胞构建各种细胞、组织、器官作为移植器官的来源,这将成为干细胞应用的主要方向。

造血干细胞在骨髓中有,在人体血液中也大量的存在!

6、造血干细胞体外定向诱导分化,为什么不用骨髓干细胞

探讨体外诱导人骨髓间充质干细胞(human bone marrow-derived mesenchymal stem cells, hBMSCs)定向诱导分化为心肌样细胞的实验条件。 方法:取成人弃骨骨髓,通过全骨髓贴壁法分离培养hBMSCs。在传至第三代时,筛选具有心肌特异性分化潜能的c-kit~+的hBMSCs细胞克隆,用含20%胎牛血清的低糖DMEM培养液继续克隆培养。当细胞达到70%融合时,分别用10μmol/l5-氮胞苷(5-azacytidine crystalline,5-aza),100mg/l参麦注射液,10μmol/l5-氮胞苷和100mg/l参麦注射液3组诱导剂诱导hBMSCs。24小时后,更换为含10%胎牛血清的低糖DMEM培养液继续培养。在诱导3周后,通过显微镜下观察其形态变化。用免疫细胞化学方法检测心肌特异性标记抗原Desmin和肌钙蛋白T的表达;用RT-PCR方法检测心肌特异基因心房利尿肽(atrial natriuretic peptide,ANP)和脑钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)表达。 结果:骨髓中含有多种hBMSCs细胞克隆,其中成纤维细胞样克隆表达c-kit~+。分别用3组诱导剂诱导c-kit~+细胞15天后,部分细胞胞体明显增粗,可见有些细胞间有融合样现象发生。诱导3周后,3组都有类似肌管样细胞出现,细胞短粗,呈不规则的圆柱形,有分支,互相连成网。苏木精-伊红(hematoxylin-eosin HE)染色后,3组细胞都排列规则,类似于心肌细胞的形态,可见部分细胞有排列规则的横纹样结构。免疫细胞化学显示诱导3周后的hBMSCs,Desmin阳性细胞数目分别是:5-aza组(65.3±4.7%),参麦注射液组(62.3±3.9%),5-aza和参麦注射液组(68.5±2.1%),3组Desmin阳性细胞表达率无显著差异; cTnT阳性细胞数目分别是:5-aza组(62.2±4.1%),参麦注射液组(63.8±3.4%), 5-aza和参麦注射液组(66.0±6.2%),3组Desmin阳性细胞表达率无显著差异。阴性对照组和未分化的hBMSCs均无Desmin和cTnT的表达。RT-PCR显示3种不同的诱导剂诱导hBMSCs3周后都有ANP,BNP的表达,未分化的hBMSCs无ANP,BNP的表达。 结论:5-aza和中药可以诱导c-kit~+的hBMSCs细胞克隆分化为心肌样细胞。体外诱导成的心肌样细胞表现为未成熟心肌细胞的结构和功能特征。证明骨髓中含有多种干细胞克隆,c-kit可作为筛选hBMSCs向心肌样细胞分化的一项检测指标。筛选具有心肌特异性分化潜能的hMSCs可提高诱导分化率。

7、骨髓干细胞治疗能糖尿病吗?

自体骨髓间充质干细胞的移植不存在着任何的排异反应,安全,没有任何的副作用,在糖尿病的治疗效果上十分的好,可以很好的让糖尿病的患者逐渐的摆脱对药物和胰岛素的依赖。
目的自体骨髓间充质干细胞与外周血造血干细胞共移植治疗糖尿病的的安全性和疗效。方法采用无血清培养体系体外培养骨髓间充质干细胞,将骨髓间充质干细胞与外周血造血干细胞共移植治疗5例恶性血液病。结果5例患者骨髓间充质干细胞经体外培养扩增后,与采集的自体外周血造血干细胞共同回输。WBC和Plt低谷时间分别为4~7d和4~9d,造血重建(ANC≥0.5×109/L和Plt≥20×109/L)时间分别为8~11d(中位时间9d)和7~10d(中位时间8.3d)。除口腔、咽部轻度感染外,无其他严重的移植相关并发症。结论体外无血清培养体系可以培养扩增临床规模的骨髓间充质干细胞,而且自体骨髓间充质干细胞与外周血造血干细胞共移植治疗糖尿病安全,移植后胰脏功能恢复效果好。

8、骨髓间充质干细胞的生物学特性有哪些呀???谢谢各位啦~急用...

贴壁生长,寿命较短

9、骨髓间充质干细胞与什么细胞可以共培养

髓核细胞与骨髓间充质干细胞共培养,影响髓核细胞的活知性,经共培养的髓核细胞增殖速度、蛋白多糖合成量较对照组提高明显,髓核细胞活性上调道。 


睾丸支持内细胞与骨髓间充质干容细胞在体外共培养的早期,睾丸支持细胞可以显著促进间充质干细胞的生长,但在后期则反而抑制间充质干细胞的生长。

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