1、小鼠骨髓诱导巨噬细胞求助
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2、如何提取小鼠骨髓细胞?
1、颈椎脱臼法处死小鼠(C57型小鼠),放在75%酒精中侵泡3-5分钟后,拎出后将小鼠铺于超净台上一个消毒托盘上。
2、无菌提取小鼠的四肢骨,用眼科镊小心捏起小鼠两髋关节之间的腹部皮肤,用眼科剪小心剪开皮肤,并分离两下肢的皮肤,往下在脚踝处剪断,往上在髋关节处剪断,这样可以游离出小鼠的两条下肢。
3、小心剥离肌肉,分别剪下Femurs(大腿骨)and Tibias(胫骨),剪去两端软骨,露出红色的骨髓腔。注意尽可能少的剪走骨髓腔。用纱布将骨头上的肌肉用纱布擦拭干净。
4、拿一支1ml的无菌注射器,每支吸取1mlHBSS液,并用无菌的针头套管将之轻轻拧弯。轻轻插入骨髓腔,冲洗骨髓腔以获得骨髓,一般用2-3ml培养基冲洗两次,可冲出绝大部分细胞。
5、过滤:用2OO目的滤网过滤,将滤网的中央插入到离心管里面25px处,然后用注射器吸取骨髓液,慢慢将骨髓液经滤网注入离心管中,去除残渣。
6、离心:将离心管放置离心机中离心10分钟(1350r/min)
7、去上清,加入1ml红细胞裂解液ACK,静置3分钟,再加9ml HBSS溶液,进行离心10分钟,弃上清。
8、用HBSS液洗涤骨髓细胞2次,室温,1350r/min离心10分钟。计数活细胞,用培养基调整细胞浓度至1X106个细胞/ml.
9、在试管中加入RPMI-1640培养基,然后再加入20ng/ml的细胞因子GM-CSF、5%FBS、0.1%的2-巯基乙醇,
10、吸取培养基加入到沉淀中混匀,24孔板铺板培养,每个孔1ml.
3、哪个品牌转染试剂可以转染BMDMs细胞(小鼠骨髓来源的巨噬细胞)?
已经发表文章转染BMDMs细胞(小鼠骨髓来源的巨噬细胞文章如下:
清华大学免疫学研究所发表文章
清华大学用invigentech产品
清华大学
清华大学免疫学研究所
4、小鼠巨噬细胞吞噬实验如何解释细胞内台盼兰的着色?
高等动物体内的巨噬细胞、单核细胞和嗜中性粒细胞,具有吞噬作用的功能。当专异物入侵机体时,能属招引巨噬细胞,巨噬细胞主动将异物移行聚集,将异物吸附在细胞表面,随之吸附区域的细胞膜向内凹陷,伸出伪足包围异物,并吞入胞质,形成吞噬液,继而在细胞之中的初级溶酶体与吞噬泡融合形成吞噬媒体,异物消除。这个实验中的台盼兰染色剂对于小鼠的巨噬细胞相当于异物。台盼蓝可被巨噬细胞吞噬,所以可用于巨噬细胞的活体染色剂
5、小鼠肠巨噬细胞 是细胞株还是提原代
小鼠腹腔原代来巨噬源细胞是什么样子的 巨噬细胞属免疫细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞容易获得,便于培养,并可进行纯化。巨噬细胞属不繁殖细胞群,在条件适宜下可生活2-3周,多用做原代培养
6、什么品牌转染试剂可以转染BMDM细胞(小鼠骨髓来源巨噬细胞)?转染效率高啊?
BMDM小鼠骨髓来源巨噬原代细胞转染siRNA或者质粒DNA的难度都是很大的,2020年1月西南医科大学中西医结合医院使用美国Zeta Life公司Advanced Transfection Reagent转染试剂,货号AD600150,成功转染BMDM细胞小鼠骨髓来源的巨噬细胞已发表文章,文章标题(A&P)compound
relievedcisplatin-
具体转染条件等可以咨询作者,希望对大家的细胞转染带来帮助。
7、求助:小鼠巨噬细胞和RAW264.7的区
BMDM:bone marrow derived macrophage是常用的原代巨噬细胞,在炎症细胞模型方面常用。 RAW264.7:小鼠腹腔巨噬细胞细胞系,也是常用的炎症细胞模型之一