如何取骨髓细胞

1、捐献骨髓时是怎样抽取的

朋友，详细介绍给你了， 1．骨髓是人体的造血组织，位于人体许多骨骼内．成年人的骨髓分两种：红骨髓和黄骨髓．红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞．血小板有止血作用，白细胞能杀灭与抑制各种病原体，抱括细菌、病毒等；某些淋巴细胞能制造抗体。因此，骨髓不但是制血器官，它还是重要的免疫器官。黄骨髓主要是脂肪组织，当人体贫血时，它可以转化为红骨髓。 2．捐献骨髓会不会影响捐献者的身体健康？ 捐款骨髓不会影响人的健康。许多人认为捐献骨髓是抽取脊髓，这完全是一种误解。骨髓移植是需要人体内的红骨髓——造血干细胞。一个成年人的造血干细胞是3公斤，一名捐献者提拱不到10克的骨髓干细胞就能救活一名白血患者、因此不会减尽弱其免疫能力和造血能力。骨髓是在生能力很强的组织，对于健康捐献者，会在10天左右即可补足所捐献的干细胞量。 3．健康者在什么年龄段适合捐献骨髓？ 健康者在18～55岁均可捐献骨髓。 4．什么是骨髓移植？ 骨髓移植是指把骨髓中的造血干细胞从一个人体内移植到另一个人体内（一般是通过静脉输入）。确切地说，骨髓移植就是造血干细胞的移植。 5．什么人需要进行骨髓移植？ 人体血液系统及免疫系统的严重疾病，如白血病（俗称血癌）。淋巴瘤、再生障碍性贫血地中海贫血、重病放射病患者，继续生存的希望就是骨髓移植。我国每年约400万名各类疾病的患者等待着骨髓移植。 除了对捐献者的休重、血压等身体健康程度和献血条件一样外，捐献骨髓者一般要求在18周岁以上、45周岁以下，最好有献血或捐献血小板的经历，一旦抽样，配对也要求是身体、心理等都较成熟者，以便于救治患者，从严格意义上来说，捐髓实际上是捐献造血干细胞，一次性捐献量约20克左右，对身体没有影响，市民可在义务献血的同时填写一张自愿捐髓表，这样医院将有关资料输入信息库后，可随时约请志愿者救死扶伤。 样捐献骨髓 1.如何成为志愿捐献者？ 如果您年龄在18至55岁之间、身体健康，可拨打中华骨髓库骨髓捐献热线电话：（北京）010－65126600，（上海）021－62478117，或到区县级以上红十字会报名，并填写志愿捐献书及有关表格。 2.捐献骨髓有哪些步骤？ 1）报名后，骨髓库或红十字会安排您验血5毫升，并将化验的HLA分型结果储存在中国造血干细胞捐献者资料库中，供患者寻找配对。 2）供者与受者初步配型相同，骨髓库的工作人员会向您详细介绍捐献过程，同时请您接受全身检查。 3.如何抽取骨髓？ 抽取骨髓造血干细胞有两种方法：一是医生在供者的髂骨部位穿刺采集骨髓中的造血干细胞，术后一两天内有些疼痛，一周内就可完全恢复。二是用科学的方法有效地动员骨髓和其他部位的造血干细胞大量释放到外周血液中去，从供者的手臂静脉中采集，并通过机器将造血干细胞分离出来，剩余的血液回输到供者体内。 4.捐献骨髓会不会影响身体健康？ 许多人认为捐献骨髓是抽取脊髓，这完全是一种误解。骨髓移植需要的是人体内的红骨髓——造血干细胞。一个成年人的骨髓重量为3公斤，一名供髓者提供不足10克的骨髓造血干细胞就能挽救一名白血病患者的生命。骨髓是再生能力很强的组织，一般健康者捐献造血干细胞后在十天左右即可补足所捐的干细胞量。因此，捐献骨髓不会影响人的身体健康。

2、如何提取小鼠骨髓细胞?

1、颈椎脱臼法处死小鼠(C57型小鼠)，放在75%酒精中侵泡3-5分钟后，拎出后将小鼠铺于超净台上一个消毒托盘上。
2、无菌提取小鼠的四肢骨，用眼科镊小心捏起小鼠两髋关节之间的腹部皮肤，用眼科剪小心剪开皮肤，并分离两下肢的皮肤，往下在脚踝处剪断，往上在髋关节处剪断，这样可以游离出小鼠的两条下肢。
3、小心剥离肌肉，分别剪下Femurs（大腿骨）and Tibias（胫骨）,剪去两端软骨，露出红色的骨髓腔。注意尽可能少的剪走骨髓腔。用纱布将骨头上的肌肉用纱布擦拭干净。
4、拿一支1ml的无菌注射器，每支吸取1mlHBSS液，并用无菌的针头套管将之轻轻拧弯。轻轻插入骨髓腔，冲洗骨髓腔以获得骨髓，一般用2-3ml培养基冲洗两次，可冲出绝大部分细胞。
5、过滤：用2OO目的滤网过滤，将滤网的中央插入到离心管里面25px处，然后用注射器吸取骨髓液，慢慢将骨髓液经滤网注入离心管中，去除残渣。
6、离心：将离心管放置离心机中离心10分钟（1350r/min）
7、去上清，加入1ml红细胞裂解液ACK，静置3分钟，再加9ml HBSS溶液，进行离心10分钟，弃上清。
8、用HBSS液洗涤骨髓细胞2次，室温，1350r/min离心10分钟。计数活细胞，用培养基调整细胞浓度至1X106个细胞/ml.
9、在试管中加入RPMI-1640培养基，然后再加入20ng/ml的细胞因子GM-CSF、5%FBS、0.1%的2-巯基乙醇，
10、吸取培养基加入到沉淀中混匀，24孔板铺板培养，每个孔1ml.

3、如何抽取骨髓、对人体有危险吗？

抽取骨髓造血干细胞有两种方法：1.用科学的方法有效地动员骨髓和其他部位的造血干细胞大量释放到外周血液中去，从供者的手臂静脉中采集，并通过机器将造血干细胞分离出来，剩余的血液回输到供者体内。捐献干细胞既无碍健康，也没有危险，只需您付出一点勇气。2.医生在供者的髂骨部位穿刺采集骨髓中的造血干细胞，术后一两天内有些疼痛，一周内就可完全恢复(此法现很少采用)。

4、如何提取造血干细胞？

传统方式是:

用骨腔穿刺采集，现在则多通过注射动员剂，把骨腔里的造血干细胞释放出来进入血管，通过机器把造血干细胞从血液中分离出来。

5、骨髓怎么抽出来？

抽取骨髓造血干细胞有两种方法：一是医生在供者的髂骨部位穿刺采集骨髓中的造血干细胞，术后一两天内有些疼痛，一周内就可完全恢复。二是用科学的方法有效地动员骨髓和其他部位的造血干细胞大量释放到外周血液中去，从供者的手臂静脉中采集，并通过机器将造血干细胞分离出来，剩余的血液回输到供者体内。 第一种： 疼 。第二种：不疼(跟献血一样) 。

6、如何取骨髓

不是在脊椎取骨髓血的，外国是在骨骼上钻孔取骨髓血（脊椎里面是脊髓，没有骨髓）。我国是利用动员剂（集落刺激因子）将骨髓中的造血干细胞释放到外周血，通过外周血分离和采集的，就像采集血小板一样，只不过采集时间长一点。一点不痛苦，就像献血一样

7、骨髓是怎么采集的

骨髓造血干细胞是直接从红骨髓中采集造血干细胞的方法。红骨髓是造血干细胞存在的主要场所。由于抽取骨髓时骨髓腔内的血液亦会同时被抽取出来，为预防捐赠者损失过多红细胞造成贫血或血压过低。在捐献骨髓前需要捐赠者做自体备血：即在捐献前几周逐步采集自身血液共600毫升，存储在体外在手术时输入。骨髓造血干细胞采集需要在全身麻醉或硬膜外麻醉行外科手术进行。手术时，在麻醉后穿刺针插入臀部两侧的髂骨内抽取骨髓细胞。随抽取骨髓细胞需要可能在髂骨的多点穿刺。抽取骨髓的量依患者体重而定，约须抽出500~1000毫升骨髓液。手术同时向体内回输原自备血，以免贫血发生。骨髓造血干细胞采集不会切开皮肤，只是在皮肤表面留下数个穿刺针孔。术后，需防止伤口部位出血。伤口部位可能感觉疼痛，可对症处理。大多数捐赠者还会感到腰部有酸痛感。另外，由于麻醉剂的作用，有的捐赠者会有恶心呕吐感觉。由于体内白细胞计数暂时底下，可能会有轻度发烧的现象。出现这些情况也可由医生对症进行处理。

虽然是复制的，但......我也用心了。

8、捐献骨髓是怎样的过程

骨髓抽取及骨髓干细胞的分离纯化：捐献者在无菌条件下从髂后上棘进行穿刺，分不同部位抽取骨髓l0～20 mL，置于肝素化的无菌离心管中，骨髓离心取出脂肪层.

捐献造血干细胞不会影响身体健康：
不管是骨髓造血干细胞捐献还是外周血造血干细胞捐献，都不会影响身体健康。许多人认为捐献骨髓就是抽取骨髓，这完全是一种误解。骨髓移植需要的是人体内的红骨髓，即造血干细胞。
一个成年人的骨髓重量为3公斤，一名供髓者提供不足10克的骨髓造血干细胞就能挽救一名白血病患者的生命，不会因此减弱其免疫功能和造血功能。
人体内的造血干细胞具有很强的再生能力。正常情况下，人体各种细胞每天都在不断新陈代谢，进行着生成、衰老、死亡的循环往复，失血或捐献造血干细胞后，可刺激骨髓加速造血，1-2周内，血液中的各种血细胞恢复到原来水平。因此，捐献造血干细胞不会影响身体健康。

参考资料：http://engine.cqvip.com/asp/vipsearch.asp?Query=干细跑移植治疗研究&Type=L

9、如何取小鼠骨髓细胞

1、颈椎脱臼法处死小鼠(C57型小鼠)，放在75%酒精中侵泡3-5分钟后，拎出后将小鼠铺于超净台上一个消毒托盘上。
2、无菌提取小鼠的四肢骨，用眼科镊小心捏起小鼠两髋关节之间的腹部皮肤，用眼科剪小心剪开皮肤，并分离两下肢的皮肤，往下在脚踝处剪断，往上在髋关节处剪断，这样可以游离出小鼠的两条下肢。
3、小心剥离肌肉，分别剪下Femurs（大腿骨）and Tibias（胫骨）,剪去两端软骨，露出红色的骨髓腔。注意尽可能少的剪走骨髓腔。用纱布将骨头上的肌肉用纱布擦拭干净。
4、拿一支1ml的无菌注射器，每支吸取1mlHBSS液，并用无菌的针头套管将之轻轻拧弯。轻轻插入骨髓腔，冲洗骨髓腔以获得骨髓，一般用2-3ml培养基冲洗两次，可冲出绝大部分细胞。
5、过滤：用2OO目的滤网过滤，将滤网的中央插入到离心管里面25px处，然后用注射器吸取骨髓液，慢慢将骨髓液经滤网注入离心管中，去除残渣。
6、离心：将离心管放置离心机中离心10分钟（1350r/min）
7、去上清，加入1ml红细胞裂解液ACK，静置3分钟，再加9ml HBSS溶液，进行离心10分钟，弃上清。
8、用HBSS液洗涤骨髓细胞2次，室温，1350r/min离心10分钟。计数活细胞，用培养基调整细胞浓度至1X106个细胞/ml.
9、在试管中加入RPMI-1640培养基，然后再加入20ng/ml的细胞因子GM-CSF、5%FBS、0.1%的2-巯基乙醇，
10、吸取培养基加入到沉淀中混匀，24孔板铺板培养，每个孔1ml.