骨髓片染色方法

1、骨髓细胞染色常用什么方法，各是用于何种检测。

骨髓细胞内外铁染色,是进行贫血分类的常用组织化学染色方法,一般均采用普鲁士兰染色法,该法虽操作简便,但若掌握不好,常使玻璃上沉积大量污染铁,无法判定结果,我们曾查阅多种材料,对该项试验的一些细节问题均无详细介绍。最近我们参照各家材料,经过多次试验从玻片处理试剂配制、试验的时间、温度、最后漂洗的手法复染时间的控制等步骤上,对细胞内外铁染色的方法进行探讨,摸索出了一套较满意的染色方法,现介绍如下。

【作者单位】： 黑龙江省宝泉岭农场医院
【关键词】： 骨髓细胞 铁染色 染色方法 组织化学 试剂配制 玻片处理 氰化钾 贫血分类 普鲁士兰 染色法
【分类号】：R361
【正文快照】：
骨髓细胞内外铁染色,是进行贫血分类的常用组织化学染色方法。一般均采用普鲁士兰染色法,该法虽操作简便,但若掌握不好,常使玻璃上沉积大量污染铁,无法判定结果,我们曾查阅多种材料,对该项试验的一些细节同题均无详细介绍。最近我们参照各家材料,经过多次试验从玻片处理试剂

2、he染色的操作步骤

HE染色步骤： 

1、脱蜡，脱蜡二甲苯Ⅰ、Ⅱ各10分钟，事先准备好盖玻片。

2、覆水，100%（Ⅰ、Ⅱ）、90%、80%、70%酒精各5分钟，自来水冲洗5分钟×3。

3.、苏木精染色5分钟，根据染色情况，可以适当增加或减少染色时间，流水冲洗。 

4、5%乙酸分化1分钟，流水冲洗，用吸管滴加乙酸，布满玻片上的组织即可，分化后颜色变浅了一些，成为蓝色。

5、返蓝：返蓝液，实验室没有，也可不用。

6、伊红染色1分钟，根据染色情况，可以适当增加或减少染色时间，流水冲洗。

7、脱水：70%、80%、90%、100%酒精各10秒，二甲苯1分钟，可以在通风橱自然晾干再封

片，约5分钟左右。

8、滴上中性树胶，封片，用吸管滴上一滴即可，尽量少滴，但压片后要将组织全部覆盖完，避免中间有气泡。

(2)骨髓片染色方法扩展资料：

he染色原理：

易于被碱性或酸性染料着色的性质称为嗜碱性( basophilia )和嗜酸性( acidophilia )；而对碱性染料和酸性染料亲和力都比较弱的现象称为中性（neutrophilia)。

构成组织内蛋白质的氨基酸的种类很多，它们有不同的等电点。在普通染色法中，染色液的酸碱度为pH6左右，细胞内的酸性物质如细胞核的染色质、腺细胞和神经细胞内的粗面内质网及透明软骨基质等均被碱性染料染色，这些物质称为嗜碱性。

而细胞质中的其它蛋白质如红细胞中的血红蛋白、嗜酸粒细胞的颗粒及胶原纤维和肌纤维等被酸性染料染色，这些物质称为嗜酸型。如果改变染色液的酸碱度，pH值升高时，则原来被酸性染料染色的物质可变为嗜碱性；pH值降低时，原来被碱性染料染色的物质则可变为嗜酸性。

所以说染色液的pH值可以影响染色的反应。脱氧核糖核酸（DNA）两条链上的磷酸基向外，带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。

3、血涂片染色检查原虫的方法和步骤

方法和步骤如下：
一、玻片清洁
玻片清洁。清洁的玻片无油脂，无划痕，无灰尘，玻片
上有油迹，使厚血膜容易脱落，薄血膜涂布不均匀。在用手
指持玻片时，只能夹持玻片的两侧边缘，不要接触玻片的表
面以避免手指上的油污染污玻片。
1.新的载玻片先用热肥皂水洗涤，再用清水冲洗，然后
用软而洁净的毛巾擦干待用。
2.使用过的载玻片的清洁方法有两种：
①5%的肥皂水煮沸法
将洗衣肥皂削成小片，加水配成约5%的肥皂 水，煮沸
后将玻片一张一张地平放进肥皂水内，微火煮约一刻钟，然
后灭火待肥皂水稍冷后，用清洁干毛巾擦净后待用。
②清洁液浸泡法清洁液配制如下
重铬酸钾 80g
浓硫酸 100ml
水(清净水)1000ml
配制时须先将重铬酸钾研细放入水中，慢慢加温到全部
溶解为止，然后缓缓加入浓硫酸，待溶液冷却后倒入有盖的
大口玻璃缸内。清洁玻片时，将待洗的玻片逐张放入清洁中
浸泡一两天后，取出清水冲洗至完全没有黄色为止。浸泡前
最好用二甲笨除去镜油，清洁液颜色变为墨绿色后即失去清
洁作用，不能再用。
二、制片
1.薄血膜涂制
(1)先用75%酒精棉球将耳垂消毒，待酒精干后用采血针
迅速刺入耳垂近下端边缘处。
(2)用左手的拇指与食指以及右手的中指向相对的方向
将耳垂轻轻挤压出血。
(3)取一张洁净的载玻片，将它的左1/3的表面接触耳垂
上的血滴不要将玻片接触耳垂上的皮肤，使一小滴血在
玻片上。血量1-1.5mm
3
.1/4.火柴头大小。
(4)将推片臵于血溶之前与血液相接触，待血液沿推片边
缘展开后，将推片与载玻片保持30角度，用力均匀迅速将
推片由右向左推出而制成薄血膜。涂制得较好的薄血膜只有
一层血球，血球的分布排列比较均匀，血膜的末端突出如舌
状。
若取的血滴太大，则涂制的血膜太宽太厚，若推时用力
不均匀，则易成梯田状
若用力太大，则血膜两端过厚，若涂片上有油污，则血
膜成多孔状。
2.厚血膜涂制，薄血膜涂好后，再轻挤耳垂挤出约火柴
头大一血滴，将这一滴血滴在玻片的中心1/3处然后用推片
的一角由血滴中央向周围旋转涂成直径约一厘米的圆形血
膜，旋转涂制时间不宜过短，以免形成纤维蛋白束，遮盖了
疟原虫。
厚血薄涂好后，应平放待干，防苍蝇舔食血膜或灰尘落
在上面。受检者的编号可用铅笔或钢笔写在薄血膜的边缘
上，也可用蜡笔写在厚血膜一端。
三、染色
常用的染色方法有姬姆萨氏和瑞氏两种
(一)吉氏染色法，吉氏染剂是最可靠的血膜染剂其优
点是易于掌握很少染色过度，染好后的血膜褪色较慢
1.吉氏染剂的配制
吉氏染剂粉 0.5g
甘油，中性，25ml
甲醇，纯，分析纯，25ml
将吉氏染剂粉0.5臵于乳钵中，加少许甘油充分研磨
再加甘油研磨，直至25甘油加完为止。将充分研磨的吉氏
甘油液倒入无水，干净的棕色玻塞瓶中，然后分次加甲醇于
乳钵洗出染剂倒入瓶中，直至25甲醇将乳钵洗净并全部倒
入瓶中，塞紧，充分摇匀，放臵室内一星期，每天摇动数次
以后即可使用.
2.缓冲液的配制;
为了保证染色良好，使疟原虫的核和胞浆红兰分明，感
染的红血球上的薛氏小点清楚，在稀释染剂厚液时所用的
蒸馏水必须加缓冲液，缓冲蒸馏水。新鲜蒸馏水可能接近
中性，但贮存在一个时期后，由于吸收了空气中的 而变为
酸性，因此蒸馏水中必须加缓冲液，使其达到我们需要的效
果。
缓冲液配制
磷酸氢二钠，无水 9.5g
蒸馏水 1000ml
磷酸二氢钾 9.07g
蒸馏水 1000ml
将上二液分别贮存于紧塞的玻瓶中。
稀释染剂所用的蒸馏水的ph以7.0-7.2为最适宜现
用现配可按下表配制缓冲蒸馏水的配制（ml）
ph 磷酸二氢钠液 磷酸二氢钾液 蒸馏水
6.6 37 63 900
6.8 49 51 900
7.0 63 37 900
7.2 73 27 900

4、在医学上,组织切片常用的染色方法是什么?

苏木精-伊红染色，即HE染色。
脂肪可以用锇染色（以苏丹3、油红、锇酸染色）。
神经用HE或者银染。

5、急求骨髓涂片铁染色法技术流程

1)4%的盐酸溶液.:40ml(38%浓盐酸)+340ml蒸馏水
2)40g/L亚铁氰化钾液
3)碱性复红:1g复红+10ml无水乙醇+90ml(5%石碳酸溶液),用时取3ml加100ML水.
4)37%甲醛

6、实验室常用的染色方法有哪几种？

实验室常用的染色方法有如下几种：

（1）瑞氏染色法

染色结果使组织细胞的胞浆和核染成不同颜色，菌体呈蓝紫色，易于识别。

（2）革兰氏染色法

可用于鉴别革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌。革兰氏阳性菌不易被酒精脱色而染成蓝紫色，革兰氏阴性菌则易被酒精脱色，经复染呈红色。

（3）美蓝染色法

多色性美蓝染色液可染细菌荚膜，使其呈浅红色（菌体为蓝色）。

（4）姬姆萨染色法

适用于螺旋体、支原体、立克次氏体等病原体的染色。其可使组织细胞的胞浆和核染成不同颜色，而菌体呈蓝紫色，易于识别。

7、给载玻片上的细胞染色的正确方法

取人口腔上皮细胞时必须漱口，除去杂质
用牙签在口腔内壁刮几下就下来了
将口腔上皮细胞浸到质量分数为0.9%的NACL溶液中，为了杀菌
染色方法是：在盖玻片的一侧滴一滴稀碘液
.
用吸水纸吸引,使染液浸润标本的全部.
希望对您有帮助

8、骨髓片、血涂片主要依据瑞氏染色观察细胞，为什么还需要其他化学染色？比如铁染色、过氧化物酶染色等。

骨髓片、血涂片主要依据瑞氏染色观察细胞，为什么还需要其他化学染色？比如铁染色、过氧化物酶染色