1、骨髓间充质干细胞分离的方法有几种
目前常用的分离MSC的方法主要有全骨髓法和密度梯度离心法，全骨髓法即根据干细胞在低血清培养基中有贴壁优势特性，定期换液除去不贴壁细胞，从而达到纯化及扩增MSC的目的。密度梯度离心法即根据骨髓中各细胞成分比重的不同，分离单核细胞进行贴壁培养。二者本质上无多大区别。随着对MSC表面抗原认识的深入，又有人利用免疫方法如流式细胞仪法、免疫磁珠法等对其进行分离纯化。但经过流式或磁珠分选后的细胞出现了增殖缓慢等一些问题，加之成本较高和技术的难度，在某种程度上限制了这些方法的广泛应用。
2、从血液中分离造血干细胞的原理是什么？
造血干细胞储存在骨髓血中，在百从外周血采集前，要注射集落刺激因子（就是动员剂度），使得骨髓血中造血问干细胞释放到外周血，大大增加外周血中造答血干细胞浓度。达到一定浓度后，通过体外循回环，利用离心原理来分离和提取造血干细胞。原理和采集答血小板相同
3、骨髓干细胞的分离
骨髓抽取及骨髓干细胞的分离纯化：患者在无菌条件下从髂后上棘进行穿刺，分不同部位抽取骨髓l0～20 mL，置于肝素化的无菌离心管中，骨髓离心取出脂肪层
4、为什么捐献造血干细胞时分离出干细胞之后再把剩余的血液成分输回捐献者体内
50-100MM?
我想你是搞混淆了
没有50-100MM这个数字
在报名做采样的时候,需要抽取5-10ML血液样本进行HLA分型检测.你是不是指这个?
这只是做分型实验用的血液样本,配型成功之后才会进行真正的捐献
"需要处理1万毫升血量"这个就是需要进行血液分离与回输的原因了.就是说1万毫升的血液经过循环才能提取出需要量的干细胞.只提取患者需要的造血干细胞,血液中的其他成分回输到你的体内,还要维持你身体的正常运转啊
5、捐献骨髓时，为什么把分离过的血液要输回捐献者体内呢？不输回可以吗？
采集外周血造血干细胞时,每次采集循环的血量一般都在10000毫升以上,相当于一个版体重50公斤人身体两权倍的血量.必须把血液回输给捐献者.要不然就不可能循环10000毫升的血.
血液循环的时候走的都是密闭的管路,血液不和血液分离机接触,血液分离机只是提供一个动力.血液成分单采的耗材是非常安全的.
6、如何从小鼠骨髓中分离和培养DC
拉颈处死小鼠，无菌剥离股骨和胫骨，用Hank’S冲出骨髓细胞，PBS洗
涤1次，用0．83％Tris—NH4CL裂解红细胞，RPMI1640培养液洗涤2次，调整细胞浓度为1×106个／mL，
并加入rmGM—CSF(1000 U／mL)和rmlL－4(500 U／mL)，接种于24孔培养板，置于37~C，5％CO2孵箱中
培养．第3天轻轻摇动培养板，吸走大部分悬浮细胞，加人等量的培养液，并补足细胞因子．隔日半量换液
1次，第7天收集悬浮或稍微贴壁的细胞．
7、骨髓单个核细胞分离，目的用于RNA的提取
用淋巴细胞分离液就可以了。天津生产的，90元一瓶，200毫升。
1 骨髓液3毫升，用3毫升PBS稀释混匀；
2 平铺于6毫升淋巴细胞分离液液面上，保持界面清晰；
3 2000转/分水平离心30分钟；
4 1毫升针头吸取中间云雾层；
5 用PBS洗涤两次。
骨髓液用抗凝管收集就可以了，不要放到4度冰箱，避免溶血；淋巴细胞分离液使用前室温平衡；离心机必须为水平离心，不要突然刹车，应使速度缓慢下降；骨髓液和淋巴细胞分离液必须保持界面清晰。