骨髓嵌合体小鼠

1、嵌合体形成的原因

卵裂过程中发生染色体的不分离或丢失以及结构畸变就会造成嵌合体产生。

嵌合体
遗传学上用以指不同遗传性状嵌合或混杂表现的个体，亦指染色体异常类型之一。有时也有同一器官出现不同性状的生物体的意思。出现该病状的人员往往伴随精力极度旺盛,有时出现多重人格的精神错乱症状。目前临床还出现偶尔患者血型变换的症状。

2、嵌合体形成的原因有哪些？

回答如下：

卵裂过程中发生染色体的不分离或丢失以及结构畸变就会造成嵌合体产生。

3、如何设计条件性基因敲除小鼠模型

小鼠和大鼠可谓是生命科学实验室里的明星,成功的小鼠和大鼠模型可谓是生命科学的好帮手.很多人可能想自己设计或是了解条件性基因敲除小鼠,在此做个小结,供大家参考.
条件性基因敲除小鼠的设计利用了Cre/LoxP或Flipe/Frt原理.它们都是位点特异性重组酶系统.这里以Cre/LoxP系统为例.比如在待敲除的一段目标DNA序列的两端各放置一个loxP序列,得到flox(flanked by loxP)小鼠.将flox小鼠与带有细胞特异性表达Cre的小鼠交配繁殖,以获得在特定细胞里把目标基因敲除掉的小鼠,即条件性基因敲除小鼠.此外,若与控制Cre表达的其他诱导系统(比如CreERT2)相结合,还可以对某一基因同时实现时空两方面的调控.
Cre/loxP系统来源于噬菌体,可以介导位点特异的DNA重组.该系统含有两个组成成分：一个是一段长34bp的DNA序列(LoxP序列),含有两个13 bp的反向重复序列和一个8 bp的核心序列.LoxP的方向由中间这8个碱基决定.这段LoxP序列是Cre重组酶识别的位点.令一个组成部分是Cre重组酶.它是由噬菌体编码的一种由343个氨基酸组成的蛋白.Cre可以介导两个LoxP位点的重组,从而引起两个LoxP之间DNA序列的缺失.如果将Cre重组酶cDNA通过基因工程的手段置于组织或细胞特异性启动子之下,可以得到Cre组织/细胞特异性表达的Cre小鼠,也叫Cre工具小鼠.跟Flox小鼠交配之后,可以得到条件性基因敲除小鼠.
所谓Flox小鼠是指在某个基因的某个外显子两侧各放一个LoxP序列.这段序列就是Flanked by LoxP,也就叫做Flox小鼠.这种Flox小鼠一般要通过设计构建打靶载体、胚胎干细胞重组、囊胚显微注射、和嵌合体小鼠传代来获得.这种小鼠跟Cre工具小鼠交配,由于Cre的表达,介导两个LoxP位点序列的重组,从而敲除两个LoxP之间的序列.由于不同Cre工具小鼠的Cre表达有组织/细胞特异性,就可以达到在不同组织、细胞里特异性敲除目的基因的目标.比如上皮细胞、胸腺细胞、T细胞、B细胞、心肌细胞、肠道、肺脏等.
那如何设计条件性基因敲除小鼠呢?这里所说的设计主要是Flox小鼠的设计.所谓条件性敲除,是说除了特定细胞外,其它细胞里面没有任何的基因表达异常.一般情况下,不要在第一个外显子前面放置LoxP序列.因为第一个外显子前面一般是启动子.放置LoxP序列有可能会破坏或改变启动子活性.条件性敲除一般是敲掉最早引起移码突变的外显子.这样的话,最好不要敲除有起始密码子ATG的外显子.否则的话,基因可能会利用ORF内的ATG编码一个缺少部分N端序列的蛋白,这个蛋白很可能有全部或部分野生蛋白的功能.在选择要敲除的外显子的时候(各放一个LoxP在一个外显子的两侧),该外显子的碱基数目不能是3N,否则新基因pre-RNA拼接得到的mRNA不能产生移码突变.会产生一个与野生蛋白相比少了一段中间序列的新蛋白.如果一个外显子的碱基数目是3N+1或3N+2,敲除这个外显子之后会产生移码突变,就可以达到基因敲除的目的.筛选要敲除(Floxed)的外显子的时候,一般是从最上游的外显子开始筛选适合敲除的外显子.需要注意的是,一般的dna分析软件不能确定内含子和外显子的边界,需要仔细核对.95%以上的边界遵循gt/ag边界原则.也可以在Ensembl上查一个基因的外显子和内含子.这个网站上的结果绝大部分是正确的.但也需要仔细核对.毕竟基因敲除小鼠研发是一个时间比较长的过程,需要特别小心.前期做多少的考虑都不嫌多.这些原则只是对一般课题的考虑.特殊情况需要特殊处理.

4、嵌合体小鼠的免疫系统问题

A和B都不会相互排斥， 由于在胚胎期间免疫系统发生了一种称为免疫耐受的机制，对对方的MHC抗原发生了耐受，所以双方的免疫系统对另一方的抗原处于默认“放行”的状态；器官移植时候，没有这种免疫耐受的机制，只能通过化学药物进行抑制免疫系统的方法减缓排异反应。具体可以百度“免疫耐受”、“MHC”、“HLA”等抗原。谢谢！

5、如何高效制备生殖系传递的嵌合体小鼠

嵌合体是指动物的两颗受精卵融合在一起成为一个个体并成长。遗传学上用以指不同遗传性状嵌合或混杂表现的个体，亦指染色体异常类型之一。转基因小鼠制备过程中必须要经历的一个过程，所以基因敲除小鼠必须要用到嵌合体小鼠。A和B都不会相互排斥,由于在胚胎期间免疫系统发生了一种称为免疫耐受的机制,对对方的MHC抗原发生了耐受,所以双方的免疫系统对另一方的抗原处于默认“放行”的状态；器官移植时候,没有这种免疫耐受的机制,只能通过化学药物进行抑制免疫系统的方法减缓排异反应.具体可以百度“免疫耐受”、“MHC”、“HLA”等抗原.

6、求助有无条件性T细胞敲除的小鼠

小鼠和大鼠可谓是生命科学实验室里的明星,成功的小鼠和大鼠模型可谓是生命科学的好帮手.很多人可能想自己设计或是了解条件性基因敲除小鼠,在此做个小结,供大家参考.
条件性基因敲除小鼠的设计利用了Cre/LoxP或Flipe/Frt原理.它们都是位点特异性重组酶系统.这里以Cre/LoxP系统为例.比如在待敲除的一段目标DNA序列的两端各放置一个loxP序列,得到flox(flanked by loxP)小鼠.将flox小鼠与带有细胞特异性表达Cre的小鼠交配繁殖,以获得在特定细胞里把目标基因敲除掉的小鼠,即条件性基因敲除小鼠.此外,若与控制Cre表达的其他诱导系统(比如CreERT2)相结合,还可以对某一基因同时实现时空两方面的调控.
Cre/loxP系统来源于噬菌体,可以介导位点特异的DNA重组.该系统含有两个组成成分：一个是一段长34bp的DNA序列(LoxP序列),含有两个13 bp的反向重复序列和一个8 bp的核心序列.LoxP的方向由中间这8个碱基决定.这段LoxP序列是Cre重组酶识别的位点.令一个组成部分是Cre重组酶.它是由噬菌体编码的一种由343个氨基酸组成的蛋白.Cre可以介导两个LoxP位点的重组,从而引起两个LoxP之间DNA序列的缺失.如果将Cre重组酶cDNA通过基因工程的手段置于组织或细胞特异性启动子之下,可以得到Cre组织/细胞特异性表达的Cre小鼠,也叫Cre工具小鼠.跟Flox小鼠交配之后,可以得到条件性基因敲除小鼠.
所谓Flox小鼠是指在某个基因的某个外显子两侧各放一个LoxP序列.这段序列就是Flanked by LoxP,也就叫做Flox小鼠.这种Flox小鼠一般要通过设计构建打靶载体、胚胎干细胞重组、囊胚显微注射、和嵌合体小鼠传代来获得.这种小鼠跟Cre工具小鼠交配,由于Cre的表达,介导两个LoxP位点序列的重组,从而敲除两个LoxP之间的序列.由于不同Cre工具小鼠的Cre表达有组织/细胞特异性,就可以达到在不同组织、细胞里特异性敲除目的基因的目标.比如上皮细胞、胸腺细胞、T细胞、B细胞、心肌细胞、肠道、肺脏等.

7、为何基因敲除需要用到嵌合体小鼠

嵌合体是指动物的两颗受精卵融合在一起成为一个个体并成长。遗传学上用以指不同遗传性状嵌合或混杂表现的个体，亦指染色体异常类型之一。转基因小鼠制备过程中必须要经历的一个过程，所以基因敲除小鼠必须要用到嵌合体小鼠。

8、如何采用细胞融合方法纸杯黑白相间的嵌合体小鼠,如何鉴定

上帝啊 快来拯救这孩子吧

9、什么是嵌合体？它的发生机理是什么

遗传学上用以指不同遗传性状嵌合或混杂表现的个体，亦指染色体异常类型之一。有时也有同一器官出现不同性状的生物体的意思。出现该病状的人员往往伴随精力极度旺盛,有时出现多重人格的精神错乱症状。临床还出现偶尔患者血型变换的症状。

通常发生在合子形成后的卵裂或胚胎进入正常发育早期，在胚胎发育的不同阶段如果发生了突变，可以产生全身性或组织部分性嵌合体。

通常发生在合子形成后的卵裂或胚胎进入正常发育早期，在胚胎发育的不同阶段如果发生了突变，可以产生全身性或组织部分性嵌合体。

(9)骨髓嵌合体小鼠扩展资料

应用

嵌合体在果树园艺中有很高的经济价值。例如日本土桥红蜜柑是扇形嵌合体，在红色果皮上镶嵌有艳丽的黄色条纹。许多名贵的花卉也是嵌合体。嵌合体一般不能通过有性生殖保种，但可以采用组织培养方法保种和繁殖。果蝇的雌雄嵌合体及异表型小鼠是行为遗传学和发生遗传学研究的材料。

动物中的嵌合现象和表现形式常不同于植物。例如果蝇的雌雄嵌合体比较典型，它可以是身体的左半部为一种性别，右半部为另一种性别，或身体的前半部和后半部由两种不同性别的细胞分别组成。也可能是身体较多或较少的一部分为一种性别，其余部分为另一种性别等多种表现形式。由抗原不同的细胞所组成的嵌合体，则仅存在于哺乳动物中。

10、嵌合体幼鼠为什么是二倍体不是四倍体，图中只形成一个囊胚和一个小鼠吗？

图中确实只有一个囊胚和一个小鼠。

但所谓嵌合体，是2个受精卵因不明原因粘在一起发育，并发育成囊胚以及后续完整胚胎的过程。

在这个过程中，2个受精卵几乎仅仅是物理上粘在一起而已。没有发生细胞融合这个级别的活动。所以嵌合体的个体，所有体细胞都是2倍体，只不过不同器官可能可以得到基因型表现型完全不一样的细胞。