1、从血液中分离造血干细胞的原理是什么？
造血干细胞储存在骨髓血中，在百从外周血采集前，要注射集落刺激因子（就是动员剂度），使得骨髓血中造血问干细胞释放到外周血，大大增加外周血中造答血干细胞浓度。达到一定浓度后，通过体外循回环，利用离心原理来分离和提取造血干细胞。原理和采集答血小板相同
2、为什么我percoll法分离骨髓，总是没有细胞贴避
培养细胞有3种状态：贴壁、半贴壁、悬浮。对于贴壁生长的细胞来说，如果培养过程中发现细胞悬浮，则说明细胞生长不好或者死亡。对于另两类细胞来说，悬浮没什么不可以。 细胞贴壁生长时细胞生长的属性，贴壁生长的细胞还会抑制其增殖和活性，所以人们还要通过用稀释，分离，蛋白酶处理等方法使它们继续生长繁殖
3、骨髓间充质干细胞分离的方法有几种
目前常用的分离MSC的方法主要有全骨髓法和密度梯度离心法，全骨髓法即根据干细胞在低血清培养基中有贴壁优势特性，定期换液除去不贴壁细胞，从而达到纯化及扩增MSC的目的。密度梯度离心法即根据骨髓中各细胞成分比重的不同，分离单核细胞进行贴壁培养。二者本质上无多大区别。随着对MSC表面抗原认识的深入，又有人利用免疫方法如流式细胞仪法、免疫磁珠法等对其进行分离纯化。但经过流式或磁珠分选后的细胞出现了增殖缓慢等一些问题，加之成本较高和技术的难度，在某种程度上限制了这些方法的广泛应用。
4、骨髓单个核细胞分离，目的用于RNA的提取
用淋巴细胞分离液就可以了。天津生产的，90元一瓶，200毫升。
1 骨髓液3毫升，用3毫升PBS稀释混匀；
2 平铺于6毫升淋巴细胞分离液液面上，保持界面清晰；
3 2000转/分水平离心30分钟；
4 1毫升针头吸取中间云雾层；
5 用PBS洗涤两次。
骨髓液用抗凝管收集就可以了，不要放到4度冰箱，避免溶血；淋巴细胞分离液使用前室温平衡；离心机必须为水平离心，不要突然刹车，应使速度缓慢下降；骨髓液和淋巴细胞分离液必须保持界面清晰。
5、献骨髓是怎么抽取的
和目前常用的成分献血方式基本一样，一个手臂出血，一个手臂回血，血液在分离机中过一下，分离走造血干细胞，采集时间一般需要1-2次每次3-4小时吧，这个要看患者的体重来决定采集量。整个过程会有身体麻木等不适，也不方便活动。采集完成就会恢复了。
6、骨髓移植是怎么做的？？
（1）自体造血干细胞移植将自体正常或疾病缓解期的造血干细胞保存起来，在患者接受大剂量化疗后回输造血干细胞。
（2）同基因造血干细胞移植指同卵孪生之间的移植。
（3）异基因造血干细胞移植同胞人类白细胞抗原（HLA）相合、亲缘HLA不全相合或半相合、非亲缘HLA相合、非亲缘HLA不全相合等。
白血病患者和部分癌症患者是需要做骨髓移植的，白血病及其它癌症患者，做骨髓移植能够提高患者的生存期，有的患者通过做骨髓移植还治愈了癌症。除了做骨髓移植，白血病等癌症患者为达到延长生存期或提高治愈率的目的，还需要考虑长期用中药做抗血管治疗，中药有人参Rg3，在肿瘤发展中，它可抑制肿瘤新生血管生长，可诱导瘤体的凋亡。
7、如何从小鼠骨髓中分离和培养DC
1、 取骨髓，对倍稀释
2、 用滴管沿管壁缓慢加入淋巴细胞分离液(45度角倾斜，尽量产生气泡，起到缓冲作用)
3、 2000转，离心30分钟
4、 吸取白膜层，（沿管壁）交替多次吸取，加入5倍体积以上的PBS液
5、 1500转，离心15分钟（洗掉血小板）
6、 弃掉上清，留少许回流液，轻弹管壁，加入PBS液至50ml
7、 800转，离心10分钟，（洗掉红细胞）
8、 重复两至三次
9、 加入PBS液至50ml，计数:？个细胞
离心后铺板，1X1076孔板培养液，共铺20板。无血清1640+DNA酶12h后轻晃培养液，洗板后加入完全培养基和GM—CSF(1000U/ml)和IL—4(500U/lml)
10、 第三天每孔补加等体积的完全培养基和GM—CSF(1000U/ml)和IL—4(500U/lml) ，这时细胞部分悬浮
11、 第五天为imDC，+1LPS(1ug/ml),诱导至第七天，为mDC。
8、骨髓干细胞的分离
骨髓抽取及骨髓干细胞的分离纯化：患者在无菌条件下从髂后上棘进行穿刺，分不同部位抽取骨髓l0～20 mL，置于肝素化的无菌离心管中，骨髓离心取出脂肪层
9、捐献骨髓时，为什么把分离过的血液要输回捐献者体内呢？不输回可以吗？
采集外周血造血干细胞时,每次采集循环的血量一般都在10000毫升以上,相当于一个版体重50公斤人身体两权倍的血量.必须把血液回输给捐献者.要不然就不可能循环10000毫升的血.
血液循环的时候走的都是密闭的管路,血液不和血液分离机接触,血液分离机只是提供一个动力.血液成分单采的耗材是非常安全的.