1、骨髓细胞染色常用什么方法,各是用于何种检测。
骨髓细胞内外铁染色,是进行贫血分类的常用组织化学染色方法,一般均采用普鲁士兰染色法,该法虽操作简便,但若掌握不好,常使玻璃上沉积大量污染铁,无法判定结果,我们曾查阅多种材料,对该项试验的一些细节问题均无详细介绍。最近我们参照各家材料,经过多次试验从玻片处理试剂配制、试验的时间、温度、最后漂洗的手法复染时间的控制等步骤上,对细胞内外铁染色的方法进行探讨,摸索出了一套较满意的染色方法,现介绍如下。
【作者单位】: 黑龙江省宝泉岭农场医院
【关键词】: 骨髓细胞 铁染色 染色方法 组织化学 试剂配制 玻片处理 氰化钾 贫血分类 普鲁士兰 染色法
【分类号】:R361
【正文快照】:
骨髓细胞内外铁染色,是进行贫血分类的常用组织化学染色方法。一般均采用普鲁士兰染色法,该法虽操作简便,但若掌握不好,常使玻璃上沉积大量污染铁,无法判定结果,我们曾查阅多种材料,对该项试验的一些细节同题均无详细介绍。最近我们参照各家材料,经过多次试验从玻片处理试剂
2、骨髓细胞检查报告中的化学染色中的POX阳性13%是指什么?
POX是细胞的过氧化物酶染色,染色后,在显微镜下观察,细胞中有蓝黑色颗粒的为阳性,POX阳性13%就是指呈阳性的细胞占总细胞数的13%
3、急求骨髓涂片铁染色法技术流程
1)4%的盐酸溶液.:40ml(38%浓盐酸)+340ml蒸馏水
2)40g/L亚铁氰化钾液
3)碱性复红:1g复红+10ml无水乙醇+90ml(5%石碳酸溶液),用时取3ml加100ML水.
4)37%甲醛
4、瑞氏染色的步骤是什么?
操作步骤:
1.滴加瑞氏吉姆萨A液(约0.5ml-0.8ml)涂片上,并让染液覆盖整个标本染色1min;
2. 再将瑞氏吉姆萨B液加于A液上面(滴加量为A液的2-3倍),以嘴或洗耳球吹出微风使液面产生涟漪状,使两液充分混合,染色3-10min。(染血片时间可略短,染骨髓片时间应视细胞量多少而异)
3.水洗(冲洗时不能先倒掉染液,应以流水冲去,以防有沉渣沉淀在标本上),干燥、镜检。
注意事项:
1. 染色时间须视何种标本,涂片厚度,有核细胞多少,何种细胞及室温等而定;通常染血液涂片时滴加B液后染2-4分钟,染骨髓片则应不少于8分钟;气温较低时,可适当延长染色时间。染色结果如出现嗜酸性粒细胞变碱,则考虑是否染色时间太长所致。
2.做骨髓涂片时,因为骨髓纤维蛋白含量较高,凝固较快,所以涂片过程要快。骨髓不可用草酸盐抗凝,否则会使血细胞核变形,核染色质致密,胞浆空泡形成,出现草酸盐结晶。
3.染液量需充足,勿使染液蒸发干燥,以防染料沉着于涂片上。
4.做细胞染色时,当天气寒冷或湿度较大时,应于37℃温箱中保温促干,以免细胞变形缩小或在染色时脱片。
5.染料放置时间越长,染色效果越好。
6. 本试剂应由专业人员使用。
拓展资料
Wrfeht和Giemsa都于1902年报告了各自的新的血液学染色剂,其主要特点是在制备多色性亚甲蓝(主要指天青B)方面做了改进,使血细胞和疟原虫着色较好,操作简便。
上述染色法均是含伊红和亚甲基蓝衍生物的复合染料。在临床检验工作中,瑞氏染色法常用于血液、其他体液、分泌物和排泄物涂片中各种细胞的染色,有利于在显微镜下观察细胞形态及对细胞进行分类检查。
【染色原理】
瑞氏染色分两相进行,第一相是酸性染料伊红与细胞中的碱性物质如血红蛋白、嗜酸性颗粒等结合;碱性染料天青B与细胞中的酸性物质如核染色质(chro-matin)、特异中性颗粒、血小板及富含核蛋白的胞质结合。第二相是天青B和伊红在适宜条件下形成紫色的天青B一伊红复合物(azure B-eosin complex),这种复合物是形成Romanowsky-Giemsa效应的基础。
Romanowsky-Giemsa效应包括:①白细胞核染色质染成紫色,疟原虫的染色质染成红色;②中性粒细胞的颗粒及血小板颗粒区染成紫色;③产生本效应必须有两种染料参与,一种是天青B,另一种是伊红。
Wittekind(1985)指出,天青B与DNA分子中的磷酸基结合,而伊红既与DNA分子中的阳离子部位结合,又与天青B结合,与天青B的结合力来源于电子供一受体的电子转移力,天青B的甲氨基(-NHCHs)与伊红分子中的叛基(-COOH)间形成氢键。因此,天青B是噻嗪类染料中能与伊红形成复合物的最佳选择,因为拥有四个甲基侧链的亚甲蓝不能以氢键与伊红结合。
甲醇除作为染料的溶剂,能将瑞氏染料解离成带正电荷的天青B和带负电荷伊红外,因其具有脱水力,还可将细胞固定为一定形态,并使蛋白沉淀为颗粒状、网状结构,增加细胞与染料的接触表面,增强染色效果。
细胞中的各种有机物质(特别是蛋白质)、染料等对环境的州值非常敏感。如环境偏酸,氢离子增多,降低对碱性染料的亲和力;增强伊红着色,出现异常红染;相反,则可出现异常蓝染。最佳环境应维持在PH值6 4~6、8.因此,必须使用缓冲溶液。
参考资料:
网络_瑞氏染色
瑞氏染色原理及方法_医学教育网
5、骨髓什么颜色
骨髓是存在于长骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如骼骨)的稀松骨质间的网眼中,是一种海绵状的组织。能产生血细胞的骨髓略呈红色,称为红骨髓。人出生时,红骨髓充满全身骨髓腔,随着年龄增大,脂肪细胞增多,相当部分红骨髓被黄骨髓取代,最后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。此种变化可能是由于成人不需全部骨髓腔造血,部分骨髓腔造血已足够补充所需血细胞。当机体严重缺血时,部分黄骨髓可被红骨髓替代,骨髓的造血能力显著提高。
其它动物也有骨髓的.
研究人员在青蛙化石中找到黄色的脂肪骨髓和制造红血球的红色骨髓
照此推算,猪和鸡的骨髓和人应该相近或相同.
6、骨髓片、血涂片主要依据瑞氏染色观察细胞,为什么还需要其他化学染色?比如铁染色、过氧化物酶染色等。
骨髓片、血涂片主要依据瑞氏染色观察细胞,为什么还需要其他化学染色?比如铁染色、过氧化物酶染色
7、小鼠骨髓细胞染色实验中有哪些材料可用作制备染色标本,其基本特性是什么
在明视野下,若能看清的话就不要染色了。因为在无法观测清楚时,才会染色。通常染色剂会影响微生物的活性,更多的是使细胞死亡。即使是活性染料也有一定的影响。 根据经验 不染色完全可以看见显微结构 细胞膜 细胞壁 液泡 核 基本可以看见 叶绿体隐约可以看见 当然分辨率和光圈大小需要调整到最佳状态 鞭毛可以隐约看见 霉菌放线菌细菌的形态当然是不染色完全可以看 如果想看更细致些 比如线粒体 高尔基体 核膜 微囊体 膜泡等亚显微结构 需要用特定的分子染料进行染色再进行观察 如果你不需要做活体实验而只是观察的话,染色吧,清晰度好一些。