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骨髓片试剂

发布时间:2020-10-06 19:37:41

1、免疫组化鉴定骨髓间充质干细胞买什么试剂盒

单靠免疫组化的方法是不能定量,定性的。

Bone Mesenchymal Stem Cells 作为一个细胞群体,还没有发现有特定细胞表面marker. 对于那些可以代表自我更新和分化的marker, 也不清楚到底要发现哪一个的表达才能确定该细胞就是BMSC。

目前常用的方法,就是采用培养,colony-forming unit-fibroblasts (CFU-F)这个方法。一般BMSC可以24-48小时贴壁。

流式细胞计数,比如STRO-1,但是一般认为STRO-1阳性的细胞更趋向于造血干细胞,和BMSC简单区别还不是很清楚。

这里有个培养分化的产品
http://www.rndsystems.com/pdf/SC020.pdf

2、骨髓的基因组提取可以用提取血液基因组的试剂盒吗

这个好像不可以,因为它们的成分不同,你需要查一下相关的资料的。具体的步骤可以参考下面的:1.根据白细胞计数(个体每个细胞约含6pg基因组DNA,要获得30L gDNA 约需5×106个白细胞):取外周血5~30ml或骨髓1~6ml,加入0.1体积的2%EDTA, pH7.4,混匀。  2.抗凝血和骨髓于1500r/min离心10分钟,去上层血浆。 3.加入2倍体积的红细胞裂解液, 颠倒离心管使其混匀,于1500r/min 离心10分钟,弃去含Hb的上清,再加入5~10ml 红细胞裂解液, 同样混匀、离心、弃上清。  4.加入10ml PBS重悬白细胞沉淀,于1500r/min离心10分钟。弃上清。  5.加入2ml TES溶液重悬白细胞沉淀。  6.吸取白细胞液加入6ml DNA提取缓冲液中,边加边混匀。 7.加入蛋白酶K至终浓度为100~200mg/L,于37℃消化过夜或45~55℃消化3~4小时,其间振摇几次。  8.加入等体积饱和酚抽提,来回颠倒离心管并适当振摇以使其混匀,如太粘稠可追加适量TES溶液,于3500r/min离心10分钟, 吸取含DNA的水相至另一离心管。  9.加入等体积酚/氯仿/异戊醇(25∶24∶1) ,同上混匀,于2500r/min离心5~10分钟,余同上一步骤,可重复1~3次。10.加入等体积氯仿/异戊醇,混匀,2500r/min 离心5分钟, 吸取水相DNA至小烧杯中;加入0.2体积的10mol/L醋酸铵, 混匀;加入2倍体积无水乙醇,混匀;DNA自然沉淀出来,倒去液体。  11.加入10~20ml  70%乙醇洗DNA, 重复1~2次,每次均倒去液体,让DNA小块于室温干燥, 但不可过度干燥,以防其难于溶解。  12.加入1~10ml TE, pH8.0, 于室温或55℃水浴溶解DNA;再加入0.5体积7.5mmol/L醋酸铵, pH7.5,混匀;加入2倍体积无水乙醇, 混匀;沉淀DNA后倒去液体, 同样用70%乙醇洗DNA 2~3次, 再使DNA小块干燥。  13.用适量TE,pH8.0, 溶解DNA, 浓度以0.4~0.6g/L (ug/uL)为宜,于4℃保存。

3、哪个品牌转染试剂可以转染BMDMs细胞(小鼠骨髓来源的巨噬细胞)?

已经发表文章转染BMDMs细胞(小鼠骨髓来源的巨噬细胞文章如下:

清华大学免疫学研究所发表文章

清华大学用invigentech产品

清华大学

清华大学免疫学研究所

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