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骨髓散开

发布时间:2020-09-21 11:29:17

1、孝应该怎么尽

来自国家老龄委最新调查报告 据国家老龄委最新统计,我国60岁以上老人已达1.2亿。老人问题已经成为一个极为复杂且紧迫的社会问题。今天,我们究竟应该如何敬孝?为此,有关部门对北京、上海、深圳等一些代表城市进行了调查。本次调查选取了一个特定的视角???在中国家庭中人们对“孝”这个传统观念是怎样对待的。 什么是“孝” 不同年龄层的受访者,对“孝”的含义,接受程度各不相同。 即将退休的老教授杨先生指出:“孝”,其实就是顺从和尊重。像我们五六十岁这代人,从小就被教育要孝敬老人,周围的人都这么做,你也就深入骨髓地接受了它。上有老、下有小,再苦再累都得对得起良心,服侍老人从来都是顺着,也没觉得烦。 38岁的出租车司机纪某说:“孝”就是哄,人老了心眼儿都小,你只要心里有数,表面上哄着,顺着老人不就行了一大家子住这么挤,做儿女的应该带头造个好气氛,大家融洽了,老人也特爱帮着你买菜做饭看小孩,分担家务,这不挺好吗? 在校大学生小李觉得“孝敬”应该是尊敬的意思,是建立在子女对父辈爱的基础上的。“世上并没有无缘无故的爱,父母养育我们,双方有了感情,就有了爱,也就有了孝敬,这应该是一种发自内心的冲动,而不是被教育出来的麻木的机械的操作。” 看起来,对老年人来说,文化基因中“孝”的观念早已被教得根深蒂固了,这是种自自然然的依辈份次序所定的东西;中年人务实,为家庭和睦,把孝敬当作一副润滑剂;青年人则注重内心体验,由爱而孝敬,总有那么点审美的意味。 “孝”与“不孝” 怎样算“孝”,怎样算“不孝”,这是否应该有个标准80多岁的陈奶奶夸起了她的儿媳妇:六十多了还伺候我,喂药喂饭,端屎端尿的,没一句怨言。我把她人也累老了,这孩子真孝顺! 退休工人王大爷提起他儿子眼泪就下来了:久病床前无孝子,我不怪他。他工作那么忙,我这又是高血压又是心脏病的,净给他添事儿!他爱骂就骂两句吧,反正别不管我就行。问到他儿子算不算“不孝”,老人连说:不算,不算。 目前我国城乡三世同堂、四世同堂的家庭普遍存在。因此许多人从服侍的满意程度上对“孝”与“不孝”加以区分。从对老年人赡养与否的角度看,大多数受访者倾向于将“养不养父母”作为一条衡定“孝”与“不孝”的标准。 关于“孝”的表达 在行为层面,怎样的举动才能在日常生活中给老人留下“孝”的印象呢? 小刘是某公司职员,与她先生住在一起,他们小两口每周六周日都要带上孩子去看两家老人。小刘母亲说:“两口子真孝顺,知道我们老人怕孤独每礼拜都来给我们添乐儿!”小刘说,看望老人其实是一种爱的表示,不住在一起,大家互相想着,见了面会格外亲。 老王夫妇都是某研究所的研究员,他们唯一的儿子现在美国定居。提起儿子,他们总是那么激动:“他特孝顺,知道我们惦记着他,老往家打电话写信,逢年过节一定寄张卡回来。其实寄钱寄物倒不需要,报个平安我们也就踏实了。” 朱小姐很早就离开父母,在时间上给予父母的比较少,但她认为这并不妨碍她做个孝女。她认为孝顺与否并不以陪伴父母时间的长短来衡量,最主要的是,自己要过得好,使父母放心、开心。这就是她对父母所能做到的最大的孝顺了。如果整天陪在父母身边,却又处处让他们操心,那才叫不孝呢! 由此可见,不和父母同住的子女其实更能够让父母感觉他们的孝顺这主要是因为他们更注重行为的表达。

2、花药离体培养中花药应该怎样消毒?

要的话就联系我(点我可见,我一般三小时内必定回复,如果过了一天还是没有回音的话请使用其他邮箱联系我),我看过了,其实关键的步骤也就几点,不过既然有整个流程的话我想你总归多多益善的。

提高寒地水稻花药培养效率的几个关键技术 CAJ下载 PDF下载

【英文篇名】 Critical Technique Problems on Improving Anther Culture Efficiency of Cold Region Rice
【作者】 关世武;
【英文作者】 Guan Shiwu(Rice Research Institute; Heilongjiang Academy of Agricultural Sciences; Jiamusi 154026);
【机构】 黑龙江省农业科学院水稻研究所;
【刊名】 中国农学通报 , 编辑部邮箱 2005年 07期 ASPT来源刊 CJFD收录刊
【英文刊名】 Chinese Agricultural Science Bulletin
【中文关键词】 花药培养; 水稻; 寒地;
【英文关键词】 Anther culture; Rice; Cold region;
【中文摘要】 论述了寒地水稻花药培养操作规程中应注意的几个关键环节,以便使该项技术更好地应用于水稻育种,提高工作效率。①根据器官形态指标外推法选择花粉发育处于单核靠边期的幼穗,进行6 ̄8℃低温预处理12d左右,可提高愈伤组织诱导率;②愈伤组织转移大小以直径1 ̄2mm为宜,当绿苗长至4cm左右时及时进行壮苗培养;③做好接种材料、室内、人员的消毒和卫生工作,降低污染率,加强温室等的管理。
【英文摘要】 Some critical technique problems are discussed in this paper, which deserve specially attention in our specific practice so as to enable this technique to better applied to breeding purpose, and to improve efficiency. ① Based on extrapolated organ shape criteria, we select ears that are in uninucleate period, carry out pretreatment in a 6~8℃ low-temperature condition for about 12 days, and callus inction rate can be enhanced in this way. ② 1~2mm diameter should be the appropriate size for translocated cal...
【DOI】 CNKI:ISSN:1000-6850.0.2005-07-012

【篇名】 羽衣甘蓝花药离体培养研究 CAJ原文下载 PDF原文下载
【作者】 黄普乐. 吴伟锋. 孙崇波. 蒋桂华. 张慧琴. 谢鸣.
【刊名】 浙江农业科学 2005年02期 编辑部Email
《中文核心期刊要目总览》来源期刊 “中国期刊方阵”入选期刊 ASPT来源刊 CJFD收录期刊
【机构】 浙江大学农业与生物技术学院. 广西岑溪市园林管理处. 浙江省农业科学院园艺研究所. 浙江省农业科学院园艺研究所 浙江杭州310029浙江省农业科学院园艺研究所. 浙江杭州310021 . 广西岑溪543200 .
【关键词】 羽衣甘蓝. 花药. 离体培养.
【聚类检索】 同类文献 引用文献 被引用文献
【摘要】 以羽衣甘蓝的花药为外植体,通过不同消毒处理时间,采用不同分化阶段的花药、不同激素浓度配比对羽衣甘蓝花药进行离体培养,筛选出最佳消毒处理时间、最佳分化阶段的花药、最佳诱导分化培养基。结果表明,用羽衣甘蓝花蕾大小为4~5mm时期的花药,经01%HgCl2消毒处理8min,在MS+BA3mgL+NAA03mgL诱导分化培养基中诱导愈伤组织及不定芽的总体效果最好
【光盘号】 AGRI0504S1

3、免疫组化结果CD3(个別+)/CD20(散开+)/CD38(散开+)/CD138(散开+)/kAP

CD3(+)1.T-细胞淋巴瘤。(-)多形性淋巴瘤和间变性大细胞淋巴瘤。
CD20(+)1. B细胞淋巴瘤。2.毛细胞白血病。

CD38(+)浆细胞瘤。
CD138(+)浆细胞瘤。

KaPPa(+)浆细胞瘤。
提示浆细胞瘤(多发性骨髓瘤)。

4、盘古是怎么开天地的

盘古开天
传说在天地还没有开辟以前,宇宙就像是一个大鸡蛋一样混沌一团.有个叫做盘古的巨人在这个"大鸡蛋"中一直酣睡了约18000年后醒来,发现周围一团黑暗,他左右摸索,发现身边有一柄巨斧,也是他建起斧头,挥舞着向黑暗劈去。
一声巨响,"大鸡蛋"碎了,千万年的混沌黑暗被搅动了,其中又轻又清的东西慢慢上升并渐渐散开,变成蓝色的天空;而那些厚重混浊的东西慢慢地下降,变成了脚下的土地.盘古站在这天地之间非常高兴.盘古很怕天地再合拢起来还变成以前的样子,他就用手撑着青天,双脚踏着大地,让自己的身体每天长高一丈,天地也随着他的身体每天增高一丈.这样又过了18000年,天越来越高,地越来越厚,盘古的身体长得有90000里那么长了.
盘古凭借着自己的神力终于把天地开辟出来了.可是,盘古也累死了.盘古临死前,他嘴里呼出的气变成了春风和天空的云雾;声音变成了天空的雷霆;他的左眼变成了太阳,右眼变成了月亮;头发和胡须变成了夜空的星星;他的身体变成了东、西、南、北四极和雄伟的三山五岳;血液变成了江河;筋脉变成了道路;肌肉变成了农田;牙齿、骨骼和骨髓变成了地下矿藏;皮肤和汗毛变成了大地上的草木,汗水变成了雨露.传说,盘古的精灵魂魄也在他死后变成了人类.所以,都说人类是世上的万物之灵.

5、人体内的战争是什么?

在我们生活的自然环境中,到处都是人眼看不见的微生物,数量极其庞大,其中有许多是危害人们身体健康的病菌和病毒。这些小坏蛋飘浮在空气中,潜伏在饮用水中,聚集在我们的皮肤和粘膜上,寻找一切机会侵入人体兴风作浪,进行破坏活动。

为了对付这些入侵者,人体内组成了“多兵种”的保卫部队,警惕地守卫在人体各部位,随时准备消灭来犯之敌。

在进犯的敌人中,最可怕的也许要算病毒了。病毒的个体极小,全部构造也极简单,仅仅是一个外包蛋白质壳的基因束,但它的危害却十分严重,感冒等病就是它引起的。当病毒侵入人体细胞后,会以极快的速度增殖出千万个相同的新病毒。大量的新病毒会把细胞撑裂,最后导致细胞死去。当它们摧毁了一个细胞后,又很快四处散开,再去侵害邻近的细胞。

面对病毒的大举进犯,人体的保卫部队迅速行动起来,首当其冲的是由骨髓诞生的白血球细胞,它们兵分3路,即分成吞噬细胞、T细胞和B细胞,各有所长,迅速赶往入侵地点。

最先赶到现场的是吞噬细胞,它是人体免疫系统中的清洁工,专门监视人体中的不正常迹象,一旦发现可疑之物就毫不客气地吞入消化。它没有选择性,在肺部,吞噬细胞会吞食随呼吸带入的尘埃和各种污染物微粒。要是皮肤受了伤,伤口附近的血管会扩张,引起发红肿胀,吞噬细胞通过扩张的血管游来,开始吞吃一切入侵的微生物。同样,吞噬细胞碰上了被病毒撑破的细胞残骸,也会将这残骸连同部分病毒一起吞下。但在这场与病毒的激烈战斗中,仅仅靠吞噬细胞是无法全歼入侵者的,它只能起到阻止病毒侵入邻近细胞的作用。

巡逻部队发现强敌后,马上向司令部发出警报。于是,另一路称为“巨噬细胞”的部队马上赶来增援,它们一边吞噬病毒,一边从入侵者身上采取特殊的片段——抗原,并把抗原摆在自己细胞的表面。在体内巡游的T细胞一见这种抗原就会警觉起来。充当辅助作用的T细胞通过化学信号把这一紧急情况传递给另一类杀伤型T细胞,催促它们火速繁殖成一支庞大的军队,冲向受感染的细胞,破细胞膜而入。每一个病毒都会被一个杀伤型T细胞紧紧嵌合在一起而被消灭。

辅助型T细胞除能招来杀伤型T细胞外,还会向集聚在淋巴结中的第三路兵马B细胞发出警报。在这里B细胞产生出一种被称为“抗体”的化学武器,专门粘附在入侵者的身体表面,使入侵者步履艰难,成为吞噬细胞的消灭目标。抗体本身也有杀伤力。

在人体内,侵略和反侵略的战争几乎每时每刻都在进行,其结果大多数以入侵者的失败而告终。然而遇到细菌和病毒的突然大规模偷袭,保卫部队一时猝不及防,我们就会患上传染病。一旦无法组成有效的防御战线,就得借助药物的帮助了。

6、盘古真正的身份叫什么?

盘古啊不是神其实就是原始社会最早期的人部落领袖之一,又称盘古氏,如今中国姓氏未知(神话内容是半真半假)。真正开天地的是光原子和离子量子化学反应简称宇宙大爆炸,形成太阳系和地球,那时候动物和人都没有何来的盘古呢?按顺序来说,盘古因该是中国风姓氏(伏羲女娲族人姓,嫡系后裔姓氏为姬)三皇之首燧人氏(又称帝俊)的近亲家属,盘古扺挡天灾救人,是最古老的英雄,他无所不能,能做到一般人做不到的事情才被称为万物之神。女娲又称娲皇、灵娲,最重点是称为风皇,女娲真名风里希更不用说,五色石现实名为打火石,不是用来补天而是学父亲燧人氏一样人工取火学会烤熟食物使人们不再生吃。女娲造人在历史上其实是最早的近亲结婚,当时风氏族人全死于天灾,女娲为了后代,和亲哥哥伏羲结婚,生下了一个儿子,那时候生孩子称为造人,不是泥土造人而是肚子造人。后来儿子有了两个妻子,两个妻子生下两个儿子轩辕氏,一个是黄帝一个是炎帝,后来蚩尤与夸父合作讨伐了战争,史称牧野之战。风氏是女娲一族的姓氏,如今中国有风姓分布,燧人氏是伏羲和女娲的父亲。






7、克隆技术

克隆技术其实就是从动物A上拿一个细胞,取出细胞核!再到同种动物B的身上拿一个细胞,去掉细胞核!把取出来的细胞核放到另一个去掉细胞核的细胞中!再把它放到同种动物母体C的子宫中!这样将C将会生出一个和A一模一样的动物来!还有就是直接拿一种动物的细胞放到另一种动物的身体里!让它繁殖出上面的那种动物!
也就是说!有了这种技术!只要有你的一个细胞!你就可以不死!但这种技术国际规定不能用人来做实验!所以还没有出现克隆人的情况!

8、什么是克隆技术?(要详细点)

克隆是英文clone的音译,简单讲就是一种人工诱导的无性繁殖方式。但克隆与无性繁殖是不同的。无性繁殖是指不经过雌雄两性生殖细胞的结合、只由一个生物体产生后代的生殖方式,常见的有孢子生殖、出芽生殖和分裂生殖。由植物的根、茎、叶等经过压条或嫁接等方式产生新个体也叫无性繁殖。绵羊、猴子和牛等动物没有人工操作是不能进行无性繁殖的。科学家把人工遗传操作动物繁殖的过程叫克隆,这门生物技术叫克隆技术。
克隆的基本过程是先将含有遗传物质的供体细胞的核移植到去除了细胞核的卵细胞中,利用微电流刺激等使两者融合为一体,然后促使这一新细胞分裂繁殖发育成胚胎,当胚胎发育到一定程度后,再被植入动物子宫中使动物怀孕,便可产下与提供细胞者基因相同的动物。这一过程中如果对供体细胞进行基因改造,那么无性繁殖的动物后代基因就会发生相同的变化。

克隆技术不需要雌雄交配,不需要精子和卵子的结合,只需从动物身上提取一个单细胞,用人工的方法将其培养成胚胎,再将胚胎植入雌性动物体内,就可孕育出新的个体。这种以单细胞培养出来的克隆动物,具有与单细胞供体完全相同的特征,是单细胞供体的“复制品”。英国英格兰科学家和美国俄勒冈科学家先后培养出了“克隆羊”和“克隆猴”。克隆技术的成功,被人们称为“历史性的事件,科学的创举”。有人甚至认为,克隆技术可以同当年原子弹的问世相提并论。

克隆技术可以用来生产“克隆人”,可以用来“复制”人,因而引起了全世界的广泛关注。对人类来说,克隆技术是悲是喜,是祸是福?唯物辩证法认为,世界上的任何事物都是矛盾的统一体,都是一分为二的。克隆技术也是这样。如果克隆技术被用于“复制”像希特勒之类的战争狂人,那会给人类社会带来什么呢?即使是用于“复制”普通的人,也会带来一系列的伦理道德问题。如果把克隆技术应用于畜牧业生产,将会使优良牲畜品种的培育与繁殖发生根本性的变革。若将克隆技术用于基因治疗的研究,就极有可能攻克那些危及人类生命健康的癌症、艾滋病等顽疾。克隆技术犹如原子能技术,是一把双刃剑,剑柄掌握在人类手中。人类应该采取联合行动,避免“克隆人”的出现,使克隆技术造福于人类社会。

克隆技术研究现状
一、克隆的早期研究
克隆一词是英文单词clone的音译,作为名词,clone通常被意译为无性繁殖系。同一克隆内所有成员的遗传构成是完全相同的,例外仅见于有突变发生时。自然界早已存在天然植物、动物和微生物的克隆,例如:同卵双胞胎实际上就是一种克隆。然而,天然的哺乳动物克隆的发生率极低,成员数目太少(一般为两个),且缺乏目的性,所以很少能够被用来为人类造福,因此,人们开始探索用人工的方法来生产高等动物克隆。这样,克隆一词就开始被用作动词,指人工培育克隆动物这一动作。

目前,生产哺乳动物克隆的方法主要有胚胎分割和细胞核移植两种。克隆羊“多莉”,以及其后各国科学家培育的各种克隆动物,采用的都是细胞核移植技术。所谓细胞核移植,是指将不同发育时期的胚胎或成体动物的细胞核,经显微手术和细胞融合方法移植到去核卵母细胞中,重新组成胚胎并使之发育成熟的过程。与胚胎分割技术不同,细胞核移植技术,特别是细胞核连续移植技术可以产生无限个遗传相同的个体。由于细胞核移植是产生克隆动物的有效方法,故人们往往把它称为动物克隆技术。

采用细胞核移植技术克隆动物的设想,最初由汉斯·施佩曼在1938年提出,他称之为“奇异的实验”,即从发育到后期的胚胎(成熟或未成熟的胚胎均可)中取出细胞核,将其移植到一个卵子中。这一设想是现在克隆动物的基本途径。

从1952年起,科学家们首先采用青蛙开展细胞核移植克隆实验,先后获得了蝌蚪和成体蛙。1963年,我国童第周教授领导的科研组,首先以金鱼等为材料,研究了鱼类胚胎细胞核移植技术,获得成功。

哺乳动物胚胎细胞核移植研究的最初成果在1981年取得——卡尔·伊尔门泽和彼得·霍佩用鼠胚胎细胞培育出发育正常的小鼠。1984年,施特恩·维拉德森用取自羊的未成熟胚胎细胞克隆出一只活产羊,其他人后来利用牛、猪、山羊、兔和猕猴等各种动物对他采用的实验方法进行了重复实验。1989年,维拉德森获得连续移核二代的克隆牛。1994年,尼尔·菲尔斯特用发育到至少有120个细胞的晚期胚胎克隆牛。到1995年,在主要的哺乳动物中,胚胎细胞核移植都获得成功,包括冷冻和体外生产的胚胎;对胚胎干细胞或成体干细胞的核移植实验,也都做了尝试。但到1995年为止,成体动物已分化细胞核移植一直未能取得成功。

二、克隆羊“多莉”的意义和引起的反响
以上事实说明,在1997年2月英国罗斯林研究所维尔穆特博士科研组公布体细胞克隆羊“多莉”培育成功之前,胚胎细胞核移植技术已经有了很大的发展。实际上,“多莉”的克隆在核移植技术上沿袭了胚胎细胞核移植的全部过程,但这并不能减低“多莉”的重大意义,因为它是世界上第一例经体细胞核移植出生的动物,是克隆技术领域研究的巨大突破。这一巨大进展意味着:在理论上证明了,同植物细胞一样,分化了的动物细胞核也具有全能性,在分化过程中细胞核中的遗传物质没有不可逆变化;在实践上证明了,利用体细胞进行动物克隆的技术是可行的,将有无数相同的细胞可用来作为供体进行核移植,并且在与卵细胞相融合前可对这些供体细胞进行一系列复杂的遗传操作,从而为大规模复制动物优良品种和生产转基因动物提供了有效方法。

在理论上,利用同样方法,人可以复制“克隆人”,这意味着以往科幻小说中的独裁狂人克隆自己的想法是完全可以实现的。因此,“多莉”的诞生在世界各国科学界、政界乃至宗教界都引起了强烈反响,并引发了一场由克隆人所衍生的道德问题的讨论。各国政府有关人士、民间纷纷作出反应:克隆人类有悖于伦理道德。尽管如此,克隆技术的巨大理论意义和实用价值促使科学家们加快了研究的步伐,从而使动物克隆技术的研究与开发进入一个高潮。

三、近3年来克隆研究的重要成果
克隆羊“多莉”的诞生在全世界掀起了克隆研究热潮,随后,有关克隆动物的报道接连不断。1997年3月,即“多莉”诞生后1个月,美国、中国台湾和澳大利亚科学家分别发表了他们成功克隆猴子、猪和牛的消息。不过,他们都是采用胚胎细胞进行克隆,其意义不能与“多莉”相比。同年7月,罗斯林研究所和PPL公司宣布用基因改造过的胎儿成纤维细胞克隆出世界上第一头带有人类基因的转基因绵羊“波莉”(Polly)。这一成果显示了克隆技术在培育转基因动物方面的巨大应用价值。

1998年7月,美国夏威夷大学Wakayama等报道,由小鼠卵丘细胞克隆了27只成活小鼠,其中7只是由克隆小鼠再次克隆的后代,这是继“多莉”以后的第二批哺乳动物体细胞核移植后代。此外,Wakayama等人采用了与“多莉”不同的、新的、相对简单的且成功率较高的克隆技术,这一技术以该大学所在地而命名为“檀香山技术”。

此后,美国、法国、荷兰和韩国等国科学家也相继报道了体细胞克隆牛成功的消息;日本科学家的研究热情尤为惊人,1998年7月至1999年4月,东京农业大学、近畿大学、家畜改良事业团、地方(石川县、大分县和鹿儿岛县等)家畜试验场以及民间企业(如日本最大的奶商品公司雪印乳业等)纷纷报道了,他们采用牛耳部、臀部肌肉、卵丘细胞以及初乳中提取的乳腺细胞克隆牛的成果。至1999年底,全世界已有6种类型细胞——胎儿成纤维细胞、乳腺细胞、卵丘细胞、输卵管/子宫上皮细胞、肌肉细胞和耳部皮肤细胞的体细胞克隆后代成功诞生。

2000年6月,中国西北农林科技大学利用成年山羊体细胞克隆出两只“克隆羊”,但其中一只因呼吸系统发育不良而早夭。据介绍,所采用的克隆技术为该研究组自己研究所得,与克隆“多莉”的技术完全不同,这表明我国科学家也掌握了体细胞克隆的尖端技术。

在不同种间进行细胞核移植实验也取得了一些可喜成果,1998年1月,美国威斯康星一麦迪逊大学的科学家们以牛的卵子为受体,成功克隆出猪、牛、羊、鼠和猕猴五种哺乳动物的胚胎,这一研究结果表明,某个物种的未受精卵可以同取自多种动物的成熟细胞核相结合。虽然这些胚胎都流产了,但它对异种克隆的可能性作了有益的尝试。1999年,美国科学家用牛卵子克隆出珍稀动物盘羊的胚胎;我国科学家也用兔卵子克隆了大熊猫的早期胚胎,这些成果说明克隆技术有可能成为保护和拯救濒危动物的一条新途径。

四、克隆技术的应用前景
克隆技术已展示出广阔的应用前景,概括起来大致有以下四个方面:(1)培育优良畜种和生产实验动物;(2)生产转基因动物;(3)生产人胚胎干细胞用于细胞和组织替代疗法;(4)复制濒危的动物物种,保存和传播动物物种资源。以下就生产转基因动物和胚胎干细胞作简要说明。

转基因动物研究是动物生物工程领域中最诱人和最有发展前景的课题之一,转基因动物可作为医用器官移植的供体、作为生物反应器,以及用于家畜遗传改良、创建疾病实验模型等。但目前转基因动物的实际应用并不多,除单一基因修饰的转基因小鼠医学模型较早得到应用外,转基因动物乳腺生物反应器生产药物蛋白的研究时间较长,已进行了10多年,但目前在全世界范围内仅有2例药品进入3期临床试验,5~6个药品进入2期临床试验;而其农艺性状发生改良、可资畜牧生产应用的转基因家畜品系至今没有诞生。转基因动物制作效率低、定点整合困难所导致的成本过高和调控失灵,以及转基因动物有性繁殖后代遗传性状出现分离、难以保持始祖的优良胜状,是制约当今转基因动物实用化进程的主要原因。

体细胞克隆的成功为转基因动物生产掀起一场新的革命,动物体细胞克隆技术为迅速放大转基因动物所产生的种质创新效果提供了技术可能。采用简便的体细胞转染技术实施目标基因的转移,可以避免家畜生殖细胞来源困难和低效率。同时,采用转基因体细胞系,可以在实验室条件下进行转基因整合预检和性别预选。在核移植前,先把目的外源基因和标记基因(如LagZ基因和新霉素抗生基因)的融合基因导入培养的体细胞中,再通过标记基因的表现来筛选转基因阳性细胞及其克隆,然后把此阳性细胞的核移植到去核卵母细胞中,最后生产出的动物在理论上应是100%的阳性转基因动物。采用此法,Schnieke等(Bio Report,1997)已成功获得6只转基因绵羊,其中3只带有人凝血因子IX基因和标记基因(新霉素抗性基因),3只带有标记基因,目的外源基因整合率高达50%。Cibelli(Science,1997)同样利用核移植法获得3头转基因牛,证实了该法的有效性。由此可以看出,当今动物克隆技术最重要的应用方向之一,就是高附加值转基因克隆动物的研究开发。

胚胎干细胞(ES)是具有形成所有成年细胞类型潜力的全能干细胞。科学家们一直试图诱导各种干细胞定向分化为特定的组织类型,来替代那些受损的体内组织,比如把产生胰岛素的细胞植入糖尿病患者体内。科学家们已经能够使猪ES细胞转变为跳动的心肌细胞,使人ES细胞生成神经细胞和间充质细胞和使小鼠ES细胞分化为内胚层细胞。这些结果为细胞和组织替代疗法开辟了道路。目前,科学家已成功分离到人ES细胞(Thomson等1998,Science),而体细胞克隆技术为生产患者自身的ES细胞提供了可能。把患者体细胞移植到去核卵母细胞中形成重组胚,把重组胚体外培养到囊胚,然后从囊胚内分离出ES细胞,获得的ES细胞使之定向分化为所需的特定细胞类型(如神经细胞,肌肉细胞和血细胞),用于替代疗法。这种核移植法的最终目的是用于干细胞治疗,而非得到克隆个体,科学家们称之为“治疗克隆”。

克隆技术在基础研究中的应用也是很有意义的,它为研究配子和胚胎发生,细胞和组织分化,基因表达调控,核质互作等机理提供了工具。

五、克隆技术存在的问题
尽管克隆技术有着广泛的应用前景,但离产业化尚有很大距离。因为作为一个新兴的研究领域,克隆技术在理论和技术上都还很不成熟,在理论上,分化的体细胞克隆对遗传物质重编(细胞核内所有或大部分基因关闭,细胞重新恢复全能性的过程)的机理还不清楚;克隆动物是否会记住供体细胞的年龄,克隆动物的连续后代是否会累积突变基因,以及在克隆过程中胞质线粒体所起的遗传作用等问题还没有解决。

在实践中,克隆动物的成功率还很低,维尔穆特研究组在培育“多莉“的实验中,融合了277枚移植核的卵细胞,仅获得了“多莉”这一只成活羔羊,成功率只有0.36%,同时进行的胎儿成纤维细胞和胚胎细胞的克隆实验的成功率也分别只有1.7%和1.1%,即使是使用“檀香山”技术,以分化程度较低的卵丘细胞为核供体,其成功率也只有百分之几。

此外,生出的部分个体表现出生理或免疫缺限。以克隆牛为例,日本、法国等国培育的许多克隆牛在降生后两个月内死去;到2000年2月,日本全国已共有121头体细胞克隆牛诞生,但存活的只有64头。观察结果表明,部分犊牛胎盘功能不完善,其血液中含氧量及生长因子的浓度都低于正常水平;有些牛犊的胸腺、脾和淋巴腺未得到正常发育;克隆动物胎儿普遍存在比一般动物发育快的倾向,这些都可能是死亡的原因。

即使是正常发育的“多莉”,也被发现有早衰迹象。染色体的末端被称为端粒,它决定着细胞能够分裂的次数:每一次分裂端粒都会缩短,而当端粒耗尽后细胞就失去了分裂能力。1998年,科学家发现“多莉”的细胞端粒比正常的要短,即其细胞处于更衰老的状态。当时认为,这可能是用成年绵羊的细胞克隆“多莉”造成的,使其细胞具有成年细胞的印记,但这一解释目前受到了挑战,美国马萨诸塞州的医生罗伯特·兰扎等用培养的衰老细胞克隆牛,得到6头小牛,出生5~10个月后发现这些克隆牛的端粒比普通同龄小牛要长,有的甚至比普通新生小牛的端粒还长。现在还不清楚这一现象的原因,也不清楚为何与“多莉“的情况有巨大差别。但这一实验说明,在一些情况下克隆过程能改变成熟细胞的分子钟,使其“恢复青春”,关于这种变化对克隆动物寿命的影响,还有待于进一步观察。

除了以上的理论和技术障碍外,克隆技术(尤其是在人胚胎方面的应用)对伦理道德的冲击和公众对此的强烈反应也限制了克隆技术的应用。但几年来克隆技术的发展表明,世界各科技大国都不甘落后,谁也没有放弃克隆技术研究。这一点上英国政府的态度非常具有代表性,在1997年2月底宣布中止对“多莉”研究小组投资后不到1个月,英国科技委员会就对克隆技术发表专题报告,表明英国政府将重新考虑这一决定,认为盲目禁止这方面的研究并不是明智之举,关键在于建立一定的规范利用它为人类造福。
一个细菌经过20分钟左右就可一分为二;一根葡萄枝切成十段就可能变成十株葡萄;仙人掌切成几块,每块落地就生根;一株草莓依靠它沿地“爬走”的匍匐茎,一年内就能长出数百株草莓苗……凡此种种,都是生物靠自身的一分为二或自身的一小部分的扩大来繁衍后代,这就是无性繁殖,无性繁殖的英文名称叫“Clone”,译音为“克隆”,实际上,英文的“Clone”起源于希腊文“Klone”,原意是用“嫩枝”或“插条”繁殖。时至今日,“克隆”的含义已不仅仅是“无性繁殖”,凡来自一个祖先,经过无性繁殖出的一群个体,也叫“克隆”。这种来自一个祖先的无性繁殖的后代群体也叫“无性繁殖系”,简称无性系。

自然界的许多动物,在正常情况下都是依靠父方产生的雄性细胞(精子)与母方产生的雌性细胞(卵子)融合(受精)成受精卵(合子),再由受精卵经过一系列细胞分裂长成胚胎,最终形成新的个体,这种依靠父母双方提供性细胞、并经两性细胞融合产生后代的繁殖方法就叫有性繁殖,但是,如果我们用外科手术将一个胚胎分割成两块,四块、八块……最后通过特殊的方法使一个胚胎长成两个、四个,八个……生物体,这些生物体就是克隆个体,而这两个、四个、八个……个体就叫做无性繁殖系(也叫克隆)。

可以这样说,关于克隆的设想,我国明代的大作家吴承恩已有精彩的描述——孙悟空经常在紧要关头拔一把猴毛变出一大群猴子,猴毛变猴就是克隆猴。

1979年春,中国科学院武汉水生生物研究所的科学家用鲫鱼囊胚期的细胞进行人工培养,经过385天59代连续传代培养后,用直径10微米左右的玻璃管在显微镜下从培养细胞中吸出细胞核,在此同时,除去鲫鱼卵细胞的核,让卵细胞留出空间作好接纳囊胚细胞核的准备,一切准备就绪后,把玻璃管吸出的核移放到空出位置的鲫鱼卵细胞内,得到了囊胚细胞核的卵细胞在人工培养下大部分夭亡了,在189个这种换核卵细胞中,只有两个孵化出了鱼苗,而最终只有一条幼鱼度过难关,经过80多天培养后长成8厘米长的鲫鱼。这种鲫鱼并没有经过雌、雄细胞的结合,仅仅是给卵细胞换了个囊胚细胞的核,实际上是由换核卵产生的,因此也是克隆鱼。

在克隆鲫鱼出现之前,英国牛津大学的科学家已经在1960年和1962年,先后用非洲一种有爪的蟾蜍(非洲爪蟾)进行过克隆试验。试验方式是先用紫外线照射爪蟾卵细胞,破坏其中的核,然后依靠高超的外科手术从爪蟾蝌蚪的肠上皮细胞、肝细胞、肾细胞中取出核,并把这些细胞的核精确地放进已被紫外线破坏了细胞核的卵细胞内,经过精心照料,这些换核卵中终于有一部分长出了活蹦乱跳的爪蟾,这种爪蟾也不是经过精细胞和卵细胞州结合产生的,所以也是克隆爪蟾。

我国著名生物学家童第周先生在1978年成功地进行了黑斑蛙的克隆试验,他将黑斑蛙的红细胞的核移人事先除去了核的黑斑蛙卵中,这种换核卵最后长成能在水中自由游泳的蝌蚪。

鱼类换核技术的成熟和两栖类换核的成功,使一批从事良种培育工作的科学家激动不已,既然鲫鱼的囊胚细胞核取代鲫鱼卵细胞核后能得到克隆鱼,那么异种鱼换核能否得到新的杂种鱼呢?我国科学家首先提出了这个问题,也首先解决了这个问题,就是培养克隆鲫鱼成功的那个研究所,设法把鲤鱼胚胎细胞的核取代了鲫鱼卵细胞的核。鲤鱼细胞核和鲫鱼卵细胞质居然能相安无事,并开始了类似受精卵分裂发育的过程,最后长出有“胡须”的“鲤鲫鱼”,这种鱼有“胡须”,生长快,完全像鲤鱼,但它的侧线鳞片数和脊椎骨的数目与鲫鱼相同,而且鱼味鲜美不亚于鲫鱼。这种人工克隆新鱼种的出现为鱼类育种开辟了新途径。

对科学的追求是永无止境的,鱼类,两栖类克隆的成功自然而然地使科学家把目光投向了哺乳类。美国和瑞士的科学家率先从灰色小鼠的胚胎细胞中取出细胞核,用这个核取代黑色小鼠受精卵细胞核。实际上,这个黑色小鼠的受精卵在精细胞核刚进入卵细胞后,就把精细胞核连同卵细胞的核一起除去。灰鼠胚胎细胞的核移人黑色小鼠的去核受精卵后,在试管里人工培养了四天,然后再把它植人白色小鼠的子宫内、经几百次灰、黑、白这样的操作以后,白色小鼠终于生下了三只小灰鼠。

去年2月27日出版的英国“自然”杂志公布了爱丁堡罗斯林研究所威尔莫特等人的研究成果:经过247次失败之后,他们在前年7月得到了一只名为“多利”的克隆雌性绵羊。

“多利”绵羊是如何“创造”出来的呢?威尔莫特等学者先给“苏格兰黑面羊”注射促性腺素,促使它排卵,得到卵之后,立即用极细的吸管从卵细胞中取出核,与此同时,从怀孕三个月的“芬多席特”六龄母羊的乳腺细胞中取出核,立即送人取走核的“苏格兰黑面羊”的卵细胞中,手术完成之后,用相同频率的电脉冲刺激换核卵,让“苏格兰黑面羊”的卵细胞质与“芬多席特”母羊乳腺细胞的核相互协调,使这个“组装”细胞在试管里经历受精卵那样的分裂、发育而形成胚胎的过程,然后,将胚胎巧妙地植人另一只母羊的子宫里。到去年7月,这只“护理”体外形成胚胎的母羊终于产下了小绵羊“多利”。“多利”不是由母羊的卵细胞和公羊的精细胞受精的产物,而是“换核卵”一步一步发展的结果,因此是“克隆羊”。

“克隆羊”的诞生,在世界各国引起了震惊,它难能可贵之处在于换进去的是体细胞的核,而不是胚胎细胞核。这个结果证明:动物体中执行特殊功能、具有特定形态的所谓高度分化的细胞与受精卵一样具有发育成完整个体的潜在能力。也就是说,动物细胞与植物细胞一样,也具有全能性。

克隆技术会给人类带来极大的好处,例如,英国PPL公司已培育出羊奶中含有治疗肺气肿的a-1抗胰蛋白酶的母羊。这种羊奶的售价是6千美元一升。一只母羊就好比一座制药厂,用什么办法能最有效、最方便地使这种羊扩大繁殖呢?最好的办法就是“克隆”。同样,荷兰PHP公司培育出能分泌人乳铁蛋白的牛,以色列LAS公司育成了能生产血清白蛋白的羊,这些高附加值的牲畜如何有效地繁殖?答案当然还是“克隆”。

母马配公驴可以得到杂种优势特别强的动物——骡,骡不能繁殖后代,那么,优良的骡如何扩大繁殖?最好的办法也是“克隆”,我国的大熊猫是国宝,但自然交配成功率低,因此已濒临绝种。如何挽救这类珍稀动物?“克隆”为人类提供了切实可行的途径。

克隆动物还对于研究癌生物学、研究免疫学、研究人的寿命等都有不可低估的作用。

不可否认,“克隆绵羊”的问世也引起了许多人对“克隆人”的兴趣,例如,有人在考虑,是否可用自己的细胞克隆成一个胚胎,在其成形前就冰冻起来。在将来的某一天,自身的某个器官出了问题时,就可从胚胎中取出这个器官进行培养,然后替换自己病变的器官,这也就是用克隆法为人类自身提供“配件”。

有关“克隆人”的讨论提醒人们,科技进步是一首悲喜交集的进行曲。科技越发展,对社会的渗透越广泛深入,就越有可能引起许多有关的伦理、道德和法律等问题。我想用诺贝尔奖获得者,著名分子生物学家J.D.沃森的话来结束本文:“可以期待,许多生物学家,特别是那些从事无性繁殖研究的科学家,将会严肃地考虑它的含意,并展开科学讨论,用以教育世界人民。”

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