1、骨髓细胞分选
可以利用流式细胞仪分选，只做过普通流式，没做过分选。
2、各位大侠，naive T 细胞的分离
GVHD是同种异体造血干细胞移植(allo-HSCT)后影响预后的 重要并发症。受者预处理造成组织损伤并释放炎性因子(如IFN-γ、IL-2等)引 起GVHD。最近的研究发现骨髓来源的间充质干细胞(MSCs)不仅可以分化为 多种间充质组织，而且具有支持造血和免疫调节作用，但其机制尚不清楚。目前 的研究认为供者来源的Naive T细胞识别受者主要组织相容性抗原启动了 GVHD。我们将体外新生的Naive T细胞接种于异基因MSCs上，观察MSCs对 Naive T细胞分泌细胞因子的影响，直接研究它对Naive T细胞的作用，将更深入 地揭示其预防GVHD的机制。 材料和方法：
1、 MSCs体外分离培养：将肝素抗凝的骨髓用密度梯度离心 法(过percoll细胞分离液)分离出单个核细胞，体外培养贴壁细胞，传3代后得 到纯度和数量均较高的MSCs，经60Co照射后作为实验细胞。
2、 脐血CD34+细 胞体外分化为Naive T细胞：将胎儿胸腺组织贴壁培养建立胸腺基质细胞培养 (TSC)体系；用单克隆抗体-磁珠分离系统分离纯化脐血CD34+细胞；将CD34+ 细胞植入TSC并添加IL-12、 FL、IL-2，共孵育5周后获取Naive T细胞并通过 流式细胞术鉴定其表型。
3、 MSCs与Naive T细胞共孵育：将体外培养获取的 Naive T细胞种入经照射近融合的MSCs中，对照组为单独MSCs培养和单独Naive T细胞培养。孵育7天后，取上清用ELISA定量检测IL-2、 IFN-γ、IL-4和IL-10， 并应用流式细胞仪检测共孵育前后T淋巴细胞表型变化 结果：1、 人骨髓来源的MSCs可以在体外培养扩增，用流式细胞术分析传3 代以后的细胞发现它们具有共同的表型CD166+，CD105+， CD45-和CD34-，2、 CD34+细胞可在TSC体系中分化出Naive T细胞，随着培养时间的延长，与体内 胸腺生成T细胞类似，依次出现CD4／8双阴性，双阳性，单阳性细胞。培养第5 周细胞表型测定：CD4+65． 2％，CD8+52． 7％，CD3+78． 8％，CD45RA表达88． 9％。3、 中文摘要 MSCS与NaiveT细胞共孵育七天，镜下观察可见共孵育组T细胞数量轻度增加， 流式细胞仪检测共孵育前后T淋巴细胞表型显示CDS+细胞相对增加。ELISA检 测上清发现共孵育组IFN一Y分泌减少(p0 .05)，IL一2分泌增加(p0.05)。另 外，在实验组和对照组中均未检测到IL一4、IL一10。 结论:MSCs具有一定的异基因反应性，能刺激NaiveT细胞增生，且MSCs 和NaiveT细胞共孵育组上清中的IL一2分泌增加而IFN一Y分泌减少，提示MSCs 可能借CDS+调节T细胞增生抑制异基因反应性T细胞分泌IFN一Y来发挥免疫调 节作用，本文结果将为进一步阐明MSCs免疫调节机制提供新的线索。
3、骨髓间充质干细胞分离的方法有几种
目前常用的分离MSC的方法主要有全骨髓法和密度梯度离心法，全骨髓法即根据干细胞在低血清培养基中有贴壁优势特性，定期换液除去不贴壁细胞，从而达到纯化及扩增MSC的目的。密度梯度离心法即根据骨髓中各细胞成分比重的不同，分离单核细胞进行贴壁培养。二者本质上无多大区别。随着对MSC表面抗原认识的深入，又有人利用免疫方法如流式细胞仪法、免疫磁珠法等对其进行分离纯化。但经过流式或磁珠分选后的细胞出现了增殖缓慢等一些问题，加之成本较高和技术的难度，在某种程度上限制了这些方法的广泛应用。
4、血细胞分化簇抗原(CD)34阳性造血干细胞分选的意思是什么
这指的应该是用流式细胞仪，对冻存的骨髓或脐带血（脐带血几率大一些,含量0.1%-1%）进行检测的一种方法或手段，如分离出一批符合标准的CD34造血干细胞，或以此为设定此类细胞的标准。
5、细胞磁珠分选的 MACS Cell Separation Columns 可以重复使用吗
最好不要重复用。本来就是一次性的东西。
理论上来说，反复冲洗后柱子可以恢复原样，但是之前过滤的东西可能有些物质物理吸附在柱子上。之前分选中吸附柱子的杂质，是否会影响重复使用，不好说；分选效率也不好说。
之前我曾经用这个重复分过骨髓，还是能够分离出目的细胞，但是分离效率什么的没具体测过，没把握。
6、骨髓干细胞的分离
骨髓抽取及骨髓干细胞的分离纯化：患者在无菌条件下从髂后上棘进行穿刺，分不同部位抽取骨髓l0～20 mL，置于肝素化的无菌离心管中，骨髓离心取出脂肪层
7、骨髓单个核细胞分离，目的用于RNA的提取
用淋巴细胞分离液就可以了。天津生产的，90元一瓶，200毫升。
1 骨髓液3毫升，用3毫升PBS稀释混匀；
2 平铺于6毫升淋巴细胞分离液液面上，保持界面清晰；
3 2000转/分水平离心30分钟；
4 1毫升针头吸取中间云雾层；
5 用PBS洗涤两次。
骨髓液用抗凝管收集就可以了，不要放到4度冰箱，避免溶血；淋巴细胞分离液使用前室温平衡；离心机必须为水平离心，不要突然刹车，应使速度缓慢下降；骨髓液和淋巴细胞分离液必须保持界面清晰。
8、人的骨髓细胞进行流式分选,骨髓细胞如何取样,保存,运输
用无土栽培技术,不加入含以上元素的培养基,然后看到植物的生长出现问题,则说明植物的生长需要改签元素
9、如何从小鼠骨髓中分离和培养DC
拉颈处死小鼠，无菌剥离股骨和胫骨，用Hank’S冲出骨髓细胞，PBS洗
涤1次，用0．83％Tris—NH4CL裂解红细胞，RPMI1640培养液洗涤2次，调整细胞浓度为1×106个／mL，
并加入rmGM—CSF(1000 U／mL)和rmlL－4(500 U／mL)，接种于24孔培养板，置于37~C，5％CO2孵箱中
培养．第3天轻轻摇动培养板，吸走大部分悬浮细胞，加人等量的培养液，并补足细胞因子．隔日半量换液
1次，第7天收集悬浮或稍微贴壁的细胞．
10、细胞分选仪与细胞分析仪相同吗？不同的话有什么区别啊 ？？把答案发到706953761@163.com...谢了，定有高分
两者是有区别的：
细胞分选仪是用于细胞分选的医学设备，可将移植物中的肿瘤细胞和异常的免疫细胞分选去除，达到有效治疗难治性自身免疫性疾病、恶性淋巴瘤、多发性骨髓瘤、某些恶性实体肿瘤骨髓侵犯等疾病之目的。
而细胞分析仪是采用了多角度偏振光散射技术进行白细胞分类计数.其原理是利用鞘流液与血标本按适当的比例混合后,使其白细胞内部结构基本保持不变(只有碱性粒细胞颗粒因有吸湿特性而其结构有较微改变),红细胞在该鞘流液中细胞膜完整且和鞘流液的吸光指数相等,故不会干扰白细胞的检测.用偏振激光束射照单个排列细胞(集中于一直径30um的小股液流中),并进一步分辨细胞.该技术采用了其他仪器很少用的10°窄角和偏振加消偏振检测法,分辨能力有所提高.它第一步先测试中性/单核细胞,用0°-90°的散射数据,再测90°D的衍射差,将嗜酸性和中性细胞分开,而嗜碱性粒细胞,淋巴细胞及单核细胞,则按其大小和内部结构的复杂性不同,所产生的散射光也各异,用可调较的门限加以区分.其采用特定程序自动储存分析数据,并经电脑软件处理,在屏幕上显示6个散点图和两个直方图.