1、植物的組織培養怎麼由部分組織變成試管苗生根?(比如草莓)
第一步:生根組織切塊,植入滅菌培養試管中培養,加入促生根激素。
第二步:分苗,將密集生根的弱苗分到大的試管培養基中進一步培養,減少密度。
第三步:練苗,移栽之前打開培養試管,通風。
第四步:移苗,移苗至溫室大棚的苗床地。
第五步:移栽,分苗,連同營養缽正式移入大田栽培。
2、植物組織培養,生根苗的切割要求
維生素B1和B6,用無機離子濃度低的White培養基。 氮源有銨態氮,硝態氮和可溶性有機氮,如:氨基酸或醯胺等。 加入各種氨基酸的水解酪蛋白,也能促進根的生長。
植物組織培養,生根\切割
維生素B1和B6,用無機離子濃度低的White培養基。 氮源有銨態氮,硝態氮和可溶性有機氮,如:氨基酸或醯胺等。 加入各種氨基酸的水解酪蛋白,也能促進根的生長。
3、煙草愈傷培養基的具體配方
在植物組織培養時,通過調節IAA和CTK的比值能影響愈傷組織分化出根或芽.CTK/IAA高時,愈傷組織分化芽;CTK/IAA低時,分化根;CTK/IAA比例適中維持愈傷組織不分化
2.2.1 愈傷組織誘導培養基制備
以MS培養基母液為基礎,向潔凈鋁鍋中順序加入大量元素20×母液100mL,
微量元素100×母液20mL,鐵鹽100×母液20mL ,維生素100×母液20mL,肌醇
200×母液10mL,甘氨酸200×母液10mL,配製得MS培養基後,再加入0.5mg·L-1
的BA8mL,0.5mg·L-1的NAA8mL.然後加入實際配製培養基體積約2/3-3/4的蒸餾
水,加入40g蔗糖後攪拌使其溶化,用0.5mol·L-1的NaOH和0.5 mol·L-1的HCl調整
pH值至5.8-6.0.加入14g瓊脂,將鋁鍋置於電爐上,攪拌加熱使瓊脂完全溶化,然
後用蒸餾水定容至終體積2L,繼續加熱幾分鍾使之混合均勻後分裝於三角瓶中.
2.2.2煙草葉片愈傷組織誘導
取一無菌培養皿,用解剖刀切取1-2片無菌苗葉片置於無菌培養皿中,並用解
剖刀將葉片切成2mm2左右的小片,然後將其接種於准備好的培養基上,每瓶接種
5小片,一共接種6瓶.接種後的三角平置於24條件下黑暗培養1周,然後在同
樣溫度下有光照和全黑暗下培養3周直至愈傷組織形成(兩種情況各置3瓶).觀
察愈傷組織誘導結果,統計愈傷組織誘導率.
2.2.3器官分化及植株再生培養
將誘導的愈傷組織按類型分別轉入分化培養基上,置於連續光照,溫度20-
22 C條件下培養3周,統計愈傷組織再生植株情況.
3 結果與分析
3.1 愈傷組織誘導
3.3.1 愈傷組織誘導的總體情況
煙草愈傷組織誘導培養4周後,愈傷組織基本形成,即排除因生長時間不夠而
未形成愈傷的情況.具體情況見表一中所示,6瓶培養物均有愈傷形成,且都未發
生污染,但誘導率幾乎各不相同.其中, 在光照條件下培養的3瓶平均愈傷誘導率為
60.0℅, 在黑暗條件下培養的3瓶平均愈傷誘導率為46.7%.由於實驗過程中,外植
體即煙草葉片取得偏小,接種時可能已有部分外植體的大部分細胞脫水死亡,使整
個實驗的愈傷組織誘導率偏低,愈傷塊偏小.
4、組織培養中常用的促進生根的措施有哪些?
促進插條生根的方法很多,目前使用最廣的是用植物生長激素處理。此外還有環剝和其他葯劑處理法。
(1)激素處理
常用的激素有:吲哚乙酸、吲哚丙酸、吲哚丁酸、萘乙酸、2,4-D等。其中效果較好的是吲哚乙酸、吲哚丁酸及萘乙酸。這些有機酸類可促使對生根有促進作用的有機物在插穗下部積累,從而促進發根。具體的處理方法有:
水劑處理:將插穗下端浸在生長素的水溶液或酒精溶液中。又可分為濃液速蘸法和溶液浸漬法。濃度較高用速蘸法,一般在溶液中浸5秒左右,然後扦插。濃度較低用浸漬法(一般10~100毫克/千克),將插穗莖部(2.5厘米)浸在溶液中經24~48小時後扦插。
粉劑處理:將插穗的下端蘸於生長素與木炭、滑石粉或其他粉末的干混合粉劑中,然後進行扦插。具體操作為:將插穗莖部(1.5~3厘米處)先行沾濕,滴去多餘水分,然後蘸以粉劑即可馬上扦插。
吲哚乙酸、吲哚丁酸及萘乙酸均難溶於水,所以在配製時應溶於開水或溶於95%濃度的酒精中,然後再用水稀釋到所需濃度。粉劑的配製則可直接將生長素的結晶混入定量的木炭粉、滑石粉中,放在研缽中碾碎攪拌後使用。
配好的溶液和粉劑應保存在密閉的玻璃器皿中,放乾燥、黑暗、冷涼的地方,吲哚乙酸在水溶液中易失效,應臨時配製,萘乙酸,2,4-D可保持較長時間,粉劑在陰涼處可保持數月。
扦插時使用的濃度主要視樹種、枝條木質化程度及處理時間而異。此外,氣溫高低、土壤酸鹼度等均有一定影響。針葉樹類一般要求較其他種類濃度高,用吲哚丁酸葯劑處理濃度為20~80毫克/千克。吲哚乙酸溶液及萘乙酸溶液,對大多數種類宜用40~100毫克/千克,浸24小時。落葉喬灌木及藤本:濃度因插條木質化程度而異,對大部分易發根種類的半熟枝,可用10~12毫克/千克的吲哚乙酸溶液處理24小時,過濃則往往有葯害。難發根的種類可用80~200毫克/千克濃度。粉劑則用4000毫克/千克濃度。若用溶液速蘸法處理,則濃度為2000~5000毫克/千克。
(2)高錳酸鉀處理
高錳酸鉀蘸根後可分解為氧氣、二氧化錳、氧化鉀等,氧氣可促進氧化,增強呼吸作用,使插條內部的養分變為可給態,從而促進發根。二氧化錳能殺菌、有防腐作用。一般使用濃度為0.3%~0.1%。
(3)環剝處理
對不易生根的樹種,在生長季環剝,到休眠期在該處剪下扦插。由於傷處養分集中而利於生根、發芽。
5、組織培養育苗生根時用什麼培養基?
繼代培養形成的不定芽和側芽等一般沒有根,要促使試管苗生根,必須轉移到生根培養基上,生根培養基常用1/2MS培養基,無機鹽濃度低有利於根的分化。同時,不同花卉誘導生根時所需要的生長素的種類和濃度是不同的,常用生長素萘乙酸、吲哚乙酸、吲哚丁酸。一般在生根培養基中培養1個月左右即可獲得健壯根系。
6、請生物高手幫幫忙:生長素在濃度較高時不是應該當抑制根,促進莖生長么,為什麼在煙草的愈傷組織培養中
這個問題比較麻煩
三種中,根最敏感,芽居中,莖最不敏感
而插條時,插的就是莖,所以做這題的時候答案都是莖的最適濃度做正確答案的
但這里不是長莖,所以很難理解,但選根的最適也不成,因為這里是莖分化成根,是根的分化,而不是促進根的生長,但是課本並沒有指出根分化的最適濃度是多少,不過從植物組織培養中介紹,分根的生長素濃度高於分芽來看,只能選長莖的濃度了。
生長素太多,只長根不長莖葉;原因:這是因為植物對生長素濃度敏感性莖比根強,所以高濃度生長素對莖的生長是抑製作用,而對於根這個濃度屬於低的,反而促進了根的生長。
7、有誰知道煙草組織培養的配方?多謝。。。
至少可以先用MS讓它先長著。
8、組織培養中,愈傷組織能直接誘導生根嗎
很多植物的愈傷都能直接誘導生根,使用適當的激素種類和配比就可以了。如NAA就是一種促進生根的激素,但要配合適當的細胞分裂素。
9、植物組織培養中,為什麼一般先誘導生芽後誘導生根,而不是反過來
如果先誘導根,再誘導芽,兩者的維管束很難對接,所以都是先誘導芽再生根,移栽後才保證成活。
10、組織培養的一般過程是怎樣的
植物細胞組織培養
一.實驗目的
植物細胞和組織培養的技術性強,要求無菌操作,通過本實驗可初步掌握常規的組織培養技術,加深對無菌操作的了解.
二.實驗原理
植物的全能性:植物體的任何一個細胞都具有生長分化成為一個完整植株的能力,稱為植物的全能性.
植物組織培養就是利用植物的全能性進行離體無菌植物培養的一門技術.植物組織培養按其原始意義,就是指愈傷組織培養.但發展至今,其范圍日益擴大,已包括植物和它的離體器官、組織、細胞和原生質體的離體無菌培養.因此,擁有幾種不同水平的培養技術,即整體的、器官的、組織的、細胞的和原生質的培養技術.它們的涵義是:
1.植株培養.指以具備完整植株形態的材料(如幼苗和較大的植株)外植體的無菌培養.
2. 胚胎培養.指以從胚珠中分離出來的成熟或未成熟胚為外植體的離體無菌培養.
3. 器官培養.指以植物的根,莖,葉,花,果等器官為外植體的離體無菌培養,如根的根尖和切段,莖的莖尖,莖節和切段,葉的葉原基,葉片,葉柄,葉鞘和子葉,花器的花瓣,雄蕊(花葯,花絲),胚珠,子房,果實等的離體無菌培養.
4. 組織培養.指以分離出植物各部位的組織(如分生組織,形成層,木質部,韌皮部,表皮,皮層,胚乳組織,薄壁組織,髓部等),或已誘導的愈傷組織為外植體的離體無菌培養.這是狹義的組織培養.
5. 細胞培養.指以單個的游離細胞(如用果酸酶從組織中分離的體細胞,或花粉細胞,卵細胞)為接種體的離體無菌培養.
6. 原生質體培養.指以除去細胞壁的原生質體為外植體的離體無菌培養.
本實驗選擇煙草和豌豆為材料,煙草(Nicotiana)屬茄科植物,是重要的工業原料,也是植物組織培養的四大典型實驗植物(煙草、矮牽牛、胡蘿卜、芸苔)中重要的一種,它的研究的最為廣泛,也始終領先於其他的植物材料,目前,66個煙草品種中,再生成植株的有16個種,通過花葯培養再生成花粉植株的有12個種,通過原生質體培養再生成植株的有20個種,通過煙草的種內和種間原生質體融合再生成雜種的植物分別為3個和12個種.豌豆(Pisum sativum)屬豆科植物,是糧食、飼料和重要的蔬菜作物,也是遺傳學家和植物生理學家感興趣和樂於採用的實驗植物,豌豆的根、莖、子葉、下胚軸、上胚軸、花芽等外植體,皆可形成愈傷組織,其中莖尖、幼胚、幼葉等器官可成功的再生成植株.莖尖培養可包括小至十幾微米的莖尖分生組織(生長點)和大至幾十毫米的莖尖或更大的芽培養.在實踐應用上,常採用生長點的培養使患病植物去病毒,以達到挽救優良品種,提高產量和質量之目的.
三.實驗材料
儀器設備
1.酒精燈、100ml三角燒瓶,9厘米培養皿;
2.鑷子、剪刀、解剖針;
3.雙筒解剖顯微鏡;
4.光照培養箱或溫室;
材料和試劑
1.材料 煙草無菌苗、豌豆幼苗.
2.試劑
(1)MS培養基,植物激素:NAA、6-BA等;
(2)飽和漂白粉液(次氯酸鈉);
(3)70%酒精、100%酒精、酒精棉球;
(4)無菌水
四.實驗步驟
1.煙草無菌苗的快速切繁—繼代培養:(要求完全無菌操作)
每組一瓶煙草無菌苗,請細心操作,以免污染.
(1) 在實驗台上,點著酒精燈,將雙手用酒精棉球擦拭消毒,打開生長好無菌煙草苗的三角瓶,三角瓶的瓶口使用前後需在酒精燈外焰上燒過滅菌.
(2) 用滅菌的鑷子輕輕捏出1株幼苗,用滅菌的剪刀將無菌苗剪成0.5-1厘米的小段,要求每段至少包含一個生長點,直接剪入盛有MS培養基的三角瓶中,每一個切段必須直接接觸培養基,三角瓶口重新燒過滅菌,並重新封好口.
(3) 在光照培養箱中15~25℃,16小時光照條件下培養4周,可長成完整植株,能用於田間移栽.
2.豌豆苗的莖尖培養
⑴ 取發芽6天的豌豆幼苗10株,簡取1厘米左右的莖尖,浸入70%的酒精中1分鍾,再浸入飽和次氯酸鈉溶液中消毒15分鍾,(此步以後要求無菌)用無菌水中沖洗5次,在滅菌的濾紙上吸干水分,放入滅菌的培養皿中.
⑵ 在雙目解剖鏡下,用滅菌的解剖針剝去幼葉露出生長錐,用滅菌的解剖針挑取帶著兩至三個葉原基的生長錐.
⑶ 將挑好的莖尖移到MS+10.7μmol/L萘乙酸(NAA)+4.4μmol/L 6-苄基腺嘌呤(6-BA)的培養基上誘導愈傷組織形成,用封口膜將培養皿封好.
[4]在恆溫培養箱中,26℃下,培養六周,形成愈傷組織,經繼代後,可用於生根培養.
第46批a7 2014-12-06