1、牛布氏桿菌病的診斷及防治方法?
牛布氏桿菌病是人畜共患的慢性傳染病。主要侵害生殖系統,以母牛發生流產和不孕,公牛發生睾丸炎和不育為特徵,故又稱傳染性流產。本病病原體是牛布氏桿菌。
該病臨床症狀主要表現為妊娠母牛流產。流產後多數伴發胎衣不下或子宮內膜炎。
公牛發生睾丸炎和副睾炎,失去配種能力。
對牛布氏桿菌病的診斷可採取3種實驗室檢查方法。
(1)細菌學檢查。取母牛陰道分泌物、胎衣、胎兒胃內容物塗片,將塗片在酒精燈上加溫固定後,滴加2%沙黃水溶液,在火焰上方微微加熱0.5~1分鍾至出現蒸氣,水洗後用1%孔雀綠復染1~2分鍾,水洗吸干、鏡檢。若看到紅色的球桿菌便可確診。其他雜菌成綠色。
(2)全乳環狀反應。取剛擠出的全乳1毫升放於反應管內,加入抗原(染成藍色或紅色)0.1毫升,充分振盪混合,靜置於37℃溫箱中,1小時後取出立即判定。用藍色抗原時,若在乳脂層出現比乳柱深的藍色環狀帶即判為陽性。
(3)平板凝集反應。此法比較簡單實用。
採取被檢牛血液,待凝固後,分離血清作被檢材料。先用蠟筆在玻璃板上劃成2厘米×2厘米的方格,每一方格中放置一份被檢血清0.02毫升,用0.2毫升吸管吸取充分攪勻的抗原,分別在每一血清樣品旁加入0.03毫升抗原,每格各用一根火柴棒或牙簽攪拌血清和抗原,使其均勻混合,若室內溫度偏低,可將玻板在酒精燈上方微微加溫,於4分鍾內出現凝集現象者為陽性。
本病公牛無治療價值。母牛流產後繼發予宮內膜炎或胎衣不下時可用0.02%呋喃西林,0.1%高錳酸鉀液或生理鹽水沖洗子宮,排除沖洗液後向子宮內灌入抗生素葯物。胎衣不下時可採取手術剝離或肌內注射垂體後葉素50~100單位,以加速胎衣排除。本病防疫主要是加強檢疫,不到疫區引種。必須買牛時一定隔離30天以上,並作二次檢疫,確認健康才能入群。
對同群牛堅持每年定期預防注射布氏桿菌菌苗,被污染的場所及用具有3%~5%來蘇兒消毒。
2、布魯氏桿菌病的臨床表現
(一)實驗室檢查
1.血象 白細胞半數正常或輕度減少,淋巴細胞相對或絕對增多,分類可達60%以上。血沉在各期均增速。久病者有輕或中度貧血。
2.細菌學檢查 患者血液、骨髓、乳汁、子宮分泌物均可做細菌培養。急性期陽性率高,慢性期低。骨髓標本較血液標本陽性率高。
3.免疫學檢查
(1)血清凝集試驗(Wright試驗) 試管法較靈敏。患者多在第二周出現陽性反應,1:100以上有診斷價值。病程中效價遞增4倍及以上意義更大。正常人可有低滴度的凝集素;某些傳染病的假陽性率可達30%以上,如兔熱病該凝集效價升高;注射霍亂疫苗的人90%可呈假陽性;接種布魯氏菌活菌苗者,凝集效價也增高。診斷時要注意分析。另外由於抗體IgA、IgG、IgM量的比例不同,如IgA含量高則可出現患者血清低稀釋度為陰性,高稀釋度反為陽性的所謂前帶現象。因此做該實驗時應增大患者血清稀釋范圍。
(2)補體結合試驗補體結合抗體主要為IgG,出現較遲,持續較久,一般1:16以上即為陽性。對慢性患者有較高特異性。
(3)抗人球蛋白試驗(Coombs』test)用於測定血清中的不完全抗體。不全抗體可阻斷完全抗體與抗原的凝集反應,使凝集試驗呈假陰性。Coombs試驗是使不完全抗體與不可見抗原結合的復合物通過抗人球蛋白血清結合成塊,直接可見。故凝集試驗陰性者可作此檢查。1:160以上為陽性。
(4)酶聯免疫吸附試驗(ELISA) 1:320為陽性。此法比凝集法敏感100倍,特異性也好。
(5)皮膚試驗為細胞介導的遲發型變態反應,一般發生在起病20天以後。其方法是以布魯氏菌抗原作皮內試驗,陰性有助於除外布魯氏菌感染。陽性僅反映過去曾有過感染。接種疫苗也可呈陽性,所以對無症狀的陽性者可視為本病病人。
(6)其它實驗檢查 瓊脂擴散,對流電泳、被動血凝試驗,放射免疫及免疫熒光抗體試驗等均可應用。
(二)影像學檢查
1、X線表現
(1)椎體炎:邊緣型骨質破壞最常見,病灶呈多灶性或跳躍性,多侵害1~2個椎體上緣,少數為多個椎體。早期表現小骨質稀疏灶,數周後出現骨質缺損病灶,較大的病灶呈「島嶼狀」。病灶呈軟組織密度未見死骨,病灶邊緣清晰銳利,呈不規則蟲蝕狀破壞或刀鋸樣外觀,後期硬化,增生形成骨刺,呈鳥嘴狀向外或鄰近椎體緣伸展,形成骨橋。椎體中心亦可被侵犯,通常椎體中心病灶迅速硬化,不形成深部骨質破壞缺損,以後逐漸被新生骨代替,無椎體壓縮徵象。
(2)椎間小關節炎:多發生於鄰近病變椎體,關節面破壞不規則,關節間隙進行性變窄,以致於消失,也可表現為繼發性增生性關節炎,產生骨性強直,數個關節同時受侵。
(3)韌帶鈣化:以下腰椎多見,表現為自下而上逐漸發展的前後縱韌帶呈索條狀鈣化影。
(4)椎間盤炎:早期特徵為椎間隙狹窄,密度增高,上下椎體面及椎體緣不規則,有骨質破壞傾向,後期椎體緣骨質硬化增生,附近韌帶鈣化。
2、CT表現
(1)骨改變:骨破壞灶多為2~5 mm直徑的多發、類圓形低密度灶,周邊有明顯的增生硬化帶。多分布在椎體邊緣,少數見於椎體中心,椎小關節亦見類似改變。新生骨中又見新破壞灶,鄰近椎體密度普遍增高,無死骨及椎弓根破壞。
(2)椎間盤改變:椎體破壞均伴有相鄰的椎間隙狹窄,椎間盤破壞,CT表現為等密度影,骨關節面增生硬化。
(3)椎旁軟組織腫塊:椎旁軟組織影與椎體破壞區相連,形態不規則,界限清楚,推壓鄰近的腰大肌。
(4)腰大肌膿腫:少數患者椎體破壞平面的兩側腰大肌增寬,其內有膿腫形成。
(5)骨膜改變:椎體骨膜肥厚,由中間向兩側膨出,使椎體呈斑駁狀不均勻密度增高,梭狀變形,椎體邊緣骨膜增生肥厚鈣化,形成「唇狀」骨贅,新生骨贅加上其間的破壞灶構成「花邊椎」之特徵性表現,但鈣化的骨膜和椎體間仍清晰可辨。相鄰椎體骨贅連結形成椎體側方融合。有時橫突的骨膜表現為橫突頂部帽狀增厚。
(6)韌帶改變:主要表現在前縱韌帶和棘間韌帶鈣化。
3、MRI表現
除CT表現特徵外,可以早期發現骨和周圍累及的軟組織有信號異常,在T1 加權像呈低信號,T2 加權像呈高信號。炎性病變顯示為壁厚、不規則強化,與周圍正常組織界限不清。 布氏桿菌性脊柱炎、脊柱結核、化膿性脊柱炎三者的臨床表現均有發熱、乏力、持續性腰痛、下背痛及放射性疼痛等。影像學表現有椎體骨質破壞、早期椎體骨質疏鬆,後期硬化、增生,椎間隙變窄等相似之處,故容易發生誤診,現將三者區別如下:
1、病因
(1 )布氏桿菌病多發生於農牧區有病畜接觸者,或與含菌標本接觸的實驗室工作人員,以及飲用未經消毒滅菌達標的乳品或食用未熟的牛、羊肉的人群。該病最易侵犯脊柱,其流行病學已經從一個主要是職業相關疾病變成主要由食物引起的疾病。
(2) 脊柱結核多由身體其他部位的結核感染所致,是一種慢性炎症病變,無明顯流行病學特點。臨床表現為全身慢性中毒症狀:低熱、乏力、盜汗等。
(3) 化膿性脊柱炎多由金黃色葡萄球菌或大腸桿菌感染引起,國外有學者認為其有四種不同的臨床表現:①髖關節綜合征:髖部急性疼痛,屈曲收縮;②腹部綜合征:表現如急性闌尾炎;③腦膜綜合征:表現如急性化膿性或結核性腦膜炎;④背痛綜合征:可為急性或漸進性。
2、影像學表現
(1) 布氏桿菌性脊柱炎在X 線攝影上表現為骨質破壞,關節間隙變窄,椎體骨質增生、硬化,少見椎旁囊腫,以下腰椎多見。CT 可顯示小的、多發的骨質破壞灶,破壞邊緣見骨的不同程度增生硬化,死骨少見。MRI 可早期發現骨周圍軟組織和骨髓內炎性的改變,在T1 加權像呈低信號,T2 加權像呈高信號。炎性病變顯示為壁厚、不規則強化,與周圍正常組織界限不清,此點與脊柱結核膿腫壁薄、與周圍組織界限清晰相鑒別。布氏桿菌性脊柱炎形成的膿腫主要位於受累椎間盤的周圍,不發生流注,椎體破壞輕。此點可以與脊柱結核鑒別。
(2)脊柱結核的X 線表現為椎體骨質破壞,椎間隙變窄,成角畸形及寒性膿腫形成,以胸椎下段及腰椎上段多見,常累及相連的2~3 個椎體,病變以溶骨性破壞為主,骨增生硬化則不顯著。CT 平掃顯示椎體松質骨破壞,骨皮質失去完整性,可見死骨和輕微骨增生和塌陷,早期椎間盤相對完整,後發生破壞,間隙變窄,膿腫呈單房或多房。脊柱結核脊椎炎形成的膿腫最大,可以發生遠距離流注,椎體破壞最重。此點可以與其他兩種鑒別。
(3) 化膿性脊柱炎椎體病變可發生在椎體邊緣或中心部,起初為溶骨性破壞,進展迅速,繼而出現骨硬化增生,這一點可與脊柱結核相鑒別。脊柱結核以破壞為主,一般要在半年後才出現骨增生硬化。化膿性脊柱炎一般很少引起椎體塌陷,但累及附件的機會較多。CT 可顯示椎體骨質破壞、死骨形成及因水腫和炎性滲出所造成的低密度椎旁軟組織腫塊及其中的氣體,對比增強可見炎性腫塊強化。MRI 可在明顯的骨質破壞之前發現脊髓和椎間盤的炎性病變,是早期診斷的重要方法。椎間盤感染在T2 加權像上呈不規則高信號,失去其正常結構。化膿性脊柱炎在三種疾病中形成的膿腫最小,破壞最輕,大多數僅僅患者遠期僅僅表現為椎間隙狹窄。此點在與脊柱結核鑒別上有價值。
3、臨床表現
(1) 布氏桿菌性脊柱炎的臨床發熱,可以表現為弛張熱。疼痛劇烈,僅僅限於受累的腰部周圍。疼痛的嚴重程度,介於其他兩種脊椎炎之間。多數發生於腰椎,沒有脊髓損傷症狀。穿刺獲得的膿液表現為粉紅色、洗肉水樣。血常規檢查常常介入正常和異常之間。
(2 )脊柱結核性脊椎炎常表現為低熱,疼痛可以很劇烈,多數相對比較輕,疼痛的嚴重程度低於其他兩種疾病。腰椎發生率最高,可以發生於全身脊柱。20%左右的患者可以表現出脊髓壓迫症狀。穿刺獲得的膿液表現為淡黃色、淡黃色、米湯樣。血常規可以正常。
(3) 化膿性脊柱炎的急性期表現極度高熱,可以達到40度以上。疼痛劇烈,嚴重時靠近床位的步伐、接觸床位的動作都可以引起劇烈的抽搐。疼痛是三種脊椎炎中最嚴重的。多數發生於腰椎,沒有脊髓損傷症狀。膿液表現為稀薄的、粘稠的膿性液體。血常規嚴重異常。
布氏桿菌性脊柱炎、脊柱結核、化膿性脊柱炎在病因、臨床表現及影像學方面有其特徵性表現,也有許多相似之處,臨床診斷需結合病史、臨床表現、流行病學特點及影像學特徵綜合判斷,確診需要依靠病理學和血清學培養診斷。
3、布氏桿菌病治療方案?
用葯治療
1.急性期治療
應以抗菌治療為主。由於布魯菌為細胞內寄生,故抗菌葯物必須易於穿透細胞膜才能發揮作用,因此體外葯物敏感試驗與臨床療效有時並不一致。為了防止耐葯和復發,一般常需聯合用葯,而且療程必須較長,如果療程過短,則任何葯物(包括聯合用葯)的復發率均很高。
(1)成人普通布氏菌病常用的治療方案
①四環素聯合鏈黴素:布魯菌對四環素仍高度敏感,其MIC一般均<1mg/L,故這一聯合療法迄今仍為最有效的治療方法之一。四環素2g/d,分4次口服,共6周。鏈黴素1g/d,肌內注射,共2~3周,其復發率<5%。由於多西環素的半衰期較長,用葯量較小,故有人主張用它來代替四環素。由於鏈黴素有潛在的神經毒性,故有人主張用慶大黴素來代替鏈黴素。但此葯亦有神經毒性及腎毒性應注意。
②利福平聯合多西環素:利福平是一種廣譜抗生素,由於其脂溶性作用,較易透過細胞膜滲入到細胞內,也可透過血腦屏障,口服後很易達到抑制布魯菌的濃度。1986年世界糧農組織(Food
and
Agriculture
Organization)和世界衛生組織(WHO)布氏菌病專家委員會建議應用多西環素(0.2g/d)聯合利福平(600~900mg/d),兩葯均1次/d,口服,共6周,對比研究顯示,多西環素-鏈黴素方案及多西環素-利福平方案,如果均應用6周的話,則兩者的療效基本一樣。只是前者對某些合並症,如脊椎炎的療效似乎更好一些。但亦應當注意利福平的毒副作用。
③氧氟沙星聯合利福平:喹諾酮類葯物,特別是氧氟沙星,在體外對布魯菌有很好的作用。但如單獨應用於人類布氏菌病治療則復發率極高。最近土耳其有人報告,氧氟沙星400mg/d,利福平600mg/d,共6周,可取得與多西環素(200mg/d)合用利福平(600mg/d)同樣的療效。這一結果尚需進一步驗證。
(2)對於<8歲的兒童和孕婦的治療:由於這些患者不宜應用
4、布魯氏桿菌病
是由布氏桿菌引起的人畜共患傳染病。以母畜流產、不孕和公畜睾丸炎為特徵。OIE將其列為B類疫病。
1 病原學
布氏桿菌屬,為革蘭氏陰性小桿菌,不形成芽胞。根據其病原性、生化特性等不同,可分為6個種20個生物型,其中羊種布魯氏菌3個型、牛種布魯氏菌9個型、豬種布魯氏菌5個型,還有犬種布魯氏菌、綿羊附睾種布魯氏菌和沙林鼠種布魯氏菌。
布氏桿菌對各種物理和化學因子比較敏感。巴氏消毒法可以殺滅該菌,70℃10分鍾也可殺死,高壓消毒瞬間即亡。對寒冷的抵抗力較強,低溫下可存活1個月左右。該菌對消毒劑較敏感,2%來蘇兒3分鍾之內即可殺死。該菌在自然界的生存力受氣溫、濕度、酸鹼度影響較大,pH7.0及低溫下存活時間較長。
2 流行病學
布氏桿菌病廣泛地分布於世界各地,能侵害多種家畜、野生動物和人類。家畜的感染總體上可分為兩種類型:單一感染型和交差感染型。前者指家畜感染本種布氏桿菌,後者指由於牛、羊群共同放牧,通過相互間的接觸造成羊群既感染羊種布氏桿菌又感染牛種菌,或牛群既感染牛種菌又感染羊種菌等。山羊和綿羊對羊種布氏桿菌最易感。牛對牛種菌易感,也可感染羊種菌和豬種菌。豬對豬種菌和羊種菌均易感。馬和犬對羊、牛、豬三種布氏桿菌都有易感性,鹿對牛種菌和羊種菌易感。人類可以感染布氏桿菌。
病畜和帶菌動物,特別是流產母畜是最危險的傳染源。病菌存在於流產的胎兒、胎衣、羊水及陰道分泌物中。病畜乳汁或精液中也有病菌存在。
本病主要經消化道感染,也可經傷口、皮膚和呼吸道、眼結膜和生殖器黏膜感染。因配種致使生殖系統黏膜感染尤為常見。
本病一年四季均可發生,但有明顯的季節性。羊種布氏桿菌病春季開始,夏季達高峰,秋季下降;牛種布氏桿菌病以夏秋季節發病率較高。
3 臨床症狀
本病潛伏期長短不一,牛布氏桿菌病一般在14~120天之間。潛伏期的長短,視病原菌的毒力、感染量及感染時母牛的妊娠期而定。
母牛主要表現流產,可發生於妊娠的任何時期,多見於6~8個月。多見胎盤滯留,失去生育能力。公牛出現睾丸炎及附睾炎。有些牛發生關節炎、黏液囊炎和跛行。
綿羊和山羊常見流產和乳房炎。懷孕母羊易感染,常發生胎盤炎,引起流產和死胎。流產發生於妊娠後的3~4月。母山羊常常連續發生2~3次流產。公山羊生殖道感染則發生睾丸炎。有的病羊出現跛行、咳嗽。綿羊副睾種布魯氏菌感染其症狀局限於副睾,常引起附睾腫大和硬結。非懷孕母羊也可感染,但一般是一過性的。
豬的明顯症狀也是流產。出現暫時性或永久性不育、睾丸炎、跛行、後肢麻痹、脊椎炎,偶爾發生子宮炎、後肢或其他部位出現潰瘍。
犬可感染牛種、羊種和豬種布魯氏菌,但多為隱性感染,呈散發性,少數出現發熱。感染犬種布魯氏菌的母犬,妊娠40~50天發生流產,產死胎和出現不育症,淋巴結腫大。公犬常發生副睾炎、前列腺炎和菌血症。
馬可感染布氏桿菌的各個種,尤其對牛種和豬種菌最易感。多呈隱性感染,有的發生化膿性滑液囊炎,尤其在頭部和肩部,常見「馬肩瘺管」或「馬頸背瘡」。
4 病理變化
布氏桿菌最適宜在胎盤、胎衣組織中生長繁殖,其次是乳腺組織、淋巴結、骨髓、關節、腱鞘、滑液囊以及睾丸、附睾、精囊等。
特徵病變是胎膜水腫,嚴重充血或有出血點。子宮黏膜出現卡他性或化膿性炎症及膿腫病變。常見有輸卵管炎、卵巢炎或乳房炎。公畜精囊中常有出血和壞死病灶,睾丸和附睾腫大,出現膿性和壞死病灶。
5 診斷
5.1 根據臨床症狀和病理變化可做出初步診斷,確診需進一步做實驗室診斷。
5.2 實驗室診斷
在國際貿易中,指定診斷方法為緩沖布氏桿菌抗原試驗(BBAT)、補體結合試驗和酶聯免疫吸附試驗。替代診斷方法為熒光偏振測定法(FPA)。
病原檢查:抹片鏡檢(取病畜胎盤絨毛膜表面及水腫區邊緣觸片染色鏡檢)、分離培養、動物試驗。
血清學檢查:緩沖布氏桿菌抗原試驗(虎紅平板凝集試驗、緩沖布氏桿菌平板凝集試驗)、補體結合試驗(特異性高,但操作繁瑣)、間接酶聯免疫吸附試驗、競爭酶聯免疫吸附試驗、全乳環狀試驗(可用於篩選病畜群)、血清凝集試驗、布氏桿菌素試驗(適用於流行病學調查,由於其敏感性低,不能單獨作為正式的診斷試驗)。
病料採集:通常採取流產胎兒、胎盤、陰道分泌物或乳汁。
5.3 鑒別診斷
應與彎桿菌病、沙門氏菌病、鉤端螺旋體病、乙型腦炎、衣原體病和弓形蟲病等有流產症狀的疫病鑒別。
6 防治
堅持自繁自養。必須引進種畜時,要嚴格檢疫2次,確認健康者才能混群。
在疫區,每年定期以凝集反應檢疫2次,清凈群每年至少檢疫1次,檢出病畜應撲殺並做無害化處理。陰性反應畜可預防接種菌苗進行預防。
被污染的畜舍、運動場、飼槽、水槽等用10%石灰乳或5%熱火鹼水嚴格消毒;病畜分泌物、排泄物等應做無害化處理或消毒深埋。
獸醫、病畜管理人員、接羔員、屠宰加工人員,要嚴守衛生防護制度,特別在產仔季節更要注意。最好在從事這些工作前1個月進行預防接種,且需年年進行。
5、布氏桿菌病怎麼治療
本病是一種慢性傳染病,主要造成動物流產,故又稱為傳染性流產病。
(1)病原
為布氏桿菌,是一種很小的球形桿菌。分牛、羊、豬三型,有時三型有互相感染,人對三型均可感染,但以羊型危害最大。經消化道、皮膚傷口及呼吸道均能傳染給健畜。病畜的胎衣、羊水及乳汁中均含有這種病菌。凡是病畜接觸過的畜舍、墊草、殘余飼料、擠奶用具和助產人的手,都是危險的傳染媒介。
(2)症狀
本病為慢性病,從病羊外表很難看出,但孕母羊發生流產是該病的主要症狀。在流產前,全身發燒,卧地不喜吃草料,喜喝水,陰戶發紅,流出黃紅色的液體。經過1~2天流產,流產的母羊常發生乳房炎、關節炎和水腫,表現跛行。公羊表現睾丸腫大。
(3)剖檢
常見胃腸黏膜出血、水腫、潰瘍或壞死。
(4)治療
①土黴素粉劑:0.2~0.3克,或加等量胃蛋白酶用水灌服,每日2次。
②磺胺咪0.5克,次硝酸鉍0.2克,鞣酸蛋白0.2克,小蘇打0.2克,加水適量,混合後一次內服,每日3次。
③大蒜搗爛取汁半匙,白酒半匙,醋半匙,混合一次內服,每日2次,見效後喂至痊癒。
④白頭翁10克,黃連10克,秦皮10克,生山葯30克,山萸肉12克,訶子肉10克,茯苓10克,白術5克,白芍10克,乾薑5克,甘草6克,將上述葯煎2次,每次煎湯300毫升,混合後每隻羔羊灌服10毫升,每天2次。
⑤補液可用5%葡萄糖鹽水20~100毫升靜脈注射,強心用10%安鈉咖2.0~5.0毫升。食慾欠佳的可用人工胃液(胃蛋白酶10克,稀鹽酸5毫升,水1升)10毫升,每天一次。
(5)預防
①加強懷孕母羊後期飼養管理,提高羔羊抗菌能力。實行計劃配種,避免在最寒冷的季節產羔。羊舍要保溫乾燥,按時合理哺乳。
②每年秋季對母羊進行羔羊痢疾菌苗的預防性注射,產前2~3周再接種一次。
③羔羊在出生後12小時,灌服土黴素0.15~0.2克,每天一次,連用3天。
6、布魯氏桿菌病的疾病治療
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