骨橋蛋白骨質疏鬆

1、骨橋蛋白的生物學作用

1.細胞粘附　 OPN通過依賴RGD序列(αvβ1、αvβ3、αvβ5、αvβ1、α8β1)和非依賴RGD序列(α4β1、α9β1)結合存在於細胞表面上的多種整合素受體，起細胞粘附作用。OPN能粘附轉化的JB6細胞和HL60細胞(αvβ5和α4β1受體)，且OPN以非RGD形式結合轉化的成纖維細胞，凝血酶斷裂的OPN能增強OPN與APP活化和佛波酯活化的血小板和B淋巴細胞的粘附以及T細胞的粘附。
2.細胞募集　在體外OPN是一種化學趨化劑，外源性OPN以劑量依賴性方式(5.0~40 mg/L)指導成纖維細胞的遷移；它能刺激大鼠和牛平滑肌細胞的遷移，能支持粘附到人和小鼠T細胞，在體內皮下注射OPN後，在注射部位附近，OPN可以直接地誘導趨化作用並間接協助M向其它趨化劑移動。此外OPN還能促進破骨細胞和B細胞的趨化作用。
3.細胞因子表達 OPN加強Th1並抑制Th2細胞因子的表達，它通過LPS刺激直接誘導產生IL-12，抑制IL-10的表達。對IL-12的作用是依賴OPN磷酸化。OPN可以使早期Th1細胞因子應答極化。OPN還協同刺激人T細胞增殖並促進人單個核細胞表達Th1細胞因子。關節內OPN作為產生IL-1、NO和PGE2的一種固有的抑制劑。
4.信號轉導 骨橋蛋白作為一種基質功能性非膠原蛋白，主要通過兩種機制發揮細胞信號分子的作用。一是以分子內RGD基元與整合蛋白(integrin)家族分子結合;二是與細胞表面粘附性糖蛋白CD44以非RGD依賴方式結合。兩種作用方式均通過激活細胞內特異性信號傳導系統而介導細胞粘附、遷移和增殖。OPN與整合素受體結合後啟動信號轉導級聯反應，促進基因表達的改變，並誘導NF-КB活性，OPN能誘導骨骼蛋白的粘附斑激酶(FAK)和樁蛋白(Paxillin)的磷酸化改變，還能影響胞內Ca2+濃度。
5.腫瘤發生和轉移 基質來源的腫瘤，通常與OPN表達增強有關，OPN的過分表達與人胃癌進展有關。OPN通過刺激細胞信號轉導促進腫瘤惡性發展並能加強轉移性細胞的生存。OPN作為前列腺癌的生長和發展的旁分泌和自分泌的調節劑，重組OPN通過結合H因子，能使這些腫瘤細胞生存下來。
6.礦化作用 OPN含有與細胞外基質的礦物質表面相互作用的酸性結構域。OPN能抑制培養的血管平滑肌細胞的鈣化作用。
7.細胞免疫 OPN敲除後小鼠存在Th1介導的免疫缺陷，角膜感染HSV-1後，OPN敲除的小鼠不能對HSV表現遲發超敏反應，也沒有發生HSV伴隨的角膜炎，編碼OPN基因與小鼠抗立克次氏體基因(RicR)鄰近，引起OPN早期缺陷的RicR等位基因與立克次氏體感染有關，而高水平表達的OPN的小鼠對立克次氏體病有抵抗力，OPN在Th1細胞介導的肉芽腫的形成中起重要作用。
8.其他 它能引起單核細胞分化;加速血管生成;參與組織重建，如骨吸收、血管生成和創口癒合等;誘導尿激酶型纖溶酶原激活劑(UPA)的表達;抑制內皮細胞的凋亡;通過LPS和IFN-γ抑制腎小管上皮細胞的誘導型NO合酶(iNOS)的活性;OPN是小鼠M?的INOS的一種負反饋調節劑。它還與動脈粥樣硬化，自身免疫性疾病和其它炎症性疾病(肺纖維化)有關。

2、骨橋蛋白的參與體內代謝

OPN與骨代謝
成骨細胞、骨細胞及破骨細胞均可分泌OPN，在骨基質的礦化和吸收過程中有重要作用。OPN在軟骨內化骨、膜內化骨區域含量豐富，在編織骨中，於成骨細胞、骨細胞的胞漿中可以觀察。OPN分子中有一富含天冬氨酸的區域，通過這一區域OPN可以與組織中的輕磷灰石結合而發揮作用。在骨基質礦化開始後，成骨細胞中OPN-NA水平開始增高，在骨重建的過程中OPN的骨質線和骨膜板有較高的濃度，這意味著OPN對成骨細胞的翁附過程和礦化的中止過程起重要作用。OPN在骨重吸收的過程中也有重要的功能。在骨吸收的過程中，當破骨細胞與骨接觸時，在細胞與骨間隙間形成一個特殊的微結構，此結構是由破骨細胞膜皺折形成的指狀結構與骨表面合圍而成的空白區，它與細胞外環境隔離，其中酸性環境促使鈣溶解和磷酸鹽基質產生。
OPN與心血管系統
OPN是血管平滑肌由收縮表型向合成表型轉化的標志基因，又是血管細胞的主要粘附及趨化因子，還與動粥樣硬化斑塊的鈣化密切相關。白細胞介素21β和腫瘤壞死因子2α均可顯著誘導血管平滑肌細胞對OPN基因的表達。OPN在心血管特別是血管重塑過程中起重要調節作用，參與動脈粥樣硬化和血管成形術再在狹窄的細胞因子:PDGF、bFGF、EGF、TGFβ、TL21、AngⅡ均能刺激血管內皮細胞和平滑肌細胞過度表達OPN。OPN能抑制動脈鈣化的發生。
OPN與腫瘤
OPN有明顯促進腫瘤惡化的傾向。它可看作是一種惡性腫瘤生長的血清標志。OPN在許多組織中不同水平的表達與機體對感染和創傷的反應有關，OPN與實體瘤、動脈粥樣硬化斑塊、肉瘤組織形成等病理過程相關聯。OPN在腫瘤的轉移過程中也發揮重要作用，也可以看作是腫瘤已發生轉移的標志物，腫瘤轉移病人血清中OPN水平明顯升高。OPN能抑制NO的產生從而提高轉移細胞的存活力。
OPN與免疫系統
OPN在淋巴細胞，包括T細胞及NK細胞亞群，被非特異結合後不久即開始表達，另外OPN在對抗感染的非特異性免疫及自身免疫中起一定作用，其對巨噬細胞有化學誘導的作用，因而有人認為可以把其看作一種細胞因子[34]。OPN還可以與CD44相互作用，能引起CD44依賴的化學趨化性增高[35]，而CD44的變異型能與OPN的C端或N端結合，而不依賴於RGD序列
OPN與消化系統
OPN廣泛分布於消化系統，特別是與外界相同的腔道的上皮表面。經檢測證實有OPN分布與表達的消化器官和組織有：胃，小腸，闌尾，大腸，膽囊上皮，肝內膽管，胰腺，唾液腺管和唾液腺粘液細胞。胃腸道肌內神經叢的神經節，肝臟的巨噬細胞也有OPN的表達。
OPN與泌尿系統
在大鼠、小鼠及人的腎臟均有OPN的表達，OPN是血管腎小管細胞和腎乳頭表面細胞均可分泌OPN，在體外可抑制草酸鈣晶體的成核，生長和聚集，正常人尿中OPN的濃度為6×10-8mol·L-1，足以抑制草酸鈣結晶，其在尿中濃度可以反映尿抑制結石形成的能力。
OPN在炎症反應過程中的作用
OPN主要通過β1和β3整合素受體以及部分白細胞表面的CD44受體對白細胞的黏附和遷移發揮調理作用。。OPN經凝血酶酶切以後，其N-末端片段能夠與巨噬細胞表面的CD44受體結合，對巨噬細胞具有趨化功能;而其C-末端片段則可與細胞表面的整合素受體αvβ1相互作用，介導巨噬細胞的黏附和遷移。OPN與T細胞表面整合素受體以及CD44受體的相互作用能夠促進Th1的產生而抑制向Th2的分化，從而加強機體細胞免疫的功能而抑制體液免疫反應的發生。在心肌細胞、血管內皮細胞和巨噬細胞等細胞中，OPN能夠通過下調誘生型一氧化氮合酶( incibleNOS，iNOS)的表達，抑制炎症反應的發生。OPN在炎症反應過程中具有雙向調節作用，只是在不同的環境中OPN的作用可能會表現出不同的側重，如此可能更有助於控制炎症反應的強度，調節組織修復的進程。
OPN與組織修復
成體組織中創傷多通過瘢痕組織進行修復。在肉芽組織中，絕大多數新生血管內皮細胞中都存在OPN mR-NA的高表達。OPN能夠促進內皮細胞的增殖、遷移以及新生血管管形的發生。在缺血誘導的視網膜血管化的發病過程中，OPN能夠通過介導血管內皮細胞與細胞外基質的相互作用，加速血管內皮細胞的增殖，促進新生血管床的形成。中膜血管平滑肌細胞(VSMC)參與創傷癒合的進程，VSMC增殖以及細胞外基質堆積造成的血管壁肥厚以及血管重塑過程中血管壁的收縮是導致血管管腔狹窄的主要原因。在VSMC去分化過程中，OPN的表達明顯加強，OPN通過與整合素受體αVβ3等的相互作用，調節VSMC的黏附和遷移。
總之，骨橋蛋白作為一種新的細胞因子，在人體中發揮著重要的作用。越來越多的研究，證實著骨橋蛋白的重要性，相信以後還會發現更多它的神奇的作用，為人類疾病的研究和治療做出貢獻。

3、石磊的吉林大學教授

性別： 女
民族： 漢族
黨派： 無黨派
出生年月： 1968年4月9日
出生地： 吉林省長春市
學歷： 博士
系別： 放射化學與放射毒理
職稱： 副教授
學科專業： 放射醫學
研究方向： 抗腫瘤、抗輻射、促排葯物及多肽化學
講授課程： 放射化學、放射毒理、專業英語
教育經歷： 1999.9~2002.12中國科學院長春應用化學研究所物理化學專業，獲理學博士學位 .
1994.9~1997.7 白求恩醫科大學基礎醫學院葯物化學專業，獲醫學碩士學位
1987.9~1991.7 四平師范學院化學系化學教育專業，獲理學學士學位.
工作經歷： 2004.12~今 吉林大學公共衛生學院，副教授.
1997.7~2004.12 吉林大學公共衛生學院，講師.
1991.7~1994.9 白求恩醫科大學預防醫學院，助教. 吉林大學公共衛生學院攀登計劃基金
吉林大學青年基金
吉林省科技廳白求恩醫學專項基金 石磊，王勇，劉志強等．提高MALDI-TOF-MS測量溶菌酶分子量靈敏度的研究. 高等學校化學學報2002, 23(12)：2247-2249.
石磊，譚岩，劉志強等．虎眼萬年青多糖對小鼠免疫功能的調節作用. 中國免疫學雜志2002，18（11）：4-8.
石磊，季怡萍，邢俊鵬等．蛋白質分子量測定過程中的酸效應. 分析化學2002，30（8）：938-941.
石磊，蔣鑫萍，孫燕群等. 應用ECD 和CAD 裂解技術快速分析與鑒定骨橋蛋白中的多肽片段. 質譜學報 2008，29：215-216.
石磊，程舸，於雷等. ECD & CAD裂解方式在FT-ICR-MS中的應用. 分析測試學報2008，27：53-54. 參編教材：
《放射醫學專業英語》，原子能出版社，2006，北京
《放射醫學實驗教程》，原子能出版社，2009，北京 2002年獲吉林大學公共衛生學院中青年教師講課比賽一等獎；
2003年獲吉林大學青年教師講課比賽二等獎。

4、骨橋蛋白的蛋白結構

OPN作為帶負電的非膠原性骨基質糖蛋白，廣泛的分布於多種組織和細胞中，其相對分子質量約為44 kDa，約含300 個氨基酸殘基，其中天冬氨酸、絲氨酸和谷氨酸殘基佔有很高的比例，約占總氨基酸量的一半。骨橋蛋白多肽鏈的二級結構中包括8個α螺旋和6個β折疊結構，高度保守的RGD基元兩端各有一個β折疊結構，分子中心部位是a螺旋結構。骨橋蛋白分子中約含有30個寡糖基，其中10 個是唾液酸。
(1)精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸（RGD）序列：Yee(1996年)提出OPN含有(Arg-Gly-Asp，RGD)序列，這一序列在不同物種的OPN中都普遍存在，這一序列對於OPN發揮粘附功能起著重要的作用。RGD序列為高度保守的特異性細胞黏附功能閾，通過該序列可與細胞表面整合素受體 avβ、avβ3、avβ5等結合，介導糖蛋白與細胞間的粘附過程，引起局部黏附，改變細胞骨架，促進細胞游。RGD序列具有高度保守性，一旦變異或缺失將喪失其促粘附的功能。
(2)凝血酶裂解位點：RGD序列結構中有RS位點，位於RGD序列羧基端第6位氨基酸殘基所形成的肽鍵，是凝血酶的裂解位點，可將其裂解成45kD及24kD兩個片斷。其中45kD片斷更能刺激細胞的黏附和遷移。與完整的OPN分子相比，被凝血酶裂解後含有RGD序列的N末端片斷（45kD片斷）促進粘附的功能反而加強，而缺乏RGD序列的氨基片斷（24kD片斷）其粘附能力減弱。凝血酶對OPN的剪切很可能是機體對OPN功能的一種自然生理調節。
(3）基質金屬蛋白酶（MMP）作用位點：目前發現在OPN分子中存在3個MMP上的酶切位點和2個 MMP-7的酶切位點。與凝血酶的功能相似，OPN經MMP-3或MMP-7酶切以後其誘導巨噬細胞遷移的功能明顯增強；
(4）非RGD細胞粘附位點：在骨橋蛋白的羧基末端序列中，還有一段非RGD的細胞粘附位點，OPN以非RGD依賴方式與細胞表面CD44結合而發揮細胞信號分子的作用，其主要與細胞免疫有關；
(5）鈣離子結合位點：酪氨酸蛋白激酶Ⅱ、蛋白激酶C等能催化骨橋蛋白分子中絲氨酸和蘇氨酸殘基發生磷酸化，磷酸化的OPN可與多個 Ca2+結合在一起。

5、骨橋蛋白的調節方式

OPN分布廣泛並受多種因素的調控，能與許多物質結合。
(1)結合多種整合素受體:已發現αvβ1、αvβ3、αvβ5、α5β1、α8β1、α4β1和α9β1等7種整合素能與OPN結合，2個α4β1整合素結合部位位於OPN的N-末端凝血酶片酸的38 aa結構域上，α9β1能結合凝血酶斷裂的OPN N-末端上新型識別序列SVVYGLR。
(2)與CD44變異體(CD44V)結合:CD44V以非RGD序列結合OPN的C末端和N末端結構域。
(3)與補體H因子結合:OPN能以高親和力結合H因子，調節補體活性。
(4)與胰島素樣生長因子結合蛋白-5(IGFBP-5)結合。
(5)其他:羥基磷灰石(HA)、纖連蛋白(FN)、Ⅰ型膠原和骨鈣蛋白都能與OPN結合。非磷酸化OPN(np69)能與可溶性FN形成免疫復合物，而磷酸化OPN(pp69)能結合細胞表面相關的FN。 OPN有磷酸化和去磷酸化兩種形式，磷酸化修飾是影響OPN活性的一個重要因素。多種激酶對OPN中絲氨酸、蘇氨酸殘基發生磷酸化有不同部位，發生蛋白磷酸化部位不同可能是其組織特異性的原因之一。磷酸化後的OPN與細胞表面整合素受體結合，而去磷酸化OPN則能與CD44受體結合，從而引起不同的效應。完整的OPN分子經凝血酶剪切成為兩個大小不同的肽段，剪切後隱含於蛋白氨基酸鏈內部的受體結合部位RGD序列得以暴露，能夠介導RGD序列依賴的黑色素瘤細胞的粘附和遷移，而完整的OPN分子則不具有這樣的功能。
骨橋蛋白基因5』上游-94~-80、-124~-115及-439~-409序列為啟動子或增強子順式作用元件，它們與相應的反式作用因子結合後，增強骨橋蛋白基因的表達，但在三者中，後者的作用較前二者弱。-107~-105區域為負調控元件，該元件與相應的反式作用因子結合後，降低骨橋蛋白的表達活性。 OPN表達受激素生長因子，癌基因產物的調控。不同的細胞類型可能有不同的調節機制，種因素能調控OPN的表達:
(1)感染和損傷能使T細胞和MФ的OPN上調表達。
(2)骨激素:VitD3通過OPN啟動子的VDRE應答元件刺激OPN基因轉錄，VitD3和視黃酸都能使正常和轉化的大鼠骨細胞產生OPN，甲狀腺激素(PTH)能顯著地減少大鼠成骨細胞肉瘤細胞系ROS17/2.8的OPN量。VitE能抑制大鼠腎OPN mRNA表達。
(3)性激素:17β-雌二醇和孕酮都能誘導OPN的產生，雌激素能抑制平滑肌細胞(VSMC)表達OPN。
(4)細胞因子:IL-1能上向調節大鼠新月形腎小球腎炎表達OPN，並能調節成骨細胞表達OPN mRNA;Hoxa-9抑制TGF-β誘導OPN基因轉錄;FGF亦能誘導OPN基因的表達，瘤壞死因子(TNF-α)、血小板源性生長因子(PDGF)、白細胞介素-1、成纖維生長因子(FGF)、轉化生長因子β(TGF-β)和內皮生長因子(EGF)均能誘導OPN基因的表達，PDGF、bFGF、EGF、TGFβ、AngII等能夠刺激血管內皮細胞和平滑肌細胞表達骨橋蛋白分子。
(5)葡萄糖和血清:高濃度的葡萄糖通過PKC依賴途徑和己糖胺途徑增強大鼠主動脈平滑肌細胞表達OPN;血清活化的血管平滑肌細胞高水平表達OPN mRNA。
(6)腎素-血管緊張素系統(RAS):腎局部遠段小管的RAS能上調OPN的產生，血管緊張素Ⅱ能直接增加人心臟OPN的表達。
(7)鈉鹽飲食:高鹽飲食能增強完整腎或培養的腎細胞表達OPN，而缺鈉飲食能減少大鼠腎表達OPN。
(8)其他:低氧能刺激OPN mRNA轉錄水平及OPN的產生，TPA、癌基因(ras)能誘導OPN mR-NA的轉錄。患IgA腎病的病人尿分泌OPN減少，振盪液體流動通過胞內Ca2+動員和MAPK活化調節OPN基因。AngⅡ能直接增加心臟OPN的表達。高蛋白和高膽固醇飲食可以誘導腎表達骨橋蛋白。脂多糖(LPS)和一氧化氮(NO)激活的巨噬細胞，可誘導OPN基因表達和蛋白質的分泌。腫瘤促進劑佛波酯可通過激活多種轉錄調控因子而增強骨橋蛋白基因表達。

6、什麼是癌細胞侵襲

癌細胞侵襲是指腫瘤細胞向局部侵犯或遠處轉移

瘤細胞侵襲轉移的機制

瘤細胞由其原發部位侵入血管或淋巴管或體腔，部分細胞被血流、淋巴流帶到另一部位或器官，在該處繁殖生長，形成與原發瘤同樣類型的腫瘤，這一過程即為轉移。轉移惡性腫瘤最重要的特徵之一，也是影響患者預後的主要因素。
1889年Paget提出了「種子與土壤」學說，認為只有當合適的腫瘤細胞（種子）與特定的組織或器官（土壤）提供的生長環境有特殊的親和力時才會轉移。近年來，對這一學說有了新的認識。1977年Fidler等人首次證實腫瘤細胞的異質性—即原發腫瘤組織中的瘤細胞具有不同的生物特性，其中就有某些具有轉移潛能的細胞。這些細胞在宿主的選擇壓力之下，具有遷移性、浸潤性，形成瘤栓，在循環中存活，在遠處毛細血管床滯留和浸潤器官實質並增殖，最終形成一個單克隆的轉移灶。這一群轉移細胞在此過程中，細胞遺傳學不穩定性不斷增加，也就是說轉移性越高，表型改變越快逃避外界治療的可能性越大。同時，器官環境對腫瘤細胞有多方面的調節作用。通過對腫瘤患者的臨床觀察和實驗性腫瘤的研究，發現腫瘤在特定的器官的轉移不依賴其血流率、血管分布或到達該器官的瘤細胞的數量。腫瘤細胞隨循環到達許多器官的微血管系統，但只浸潤某些器官的實質。可見轉移的行成是那些具有高轉移能力的細胞亞群與相適應環境相互作用的結果。
所有的腫瘤發生轉移，基本步驟相似。一般有以下幾方面：
一． 瘤細胞從原發瘤體脫落
腫瘤形成以後，通過所在器官的彌散獲得最初的生長營養，細胞逐漸分化、增生。當瘤體直徑達到2mm以上，增殖生長要靠足夠的血液供應。研究證明腫瘤細胞及間質細胞釋放促血管生成的因子如血管內皮細胞生長因子（vascular endothelial cell growth factor ,VEGF）,血管形成素（angiogenin），成纖維細胞生長因子(fibroblast growth factor,FGF),白細胞介素-8（interleukin-8），血小板來源的內皮細胞生長因子（platelet-derived endothelial cell growth factor, PD-ECGF）等。這些因子使內皮細胞遷移、增殖形成管腔結構，最終在瘤體內部形成微血管網。
已有結果證明瘤細胞之間相互黏著的能力較正常細胞為低，透射電鏡顯示多種腫瘤細胞的橋粒、半橋粒和間隙連接數量減少。細胞內的鈣含量也減少，這些都是構成粘附力降低的原因之一。另外還有報告瘤細胞表面電荷密度增加，相互排斥力加大，尤其是轉移率高的細胞電泳率增高，這使得瘤細胞從瘤體脫落的可能性增加。 還有細胞表面的某些粘附分子缺失令細胞間連接遭受破壞，也有脫落的危險。
二． 瘤細胞侵襲周圍組織
侵襲是腫瘤轉移的前奏，轉移是侵襲的繼續和結果。瘤細胞從母體脫落和向周圍組織侵襲可同時進行，或有前有後。Virchow在十九世紀就指出癌細胞具有阿米巴運動，且速度快於非惡性細胞。近期多位作者指出，在這一過程中腫瘤細胞利用偽足運動，表面分泌多種因子，細胞骨架產生相應變化，完成定向運動。
在侵襲的過程中，至少有五類因子參與：1。運動因子。多由腫瘤細胞分泌它能多方面刺激細胞運動如趨化、吞噬等。分裂素就是重要的一類。分裂素又可以為三類，具有代表性的有自分泌因子（AMF）、肝細胞生長因子（HGF）、表皮生長因子（EGF）、轉化生長因子（TGF）等;2。粘附分子。是一類參與細胞間或細胞與間質相互作用的細胞表面結構。由四個超家族組成—整合素，鈣粘連素，免疫球蛋白，選擇素。其中整合素研究較多，它可以賦予細胞與基底膜相互作用的能力，利於腫瘤細胞的粘附。3。趨化因子。細胞外基質、基底膜是腫瘤轉移的一道屏障，它們由纖維結合素、層粘連蛋白、玻璃體結合蛋白、Ⅳ型膠原、彈性蛋白組成。一旦降解釋放出來就會起到趨化因子的作用，導向釋放的部位。4。胞外基質降解酶。為蛋白水解酶可降解基質。常見的有基質金屬蛋白酶（MMP），胞漿酶，尿激酶纖維蛋白溶酶原激活因子（uPA），組織蛋白酶。5。血管形成因子。血管形成本身就有一定的侵蝕性，腫瘤細胞可以沿著新生血管所開啟的膠原裂隙侵蝕，因此血管形成是腫瘤侵襲的一個條件。
三． 瘤細胞侵入血管或淋巴管
腫瘤細胞進入進入循環之前，侵入血管、淋巴管是必經的步驟。新生的腫瘤血管內皮和基底膜都有缺陷，腫瘤細胞易於穿越基底膜屏障進入循環。其成就前已述及，通過大量的蛋白-蛋白和蛋白-多糖的相互作用構成穩定的有機體。具有轉移潛能的細胞較其它細胞更易結合Ⅳ型膠原，之後偽足表面的蛋白水解酶可降解間質膠原和蛋白多糖。使基底膜的連續性、完整性遭到破壞。瘤細胞的細胞骨架發生相應的變化，細胞形態發生改變，游入血管。
四． 瘤細胞循環中
進入循環的瘤細胞絕大多數被迅速清除，只有不足1%的細胞最終存活，而且各種腫瘤的存活能力在本質上還有差異。鏡下可見腫瘤細胞形成聚集體，其生存能力大大增加。纖維蛋白沉積物、血小板聚集體粘附於瘤細胞表面形成瘤栓，可以保護之免受機體免疫系統清除及機械的損傷。並利於其滯留於毛細血管床。在腫瘤細胞通過毛細血管時，剪切力和細胞因子活化內皮細胞，產生一氧化氮（nitric oxide, NO）。同時活化的吞噬細胞也產生一氧化氮。它可以調節血管的擴張和血小板凝集，進而影響細胞的滯留。還能誘導細胞凋亡，甚至直接發揮細胞毒作用。最終，僅一小部分經過「篩選」的細胞存活，到達靶器官。
五． 腫瘤細胞的滯留、粘附、穿出管壁
毛細血管的內皮細胞快速更新和脫落是正常的連續生理活動。同時，內皮細胞的磨損和撕裂也能導致暫時的裂隙並暴露基底膜。腫瘤的粘附分子可以將腫瘤瘤栓粘附於該處，瘤栓中的血小板也能與損傷內皮細胞表面的纖維蛋白沉積物加強這種結合作用。於是，腫瘤細胞-血小板-淋巴細胞團塊滯留成功。另有報道瘤細胞的滯留粘附有器官特異性。
上過程有多種因子參與除粘附分子、趨化因子之外，還有一類所謂的歸巢因子。定址素和歸巢受體就是典型的代表。它們幫助腫瘤尋找靶器官。位於腫瘤細胞的歸巢受體與內皮細胞表面的定址素結合，使細胞靶向錨著。CD44作為轉移抑制基因被認為是歸巢受體參與細胞間細胞基質間的信號轉導。ICAM-1 ，骨橋蛋白（OPN）同樣也有類似的作用。
粘附後的細胞團迅速生長，並分泌基質降解酶（如前述）第二次破壞基底膜，進入器官實質。
六． 轉移瘤的形成
瘤細胞穿出後，與血管外的基質發生第三次粘附，這種粘附力高於對非靶器官實質細胞的粘附，又顯示了其器官特異性。最初的轉移瘤是在靶器官毛細血管周圍形成的微小病灶。在缺乏支持組織的情況下，部分微小轉移灶被宿主免疫系統清除。另一些克隆灶通過自分泌的血形成因子（前述）及時獲得血供，並在與宿主相互作用中，自分泌、旁分泌一些生長因子，促使細胞增殖形成大的瘤體。關於轉移瘤生長相關的細胞因子，近年來研究較多的有bFGF, IL-8, IGF-Ι，IGF-Ⅱ, EGF, IL-6, TGF-β。BFGF,IL-8作為黑色素瘤自分泌的因子可以促進轉移灶的增殖，成骨細胞分泌bFGF,IL-6則可刺激前列腺癌轉移細胞的生長。骨髓里的TGF-β, IGF-Ι、Ⅱ則是作為多發性骨髓瘤、乳腺癌的生長因子。轉移瘤在局部的正負調節機制及宿主的免疫系統影響下，或局限於原位處於休眠狀態，或打破平衡，不斷增大甚至再次浸潤轉移，形成轉移瘤的轉移。
總之，轉移是一個連續的過程，轉移的最終結果由轉移細胞與宿主體內各平衡因素之間相互作用決定。轉移瘤的形成是靠破壞體內平衡來實現的。研究這一機制，將為腫瘤轉移的治療提供新的思路和方法

7、骨橋蛋白的基因結構

OPN人的OPN基因定位在染色體4q13，是單一編碼基因，8kb大小，具有7個外顯子和6個內含子組成。小鼠位於5號染色體上，基因長約7Kb，包括7個外顯子，其5』端有啟動子序列，該啟動子中IKb長度也被測序並用GCG程序分析了轉錄因子的可能識別部位，這些轉錄因子包括API-5、PEA-3、PEA-1、Ets等。
OPN基因結構的變異性較大。OPN本身是多等位基因，在小鼠有3個等位基因，人類至少有2個等位基因。通過比較分析，發現盡管不同種屬甚至同一種屬不同組織的OPN基因具有一定的多態性，其總體核苷酸序列還是呈中度保守性，其中編碼N末端和C末端以及含RGD序列的50個氨基酸區具有高度序列保守性。
OPN啟動子包括1個TATA盒(-28-22)、1個顛倒的CCAAT盒(-55-50)及1個GC盒及多種轉錄因子的結合位點。API結合部位是高度保守的增強子樣元件。OPN基因啟動子上含有多個應答元件，如VitD反應元件，糖皮質激素反應元件，Ras反應元件，激活蛋白(AP)21結合位點等。在OPN啟動子上有5個PEA-3的識別位點，PEA是癌基因轉錄因子Ets家族的重要靶點，在多種基因的TPA應答中起重要作用。RAE是ras激活元件，位於OPN啟動子的-725-712，它是一個類Ets序列，在Ha-ras轉染細胞O田N轉錄增強與其有關。在啟動子顛倒的CCAAT盒上，距轉錄起始點-53-49處有-v-Sre反應元件，其參與介導v-Src轉染細胞中OPN轉錄水平的上調。啟動子中還存在BPV-E2(十70-+82)及API/PEA-1結合位點(-718-714，-312-305)，它們都與癌基因激活的表達增強有關，BPV-E2是一個由牛乳頭瘤病毒工型所編碼的轉錄因子，能使病毒轉化嚙齒類動物的細胞。此外，研究發現，OPN基因5 '上游側區有孕激素調控元件。

8、什麼叫做「骨橋」?

是指兩個相鄰的骨質之間，因某種因素導致的，骨質的異常增生，而使兩骨質部分融合，融合的部分稱骨橋。

9、什麼叫做骨橋?

是指兩個相鄰的骨質之間，因某種因素導致的，骨質的異常增生，而使兩骨質部分融合，融合的部分稱骨橋。骨橋可見於很多部位，一般，椎體間〔前緣〕比較常見，你說的關節融合比較少見，可以見於外傷後、腫瘤等情況。

10、骨橋蛋白的介紹

骨橋蛋白（osteopontin, OPN）是一種蛋白質，廣泛的分布於多種組織和細胞中，能夠參與組織修復，自身代謝等功能。