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由小鼠骨髓

發布時間:2021-07-23 03:31:37

1、由小鼠骨髓瘤細胞與一B細胞融合後形成的細胞克隆所產生的抗體稱為

答案是A,這應該毫無疑問吧。
教材上對單克隆抗體應該有比較詳盡的介紹,我來說說B、C、D選項。
多克隆抗體:天然抗原分子中通常含有多個不同的抗原表位,那麼該抗原刺激機體後,多個B細胞克隆被激活,從而產生的抗體中實際上含有針對該抗原各個表位的免疫球蛋白,稱為多克隆抗體。多克隆抗體獲得的途徑有:動物免疫血清、恢復期病人血清或者免疫接種人群。

單鏈抗體:單鏈抗體是利用基因工程技術在大腸桿菌中表達的人工合成抗體,只有完整抗體的一條鏈,因此得名為單鏈抗體。它是由抗體重鏈可變區和輕鏈可變區通過15~20個氨基酸的短肽連接而成。

嵌合抗體:以人-鼠嵌合抗體為例,它是一種通過基因工程技術制備的抗體,由鼠源性抗體的V 區基因與人抗體的C 區基因拼接為嵌合基因,然後插入載體,轉染骨髓瘤組織表達的抗體分子。

2、制備小鼠骨髓染色體標本過程中有哪幾個主要步驟影響製片結果

在制備小鼠骨髓細胞染色體標本過程中以下幾個步驟需要注意:

提前3-4小時候注射秋水仙素,時間太長或者太短都會影響染色體中期的數目和形態。

在低滲過程中時間和吹打都很重要,低滲過度染色體膨脹,染色後肥肥的,低滲時間不過染色後染色體顏色很深看不出條帶。

滴片,如果是教學的實驗,要求玻片是冰的,而且要傾斜,滴的高度一般在25-30CM,滴完要過酒精燈,讓固定液蒸發。滴的數量不要太多否則會重疊.如果是醫院里的染色體製片有專門的滴片機。

小鼠骨髓細胞染色體標本製作:

原理:

由於小鼠四肢骨內骨髓細胞中的造血幹細胞是生成各種血細胞和原始細胞,具有高度的分裂能力,本實驗採用這一材料,通過前處理,低滲,固定,製片,染色等步驟製得染色體標本,可觀察到許多處於分裂中期的染色體,可以進行染色體組型分析;

試劑、試劑盒:秋水仙素、姬姆薩染液、固定液、低滲液、生理鹽水;

儀器、耗材:天平、離心機、恆溫培養箱、顯微鏡;

實驗步驟

一、材料和方法

1.  材料:小白鼠。

2.  設備:天平,離心機,恆溫培養箱,顯微鏡。

3.  葯品:秋水仙素,姬姆薩染液,固定液,低滲液,生理鹽水。

二、步驟

秋水仙素處理--取骨髓--低滲處理--固定--離心--再固定--再離心--滴片--染色--鏡檢--封片。

3、由小鼠的B淋巴細胞(染色體數目40條)和小鼠骨髓瘤細胞(染色體數目60條)制備的雜交瘤(問題補充)

人家問的是常規下的染色體數,你硬是去分析有絲分裂後期,怎麼行呢。再者,細胞處於分裂期的時間很短,別說分裂後期了。

4、如何取小鼠骨髓細胞

1、頸椎脫臼法處死小鼠(C57型小鼠),放在75%酒精中侵泡3-5分鍾後,拎出後將小鼠鋪於超凈台上一個消毒托盤上。
2、無菌提取小鼠的四肢骨,用眼科鑷小心捏起小鼠兩髖關節之間的腹部皮膚,用眼科剪小心剪開皮膚,並分離兩下肢的皮膚,往下在腳踝處剪斷,往上在髖關節處剪斷,這樣可以游離出小鼠的兩條下肢。
3、小心剝離肌肉,分別剪下Femurs(大腿骨)and Tibias(脛骨),剪去兩端軟骨,露出紅色的骨髓腔。注意盡可能少的剪走骨髓腔。用紗布將骨頭上的肌肉用紗布擦拭乾凈。
4、拿一支1ml的無菌注射器,每支吸取1mlHBSS液,並用無菌的針頭套管將之輕輕擰彎。輕輕插入骨髓腔,沖洗骨髓腔以獲得骨髓,一般用2-3ml培養基沖洗兩次,可沖出絕大部分細胞。
5、過濾:用2OO目的濾網過濾,將濾網的中央插入到離心管裡面25px處,然後用注射器吸取骨髓液,慢慢將骨髓液經濾網注入離心管中,去除殘渣。
6、離心:將離心管放置離心機中離心10分鍾(1350r/min)
7、去上清,加入1ml紅細胞裂解液ACK,靜置3分鍾,再加9ml HBSS溶液,進行離心10分鍾,棄上清。
8、用HBSS液洗滌骨髓細胞2次,室溫,1350r/min離心10分鍾。計數活細胞,用培養基調整細胞濃度至1X106個細胞/ml.
9、在試管中加入RPMI-1640培養基,然後再加入20ng/ml的細胞因子GM-CSF、5%FBS、0.1%的2-巰基乙醇,
10、吸取培養基加入到沉澱中混勻,24孔板鋪板培養,每個孔1ml.

5、如何提取小鼠骨髓細胞?

1、頸椎脫臼法處死小鼠(C57型小鼠),放在75%酒精中侵泡3-5分鍾後,拎出後將小鼠鋪於超凈台上一個消毒托盤上。
2、無菌提取小鼠的四肢骨,用眼科鑷小心捏起小鼠兩髖關節之間的腹部皮膚,用眼科剪小心剪開皮膚,並分離兩下肢的皮膚,往下在腳踝處剪斷,往上在髖關節處剪斷,這樣可以游離出小鼠的兩條下肢。
3、小心剝離肌肉,分別剪下Femurs(大腿骨)and Tibias(脛骨),剪去兩端軟骨,露出紅色的骨髓腔。注意盡可能少的剪走骨髓腔。用紗布將骨頭上的肌肉用紗布擦拭乾凈。
4、拿一支1ml的無菌注射器,每支吸取1mlHBSS液,並用無菌的針頭套管將之輕輕擰彎。輕輕插入骨髓腔,沖洗骨髓腔以獲得骨髓,一般用2-3ml培養基沖洗兩次,可沖出絕大部分細胞。
5、過濾:用2OO目的濾網過濾,將濾網的中央插入到離心管裡面25px處,然後用注射器吸取骨髓液,慢慢將骨髓液經濾網注入離心管中,去除殘渣。
6、離心:將離心管放置離心機中離心10分鍾(1350r/min)
7、去上清,加入1ml紅細胞裂解液ACK,靜置3分鍾,再加9ml HBSS溶液,進行離心10分鍾,棄上清。
8、用HBSS液洗滌骨髓細胞2次,室溫,1350r/min離心10分鍾。計數活細胞,用培養基調整細胞濃度至1X106個細胞/ml.
9、在試管中加入RPMI-1640培養基,然後再加入20ng/ml的細胞因子GM-CSF、5%FBS、0.1%的2-巰基乙醇,
10、吸取培養基加入到沉澱中混勻,24孔板鋪板培養,每個孔1ml.

6、如何從小鼠骨髓中分離和培養DC

拉頸處死小鼠,無菌剝離股骨和脛骨,用Hank』S沖出骨髓細胞,PBS洗
滌1次,用0.83%Tris—NH4CL裂解紅細胞,RPMI1640培養液洗滌2次,調整細胞濃度為1×106個/mL,
並加入rmGM—CSF(1000 U/mL)和rmlL-4(500 U/mL),接種於24孔培養板,置於37~C,5%CO2孵箱中
培養.第3天輕輕搖動培養板,吸走大部分懸浮細胞,加人等量的培養液,並補足細胞因子.隔日半量換液
1次,第7天收集懸浮或稍微貼壁的細胞.

7、小鼠骨髓幼稚細胞和lymphocyte的區別

小鼠骨髓幼稚細胞和lymphocyte的區別
成年人的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。
紅骨髓能製造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細菌、病毒等;某些淋巴細胞能製造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。
黃骨髓主要是脂肪組織,當人體貧血時,它可以轉化為紅骨髓。有些葯物如氯黴素及呋喃類,在長期大量使用後,可影響骨髓造血功能,引起再生障礙性貧血.

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