1、請問厭氧培養的條件是什麼?
配製培養基，保證菌種生長的周圍環境能為他提供足夠的營養，包括碳源、氮源、微量元素、生長因子，控制pH，溫度和其他的條件，以確菌種的穩定生長，將培養基至於厭氧條件下，製造厭氧環境的方法有很多，簡單的類似於樓上所說的，條件允許的話可以採用在厭氧罐內進行菌種的培養
2、分離培養厭氧菌失誤的原因有哪些?
主要是厭氧環境沒有保護好。厭氧菌采樣後，需要及時接種並提供厭氧環境，暴露在空氣中厭氧菌會很快死亡，同時在運送過程中最好保溫運送。此外，樣品採集時也需要採集深部的標本，厭氧菌感染一般發生在組織深部。
厭氧菌(anaerobicbacteria)是一類在無氧條件下比在有氧環境中生長好的細菌，而不能在空氣(18%氧氣)和(或)10%二氧化碳濃度下的固體培養基表面生長的細菌。這類細菌缺乏完整的代謝酶體系，其能量代謝以無氧發酵的方式進行。它能引起人體不同部位的感染，包括闌尾炎、膽囊炎、中耳炎、口腔感染、心內膜炎、子宮內膜炎、腦膿腫、心肌壞死、骨髓炎、腹膜炎、膿胸、輸卵管炎、膿毒性關節炎、肝膿腫、鼻竇炎、腸道手術或創傷後傷口感染、盆腔炎以及菌血症等。
3、燭缸培養法為什麼不是厭氧培養法
細菌的培養方法
根據培養細菌的目的和培養物的特性培養方法分為一般培養法,二氧化碳培養法和厭氧培養法三種.
1.一般培養法 將已接種過的培養基,置37℃培養箱內18-24小時,需氧菌和兼性厭氧菌即可於培養基上生長.少數生長緩慢的細菌,需培養3-7天直至一個月才能生長.為使培養箱內保持一定濕度,可在其內放置一杯水.培養時間較長的培養基,接種後應將試管口塞棉塞後用石臘凡士林封固,以防培養基乾裂.
2.二氧化碳培養法 某些細菌,如牛流產布氏桿菌和胎兒弧菌等需要在含有10%二氧化碳的空氣中才能生長,尤其是初代分離培養要求更為嚴格.將已接種的培養基置於二氧化碳環境中進行培養的方法即二氧化碳培養法,常用方法有以下幾種:
(1) 二氧化碳培養箱 可將已接種的培養基直接放入箱內孵育,即可獲得二氧化碳環境.
(2) 燭缸法 將已接種的培養基,置於容量為2 000ml的磨口標本缸或乾燥器內.缸蓋或缸口處均需塗以凡士林,然後點燃蠟燭直立置入缸中,密封缸蓋.待燃自行熄滅時,容器內約含5-10%的CO2 容器置37℃培養.
(3) 重碳酸鈉-鹽酸法 每升容積的容器內,重碳酸鈉與鹽酸按0.4g與3.5ml的比例,分別將兩種葯各置一器皿內(如平皿內),連同器皿置於標本缸或乾燥器內,蓋嚴後使容器傾斜,兩種葯品接觸後即可產生二氧化碳.
3.厭氧培養法 目前常用的厭氧培養方法有厭氧罐法,氣袋法及厭氧箱三種.
(1) 厭氧罐法 是目前應用較廣泛的一種方法,共分為以下幾種.
抽氣換氣法:該法適用於一般實驗室,其特點是較經濟並可迅速建立厭氧環境.標本接種後,將平板放入厭氧罐,擰緊蓋子,用真空泵抽出罐中空氣,使壓力真空表至-79.98KPa,停止抽氣,充入高純氮氣使壓力真空表指針回0位,連續反復3次,最後在罐內-79.98KPa的情況下,充入70%的N2 ,20%H2 ,10%CO2 (有人改用20%CO2 及80%H2 ,亦可獲得好結果).罐中需放入冷催化劑鈀粒,可催化罐中殘余的O2 和H2 化合成水.同時罐中應放有美藍指示管,美藍在有氧的環境下呈藍色,無氧時為紅色.臨用前首先將美藍煮沸使變成無色,放入罐中先呈淺藍色,待罐中無氧環境形成,美藍即可持續無色.
氣體發生袋法:氣體發生袋系由錫箔密封包裝,其中含有兩種葯片,一種為含枸椽酸和重碳酸氫鈉的葯片,另一種是含有硼氫化鈉的葯片.前者遇水放出二氧化碳,後者可釋放氫.使用時在袋的右上角剪一小口,灌進10ml蒸餾水,立即放入含有鈀粒,指示劑及平板培養基的厭氧罐中,擰緊蓋子經2-3分鍾後,可感到蓋子微熱並有少量水蒸氣出現.密封後1小時左右罐中的O2 的含量可低於
4、關於厭氧菌培養的幾個問題
根據對O₂的耐受程度，可將厭氧菌分為3大類：（1）對氧極端敏感的厭氧菌：代表菌種為月形單胞菌。這類細菌對厭氧條件要求很高，在空氣中暴露10min即死亡，臨床上很難分離出；（2）中度厭氧菌：代表菌種為脆弱擬桿菌、產氣莢膜梭菌等臨床分離常見的厭氧菌。它們在空氣中暴露60～90min或在膿汁抽出72h後仍然能分離出來；（3）耐氧厭氧菌：代表菌種為溶組織梭菌。這類細菌不能利用氧，在無氧條件下生長好，而在有氧條件下生長不佳
5、厭氧細菌培養要注意什麼
厭氧菌的培養方法
厭氧菌在有氧的情況下不能生長。要培養厭氧菌，必須創造一個無氧的環境。通常用培養基中加入還原劑，或用物理、化學方法去除環境中的游離氧，以降低氧化還原電勢。如皰肉培養基、硫基乙酸鈉培養基，牛心腦浸液培養基等。常用的厭氧培養方法有許多，可根據實際情況選用。
1．厭氧缸法接種好標本的平板或液體培養基試管，可放入厭氧缸內培養，厭氧缸是普通的乾燥缸，用物理化學的方法使缸內造成厭氧環境，從而將厭氧菌培養出來。
2．厭氧袋（Bio-bag）即在塑料袋內造成厭氧環境來培養厭氧菌。塑料袋透明而不透氣，內裝氣體發生管（有硼氫化鈉的碳酸氫鈉固體以及5%檸檬酸安瓿）、美蘭指示劑管、鈀催化劑管、乾燥劑。放入已接種好的平板後，盡量擠出袋內空氣，然後密封袋口。先折斷氣體發生管，後折斷美蘭指示劑管，命名袋內在半小時內造成無氣環境。如不突變表示袋內已達厭氧狀態，可以孵育。
3．厭氧手套箱（Anaerobie glove box）是迄今為止國際上公認的培養厭氧菌最佳儀器之一。它是一個密閉的大型金屬箱，箱的前面有一個有機玻璃做的透明面板，板上裝有兩個手套，可通過手套在箱內進行操作，故名。箱側有一交換室，具有內外二門，內門通箱內先關著。欲放物入箱，先打開外門，放入交換室，關上外門進行抽氣和換氣（H2，CO2，N2）達到厭氧狀態，然後手伸入手套把交換室內門打開，將物品移入箱內，關上內門。箱內保持厭氧狀態，也是利用充氣中的氫在鈀的催化下和箱中錢殘余氧化合成水的原理。該箱可調節溫度，本身是孵箱或孵箱即附在其內，還可放入解剖顯微鏡便於觀察厭氧菌菌落，這種厭氧箱適於作厭氧細菌的大量培養研究，大量培養基可放入作預還原和厭氧性無菌試驗。金屬硬壁型厭氧箱的抽氣、充氣、厭氧環境和溫度等均系自動調節。
4.厭氧盒：原理同厭氧袋，有成品銷售。
5.生物耗氧法：在一密閉的容器內放以生物（多是植物），消耗氧氣，同時產生二氧化碳，供細菌生長用。我沒見過。
6.焦性末食子酸法：在一潔凈的玻片上鋪上紗布或濾紙，均勻撒上焦性末食子酸，然後再混入NaHCO3粉末或NaOH溶液，迅速將已接種細菌的平板倒扣在上面，用融化的白蠟封邊，造成一個封閉空間。焦性末食子酸與鹼反應後耗氧。該法用於厭氧不嚴格的厭氧菌的培養，簡單。如有梭狀芽孢桿菌。
7.皰肉培養基：本身就是一個不需特殊設備的厭氧培養法。皰肉和肉湯裝入大試管，液面封凡士林，造成無氧環境。