對數化療抑制骨髓

1、科技新聞資料摘抄

第一台分子機器誕生 法國與德國科學家合作，首次成功研製出可旋轉的「分子輪」，並組裝出真正意義上的第一台分子機器——生物納米機器。這個非常奇特的有機分子包括2個直徑為0．7納米、由三苯甲基分子組成的「車輪」，所有分子機器的化學結構均被固定在銅基上。二、一個原子厚的最薄材料問世3月1日，英德兩國科學家宣布聯手研製出世界最薄材料，厚度只有一根頭發的二十萬分之一，它的問世有望在電子計算機和醫學等領域掀起新的革命。這種膜片由碳原子六邊形連接而成，狀如蜂巢，但只有一個原子厚。這種膜片將主要應用於大幅提高計算機運算速度和研製新葯物，成為更加有效的晶體管。 三、首次合成人造染色體最具爭議的美國「科學怪人」克雷格·文特爾10月6日透露，由他領導的研究小組合成了人類歷史上第一個人造染色體，並有可能創造出首個永久性生命形式。研究人員通過基因組移植，成功地使一種細菌變成另外一種細菌，且新植入的基因組開始取代原基因組運作。這是人類首次在一個活有機體中一次性移植入其他物種的完整基因組。四、中國發射首顆探月衛星中國首顆探月衛星「嫦娥一號」於10月24日18時05分成功飛天，11月5日進入環月軌道，並陸續發回多幅探月照片和大量探測數據，繞月探測圓滿成功。這是繼人造地球衛星和載人航天衛星之後，中國航天事業取得的又一新的里程碑。五、發現4個誇克組成的復合粒子一國際聯合研究小組利用大型正負電子對撞加速器，發現了一種新的帶電荷粒子。它與已知的由一個誇克和一個反誇克組成的介子不同，極有可能是由4個誇克結合形成的新的復合粒子。這一發現對進一步加深量子色動力學現象的理解具有重要意義。六、成功克隆靈長類動物胚胎美國科學家利用細胞核轉移技術，用靈長類成年成纖維細胞成功克隆出獼猴胚胎，並提取出2個幹細胞系。這是科學家首次成功克隆靈長類動物胚胎，並從來自14隻獼猴的304個卵母細胞中培育出2個胚胎幹細胞系。 七、皮膚幹細胞成功問世美日科研小組11月20日同時發布各自的幹細胞研究新成果：成功地利用人體皮膚細胞「仿製」出具備胚胎幹細胞功能的幹細胞，從而有望避開胚胎幹細胞研究面臨的倫理爭議，並大大推動與幹細胞有關的疾病療法研究。對數以百萬計寄希望於幹細胞療法的患者來說，該項突破是一個重大的科學里程碑。八、培育出能抗癌的實驗鼠美國肯塔基大學通過植入能殺滅多種癌細胞且不會傷害正常細胞的「Par－4」腫瘤抑制基因，成功培育出能抗癌。

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3、蜂王漿的中葯材

1、加強機體抵抗力及促進生長：
王漿對小白鼠耐受低氣壓兼缺氧以及耐受高溫的能力似有所加強，表現在死亡時間較對照組延長，並能降低自然死亡率，延長游泳持續時間，增加感染葡萄球菌或錐蟲小鼠的生存率，延緩牛奶致熱家兔的發熱時間，使發熱持續時間縮短，如與人參合用，亦能減少小鼠在不良條件下（寒冷、低氣壓兼缺氧、禁食及禁水、四氯化碳中毒）的死亡率。還能使肝臟部分切除的大鼠體重與血清白蛋白增加，血清和肝組織內的轉氨酶較對照組低，均提示肝功能情況較佳，病理檢查肝細胞再生現象旺盛；但對四氯化碳引起小白鼠的中毒性肝炎不具保護作用（血清轉氨酶活性和肝組織的氧耗量與對照組無顯著差別。一側腎切除及另一側腎部分切除的大鼠，給予王漿3-5周，出現腎組織再生現象。王漿對細胞具有再生作用，主要是新生細胞代替衰老的細胞，增加組織呼吸、耗氧量、促進代謝；能促使大鼠機械夾傷及截斷之坐骨神經的再生（病理切片檢查），後肢反射活動恢復較快，反應閾值亦較對照組低，受損傷神經在恢復時，也增強組織代謝過程。能促進大鼠及雞胚的發育，使低蛋白或缺乏維生素飼育的大鼠發育良好；降低死亡率，但認為小劑量王漿可促進生長，大劑量則抑制生長。
2、對內分泌的影響：
國外報道王漿可使胸腺萎縮，有促腎上腺皮質激素樣作用。中國研究否認此項作用；但腎上腺中維生素含量卻增加（特別是還原型），即組織氧化現象增強；幼大鼠甲狀腺重量增加，血漿及甲狀腺中蛋白結台碘也有顯著增高，並加強甲基疏氧嘧啶抑制的甲狀腺之吸碘能力。王漿中含有促性腺激素樣物質，使21天小鼠卵泡早熟，果蠅產卵量增加，切除睾丸之大鼠的精囊重量有某些增加，但對切除卵巢者影響少。
3、對循環系統的影響：
王漿中含有兩種類似乙醯膽鹼樣物質，給貓、犬靜脈注射後引起血壓急速下降，降壓曲線與乙酚膽鹼相似，lml王漿的降壓作用，相當於 lμg乙醯膽鹼， 此作用可為阿托品所對抗，而為毒扁豆鹼所加強，血清膽鹼釀酶可破壞之，對腎上腺素及麻黃鹼的升壓作用則無影響；每日皮下注射5mg/kg的王漿，連續2周，對腎型高血壓犬無降壓作用。青蛙腹壁靜脈注射 1.5-5%王漿0.5-1.0ml/只開始心跳比正常小，2-3分鍾後振幅加大，心收縮力增強，最後停止於收縮期，以30ml/kg給家兔灌腸，能使在體心臟收縮振幅加大，作用持續兩小時以上，直接灌注於離體蛙心，使心臟停止跳動，阿托品可對抗之；另有報道對離體蛙心、兔心均為抑製作用， 腎上腺素、阿托品不能對抗此抑制現象，1%蜂乳生理鹽水注射於蛙腹壁靜脈亦無Apilaeum(AHHmH）可擴張離體貓心的冠狀血管，貓、蛙的後膠血管，蛙肝血管，對貓有明顯的降壓作用，臨床上用於慢性冠脈機能不全的患者。
4、對造血器官的影響：
王漿可降低小鼠因六巰嘌呤所致的死亡率，延長壽命，並減輕其骨髓抑製作用， 口服或注射能增加人紅細胞的直徑和網織紅細胞的血紅蛋白，血鐵含量顯著增加，這是由於刺激了鐵的運輸所致；大鼠連續皮下注射10天可使紅細胞、血紅蛋白增加，但對白細腦則無影響，並使血小板數目增加。
5、對血糖的影響：
王漿能降低正常大鼠、小鼠及四氧嘧啶糖尿病之大鼠的血糖，此外還能部分對抗腎上腺素對正常小鼠的升血糖作用。
6、抗癌作用：
王漿的醚溶性部分。W-羥基-△2癸烯酸具有強烈抑制移植性 AKR自血病、6C3HED淋巴癌、TA3乳腺癌及多種腹水型艾氏癌等癌細胞生長的作用，可使患癌的家鼠能夠活1年，而對照組僅活21天，義大利蜂幼蟲漿口服或注射，能使艾氏腹水癌鼠壽命延長，腹水出現較遲、癌細胞發育有退行性變化。
7、抗菌作用：
W-羥基-△2-癸烯酸對化膿球菌抑製作用較青黴索約小1/4，對大腸桿菌的抑製作用較金黴素約小1/5，對金黃色葡萄球菌的抑製作用不及青黴素，並陋室溫保存時間而降低，對革蘭氏陽性菌的作用為陰性菌的2倍。
8、其他作用：
小白鼠腹腔注射王漿有鎮痛作用（熱板法）。對兔、大鼠、小鼠、源鼠的離體腸管可引起強烈的收縮， 阿托品可對抗之，對上述動物的離體子宮亦使之收縮，但大劑量則抑制之。 幼蜂王的特殊食物王漿，平均含水分66%，灰分0.82%，蛋白質12.2%，脂類5.46%，還原性物質總量12.49%，未知物質2.84%，其組成隨著幼蟲的生長期而不同。王漿含5種糖，其中4種是果糖、萄糖、蔗糖及核糖。其脂肪類中，有特殊脂酸ω-羥基△2-癸烯酸（ω-Hydroxy-2-deecnoic acid），含量相當高。
王漿含豐富的維生素，其中B1含量穩定，其它B族維生素，每日可有較大的波動；幼蟲發育到72小時時，王漿中含微量的 A。王漿又含游離及結合的生物索，豐富的泛酸（pantothenic acid）、葉酸（folic acid），肌酵（inositol），2-氨基-4-輕基-6(L-赤-1，2-二襲基丙基）-喋啶（2-Amino-4-hydroxy-6(L-erythro-1，2- dibydroxypropyl)-pteridine），及腺嘌呤核苷酸類似物質。義大利蜂王漿有精氨酸(arginine）、天冬氨酸（aspartic acid）、谷氨酸（glutamic acid）、賴氨酸(luysine）、脯氨酸（proline）、β-丙氨酸（β-alanine）等。王漿含黃素腺膘呤二核甙酸（flavin adenine dinucleotide），黃素單核甙酸（flavin mononucleotide）、維生素 B2及犬尿素（kynurenino）；所含蛋白質有白蛋白（albumin），β及γ球蛋白（globulin），不溶性蛋白質。又含乙醯膽鹼（acetylcholine）。所含油脂類有硬脂酸甘油（stearin)磷脂(phospholipid）。 1、中華蜜蜂，蜂群由工蜂、蜂王及雄蜂組成。工蜂全體被黃褐色毛。頭略呈三角形。胸部3節。翅2對，膜質透明。足3對，有採集花粉的構造。腹部圓錐狀，有毒腺和螫針。腹下有蠟板4 對，內有蠟腺，分泌蠟質。蜂王體最大，翅短小，腹部特長，生殖器發達，專營生殖產卵。雄蜂較工蜂稍大，頭呈球形，尾無毒腺和螫針，足上無采貯花粉構造，腹無蠟板及蠟腺。
2、義大利蜜蜂，體似中華蜜蜂，但較之為大。 性狀鑒別，該品為乳白色至淡黃色或帶有紅色的膠狀液體。味酸、澀、辛，以乳白色至淡黃色者為佳，色澤發紅者較次。從蜂蜜源植物來看，椴樹花蜂乳最好，洋槐花、棗花、荊條花蜂乳較好，雜花蜂乳較次，蕎麥花蜂乳最次。
【性味】味甘；酸；性平 理化鑒別
（1）Ph應為3.5-4.8。
（2）用快速水分測定法測定，含水量不得大於70%。
（3）用點燃的火柴接近蜂乳，應無黃褐色顆粒迅速速熔化（檢查蠟片）。
用蘸有碘試液的玻棒，劃過塗有少量蜂乳的白瓷板上，劃痕處不得顯藍色、綠色或紅褐色（檢查澱粉類。
（4）取蜂乳少許置試管中用少量蒸餾水稀釋攪勻，加斐林試液數滴，水浴上微沸1-2min，取出觀察，不得變紅或紅棕色（檢查蜂蜜）。 1.治療急性傳染性肝炎：
口服1%王漿蜂蜜（由王漿與蜂蜜調和而成），4歲以下5g，5-10歲10g，10歲以上20g。每日 1劑，2次分服，20天為一療程，連服三療程。治療22例，各種症狀在3-14天內明顯好轉，肝臟在3周左右顯著縮小， 血清轉氨酶在10天左右下降40單位以上或恢復正常，其他各種實驗室檢查在9-18天內顯著好轉。對肝功能的改善有良好的作用。但在應用過程中，發現少數病例有嗜酸性細胞絕對數較前增加，實性心律不齊（其中1例兼逸搏、皮疹、腹瀉等反應。
2.治療慢性期風濕樣關節炎：
每日服王漿400mg，連服3-6個月。初步觀察28例，顯著進步者（全身情況改善，關節疼痛顯著減輕）7例，進步者（全身情況改善，關節疼痛略減輕）3例，穩定者（全身情況與治療前相同，關節疼痛無改善，但無急劇發作）10例，無效看8例。一般在服後第3-4局開始生效，僅少數需在6-7局才發生療效。服葯期間未發現不良反應，間有口乾、頭痛、大便乾燥等，但短期內即自行消失。
3.應用於神經精神病科疾病：
神經科治療16例進行性肌營養不良症，每日300-600ml，服半個月至3個月以上；其中顯著進步3例，輕度進步 1例。精神病科治療精神分裂症、麻痹性痴呆、更年期抑鬱症、神經官能症及精神發育不全共9例，開始每日服100ml，每 1周後增加劑量，漸增至每日800ml（每次最多400ml），服葯6-10周，總量19200ml-30600ml。結果情況明顯活躍者 1例，精神振作者2例，精神發育不全較以前聽話者1例，餘5例無進步。 蜂王漿中含有12種以上蛋白質、20多種氨基酸、10多種維生素，尤其B族維生素特別豐富，不但是營養滋補品，而且具有顯著的美容功效。所含的大量活性物質能激活酶系統，使脂褐素排出體外，降低其含量。而且蜂王漿還具有抗菌、消炎、抗輻射的作用，可預防皮膚感染、發炎及輻射損傷，阻止皮膚黑色素的形成，防止及去除皺紋、護理皮膚，保持皮膚清潔白皙，維護皮膚的柔嫩、美觀、健康。
鮮蜂王漿由百多種珍稀成份組成，其中大量的氨基酸、維生素和微量元素，能完善人體營養滿足人體需要、豐富高效的活性酶類和有機酸，可協調分泌，平衡機體從而起到改善睡眠、增強體質克服疾病的功效。蜂王漿中所含有的抗腫瘤抗輻射作用的10-羥基-2-癸烯酸為其在自然界所獨有，另含3%目前尚未探明的奧秘「R物質」可以起到調節代謝活化機體的神奇保健作用。
蜂王漿之所以能有如此神奇的美容作用，根據「秀外必先養內」的中醫理論，可以從它的營養成份中找到答案。分析表明，蜂王漿中含有人體必需的蛋白質，其中清蛋白約佔2/3，球蛋白約佔1/3；含有20多種氨基酸，16種以上的維生素，多種微量元素以及酶類，脂類、糖類、激素、磷酸化合物等，還有一些未知物質。這樣豐富的營養滋補佳品，內服後可以強身壯骨，延年益壽，防止衰老，並且可以促進和增強表皮細胞的生命活力，改善細胞的新陳代謝，防止膠原、彈性纖維變性、硬化，滋補皮膚，營養皮膚，使皮膚柔軟，富有彈性，使面容滋潤，從而推遲和延緩皮膚的老化。

4、關於丙型肝炎抗體不正常的問題?急~~~~~~~~~

丙型肝炎是一種主要經血液傳播的疾病，丙型肝炎病毒(HCV)慢性感染可導致肝臟慢性炎症壞死和纖維化，部分患者可發展為肝硬化甚至肝細胞癌(HCC)，對患者的健康和生命危害極大，已成為嚴重的社會和公共衛生問題。在衛生部和中華醫學會有關領導的支持下，中華醫學會肝病學分會和傳染病與寄生蟲病學分會組織國內有關專家，按照循證醫學的原則，並參照國內外最新研究成果，制訂了我國丙型肝炎防治指南。

丙型肝炎的病原學

(一)HCV特點
HCV屬於黃病毒科(flaviviridae)，其基因組為單股正鏈RNA，易變異，目前可分為6個基因型及不同亞型，按照國際通行的方法，以阿拉伯數字表示HCV基因型，以小寫的英文字母表示基因亞型(如1a、2b、3c等)。基因1型呈全球性分布，占所有HCV感染的70％以上。HCV感染宿主後，經一定時期，在感染者體內形成以一個優勢株為主的相關突變株病毒群，稱為准種(quasispecies)。
(二)HCV基因組結構特點
HCV基因組含有一個開放讀框(ORF)，編碼10餘種結構和非結構(NS)蛋白，NS3蛋白是一種多功能蛋白，氨基端具有蛋白酶活性，羧基端具有螺旋酶/三磷酸核苷酶活性；NS5B蛋白是RNA依賴的RNA聚合酶，均為HCV復制所必需，是抗病毒治療的重要靶位。
(三)HCV滅活方法
HCV對一般化學消毒劑敏感；100℃ 5min或60℃ 10h、高壓蒸氣和甲醛熏蒸等均可滅活病毒。

丙型肝炎的流行病學

(一)世界丙型肝炎流行狀況
丙型肝炎呈全球性流行，是歐美及日本等國家終末期肝病的最主要原因。據世界衛生組織統計，全球HCV的感染率約為3％，估計約1.7億人感染了HCV，每年新發丙型肝炎病例約3.5萬例。
(二)我國丙型肝炎流行狀況
全國血清流行病學調查資料顯示，我國一般人群抗-HCV陽性率為3.2％。各地抗-HCV陽性率有一定差異，以長江為界，北方(3.6％)高於南方(2.9％)，西南、華東、華北、西北、中南和東北分別為2.5％、2.7％、3.2％、3.3％、3.8％和4.6％。抗-HCV陽性率隨年齡增長而逐漸上升，由1歲組的2.0％至50～59歲組的3.9％。男女間無明顯差異。HCV1b和2a基因型在我國較為常見，其中以1b型為主；某些地區有1a、2b和3b型報道；6型主要見於香港和澳門地區，在南方邊境省份也可見此基因型。
(三)丙型肝炎傳播途徑
1．HCV主要經血液傳播，主要有：⑴ 經輸血和血製品傳播。我國自1993年對獻血員篩查抗-HCV後，該途徑得到了有效控制。但由於抗-HCV存在窗口期、抗-HCV檢測試劑的質量不穩定及少數感染者不產生抗-HCV，因此，無法完全篩出HCV陽性者，大量輸血和血液透析仍有可能感染HCV。⑵ 經破損的皮膚和黏膜傳播。這是目前最主要的傳播方式，在某些地區，因靜脈注射毒品導致HCV傳播佔60％～90％。使用非一次性注射器和針頭、未經嚴格消毒的牙科器械、內鏡、侵襲性操作和針刺等也是經皮傳播的重要途徑。一些可能導致皮膚破損和血液暴露的傳統醫療方法也與HCV傳播有關；共用剃須刀、牙刷、紋身和穿耳環孔等也是HCV潛在的經血傳播方式。
2．性傳播：與HCV感染者性交及有性亂行為者感染HCV的危險性較高。同時伴有其他性傳播疾病者，特別是感染人免疫缺陷病毒(HIV)者，感染HCV的危險性更高。
3．母嬰傳播：抗-HCV陽性母親將HCV傳播給新生兒的危險性為2％，若母親在分娩時HCV RNA陽性，則傳播的危險性可高達4％～7％；合並HIV感染時，傳播的危險性增至20％。HCV病毒高載量可能增加傳播的危險性。
部分HCV感染者的傳播途徑不明。接吻、擁抱、噴嚏、咳嗽、食物、飲水、共用餐具和水杯、無皮膚破損及其他無血液暴露的接觸一般不傳播HCV。

丙型肝炎的自然史

暴露於HCV後1～3周，在外周血可檢測到HCV RNA。但在急性HCV感染者出現臨床症狀時，僅50％～70％患者抗-HCV陽性，3個月後約90％患者抗-HCV陽轉。
感染HCV後，病毒血症持續6個月仍未清除者為慢性感染，丙型肝炎慢性化率為50％～85％。感染後20年，兒童和年輕女性肝硬化發生率為2％～94％；中年因輸血感染者為20％～30％；一般人群為10％～15％。40歲以下人群及女性感染HCV後自發清除病毒率較高；感染HCV時年齡在40歲以上、男性及合並感染HIV並導致免疫功能低下者可促進疾病的進展。合並乙型肝炎病毒(HBV)感染、嗜酒(50g/d以上)、非酒精性脂肪肝(NASH)、肝臟高鐵載量、合並血吸蟲感染、肝毒性葯物和環境污染所致的有毒物質等也可促進疾病進展。
HCV相關的HCC發生率在感染30年後為1％～3％，主要見於肝硬化和進展性肝纖維化患者，一旦發展成為肝硬化，HCC的年發生率為1％～7％。上述促進丙型肝炎進展的因素以及糖尿病等均可促進HCC的發生。輸血後丙型肝炎患者的HCC發生率相對較高。發生肝硬化和HCC患者的生活質量均有所下降。
肝硬化和HCC是慢性丙型肝炎患者的主要死因，其中失代償期肝硬化為最主要。有報道，一旦發生肝硬化，10年存活率約為80％，如出現失代償，10年的存活率僅為25％。干擾素(IFNα)治療後完全應答者(包括完全應答後復發者)的HCC；發生率較低，但無應答者的HCC發生率較高。

HCV傳播的預防

(一)丙型肝炎疫苗預防
目前尚無有效疫苗預防丙型肝炎。
(二)嚴格篩選獻血員
嚴格執行《中華人民共和國獻血法》，推行無償獻血。通過檢測血清抗HCV、丙氨酸氨基轉移酶(ALT)，嚴格篩選獻血員。應發展HCV抗原的檢測方法，提高對窗口期感染者的檢出率。
(三)經皮和黏膜途徑傳播的預防
推行安全注射。對牙科器械、內鏡等醫療器具應嚴格消毒。醫務人員接觸患者血液及體液時應戴手套。對靜脈吸毒者進行心理咨詢和安全教育，勸其戒毒。不共用剃須刀及牙具等，理發用具、穿刺和紋身等用具應嚴格消毒。
(四)性傳播的預防
對有性亂史者應定期檢查，加強管理。建議HCV感染者在性交時使用安全套。對青少年應進行正確的性教育。
(五)母嬰傳播的預防
對HCV RNA陽性的孕婦，應避免羊膜腔穿刺，盡量縮短分娩時間，保證胎盤的完整性，減少新生兒暴露於母血的機會。

丙型肝炎的臨床診斷

(一)急性丙型肝炎的診斷
1．流行病學史：有輸血史、應用血液製品史或明確的HCV暴露史。輸血後急性丙型肝炎的潛伏期為2～16周(平均7周)，散發性急性丙型肝炎的潛伏期尚待研究。
2．臨床表現：全身乏力、食慾減退、惡心和右季肋部疼痛等，少數伴低熱，輕度肝腫大，部分患者可出現脾腫大，少數患者可出現黃疽。部分患者無明顯症狀，表現為隱匿性感染。
3．實驗室檢查：ALT多呈輕度和中度升高，抗-HCV的HCV RNA陽性。HCV RNA常在ALT恢復正常前轉陰，但也有ALT恢復正常而HCV RNA持續陽性者。
有上述1+2+3或2+3者可診斷。
(二)慢性丙型肝炎的診斷
1．診斷依據：HCV感染超過6個月，或發病日期不明、無肝炎史，但肝臟組織病理學檢查符合慢性肝炎，或根據症狀、體征、實驗室及影像學檢查結果綜合分析，亦可診斷。
2．病變程度判定：病變程度判斷可參考中華醫學會傳染病與寄生蟲病學分會、肝病學分會聯合修訂的《病毒性肝炎防治方案》(2000年，西安)中關於肝臟炎症和纖維化分級、分期的診斷標准。HCV單獨感染極少引起重型肝炎，HCV重疊HIV、HBV等病毒感染、過量飲酒或應用肝毒性葯物時，可發展為重型肝炎。HCV感染所致重型肝炎的臨床表現與其他嗜肝病毒所致重型肝炎基本相同，可表現為急性、亞急性和慢性經過。
3．慢性丙型肝炎肝外表現：肝外臨床表現或綜合征可能是機體異常免疫反應所致，包括類風濕性關節炎、乾燥性結膜角膜炎、扁平苔蘚、腎小球腎炎、混合型冷球蛋白血症、B細胞淋巴瘤和遲發性皮膚卟啉症等。
4．肝硬化與HCC：慢性HCV感染的最嚴重結果是進行性肝纖維化所致的肝硬化和HCC。
5．混合感染：HCV與其他病毒的重疊、合並感染統稱為混合感染。我國HCV與HBV或HIV混合感染較為多見。
6．肝臟移植後HCV感染的復發：丙型肝炎常在肝移植後復發，且其病程的進展速度明顯快於免疫功能正常的丙型肝炎患者。一旦移植的肝臟發生肝硬化，出現並發症的危險性將高於免疫功能正常的肝硬化患者。肝移植後丙型肝炎復發與移植時HCV RNA水平及移植後免疫抑製程度有關。

丙型肝炎的實驗室診斷

(一)血清生化學檢測
ALT、天冬氨酸氨基轉移酶(AST)水平變化可反映肝細胞損害程度，但ALT、AST水平與HCV感染引起的肝組織炎症分度和病情的嚴重程度不一定平行；急性丙型肝炎患者的ALT和AST水平一般較低，但也有較高者。急性丙型肝炎患者的血清白蛋白、凝血酶原活動度和膽鹼酯酶活性降低較少，但在病程較長的慢性肝炎、肝硬化或重型肝炎時可明顯降低，其降低程度與疾病的嚴重程度成正比。
慢性丙型肝炎患者中，約30％ALT水平正常，約40％ALT水平低於2倍正常值上限。雖然大多數此類患者只有輕度肝損傷，但有部分患者可發展為肝硬化。ALT水平下降是抗病毒治療中出現應答的重要指標之一。凝血酶原時間可作為慢性丙型肝炎患者病情進展的監測指標，但迄今尚無一個或一組血清學標志可對肝纖維化進行准確分期。
(二)抗-HCV檢測
抗-HCV酶免疫法(EIA)適用於高危人群篩查，也可用於HCV感染者的初篩。但抗-HCV陰轉與否不能作為抗病毒療效的指標。用第三代EIA法檢測丙型肝炎患者，其敏感度和特異度可達99％，因此，不需要用重組免疫印跡法(RIBA)驗證。但一些透析、免疫功能缺陷和自身免疫性疾病患者可出現抗-HCV假陽性，因此，HCV RNA檢測有助於確診這些患者是否合並感染HCV。
(三)HCV RNA檢測
在HCV急性感染期，在血漿或血清中的病毒基因組水平可達到105～107拷貝/ml。在HCV慢性感染者中，HCV RNA水平在不同個體之間存在很大差異，變化范圍在5×104～5×106拷貝/ml之間，但同一名患者的血液中HCVRNA水平相對穩定。
1．HCV RNA定性檢測：對抗-HCV陽性的HCV持續感染者，需要通過HCV RNA定性試驗確證。HCV RNA定性檢測的特異度在98％以上，只要一次病毒定性檢測為陽性，即可確證HCV感染，但一次檢測陰性並不能完全排除HCV感染，應重復檢查。
2．HCV RNA定量檢測：定量聚合酶鏈反應(qPCR)、分枝DNA(bDNA)、實時熒光定量PCR法均可檢測HCV RNA病毒載量。國外HCV RNA定量檢測試劑盒有PCR擴增的Cobas V2.0、SuperQuant、LCx HCV RNA定量分析法等，但bDNA的Versant HCVRNA 2.0和3.0定量分析法應用較為廣泛。國內的實時熒光定量PCR法已獲得國家食品葯品監督管理局(SFDA)的正式批准。不同HCV RNA定量檢測法可用拷貝/ml和IU/ml兩種表示方法，兩者之間進行換算時，應採用不同檢測方法的換算公式，如羅氏公司Cobas V2.0的IU/ml與美國國立遺傳學研究所的SuperQuant的拷貝數/ml換算公式是：IU/ml=0.854×拷貝數/ml+0.538。
HCV病毒載量的高低與疾病的嚴重程度和疾病的進展並無絕對相關性，但可作為抗病毒療效評估的觀察指標。在HCV RNA檢測中，應注意可能存在假陽性和假陰性結果。
(四)HCV基因分型
HCV RNA基因分型方法較多，國內外在抗病毒療效考核研究中，應用Simmonds等1～6型分型法最為廣泛。HCV RNA基因分型結果有助於判定治療的難易程度及制定抗病毒治療的個體化方案。

丙型肝炎的病理學診斷

病理組織學檢查對丙型肝炎的診斷、衡量炎症和纖維化程度、評估葯物療效以及預後判斷等方面至關重要。急性丙型肝炎可有與甲型和乙型肝炎相似的小葉內炎症及匯管區各種病變。但也可觀察到其他的一些組織學特徵，如：⑴ 單核細胞增多症樣病變。即單個核細胞浸潤於肝竇中，形成串珠狀；⑵ 肝細胞大泡性脂肪變性；⑶ 膽管損傷伴匯管區大量淋巴細胞浸潤，甚至有淋巴濾泡形成。膽管細胞損毀，葉間膽管數量減少，類似於自身免疫性肝炎；⑷ 常見界面性炎症。
慢性丙型肝炎肝組織中常可觀察到匯管區淋巴濾泡形成、膽管損傷、小葉內肝細胞脂肪變性、小葉內庫普弗細胞或淋巴細胞聚集，這些較為特徵性的組織學表現，對於慢性丙型肝炎的診斷有一定的參考價值。
肝組織炎症程度的分級、纖維化程度的分期診斷可參照《病毒性肝炎防治方案》中病理學診斷標准。對於科研或評估治療葯物的療效，可根據不同需求，選用國內外各種半定量計分方法。

抗病毒治療目的和葯物

(一)抗病毒治療的目的
抗病毒治療的目的是清除或持續抑制體內的HCV，以改善或減輕肝損害、阻止進展為肝硬化、肝衰竭或HCC，並提高患者的生活質量。
(二)抗病毒治療的有效葯物
干擾素(IFN)α是抗HCV的有效葯物，包括普通IFNα、復合IFN和聚乙二醇(PEG)化干擾素α(PEG-IFNα)。後者是在IFNα分子上交聯無活性、無毒性的PEG分子，延緩IFNα注射後的吸收和體內清除過程，其半衰期較長，每周1次給葯即可維持有效血葯濃度。復合IFN 9μg相當於普通IFNα 3MU。PEG-IFNα與利巴韋林聯合應用是目前最有效的抗病毒治療方案，其次是普通IFNα或復合IFN與利巴韋林聯合療法，均優於單用IFNα。國外最新臨床試驗結果顯示，PEG-IFNα-2a (180μg)或PEG-IFNα-2b (1.5μg/kg)每周1次皮下注射聯合利巴韋林口服治療48周的療效相似，持續病毒學應答(SVR)率可達54％～56％；普通IFNα (3MU)肌肉注射每周3次聯合利巴韋林治療48周的SVR率稍低，為44％～47％；單用PEG-IFNα-2a或普通IFNα治療48周的SVR率分別僅為25％～39％和12％～19％。我國的臨床試驗結果表明，PEG-IFNα-2a (180μg)24周單葯治療慢性丙型肝炎的總SVR率為41.5％，其中基因1型患者為35.4％，非1型患者為66.7％。因此，如無利巴韋林的禁忌證，均應採用聯合療法。

抗病毒治療的適應證

只有確診為血清HCV RNA陽性的丙型肝炎患者才需要抗病毒治療。
(一)一般丙型肝炎患者的治療
1．急性丙型肝炎：IFNα治療能顯著降低急性丙型肝炎的慢性化率，因此，如檢測到HCV RNA陽性，即應開始抗病毒治療目前對急性丙型肝炎治療尚無統一方案，建議給予普通IFNα 3MU，隔日1次肌肉或皮下注射，療程為24周，應同時服用利巴韋林800～1000 mg/d。
2．慢性丙型肝炎：⑴ ALT或AST持續或反復升高，或肝組織學有明顯炎症壞死(G≥2)或中度以上纖維化(S≥2)者，易進展為肝硬化，應給予積極治療。⑵ ALT持續正常者大多數肝臟病變較輕，應根據肝活檢病理學結果決定是否治療。對已有明顯纖維化(S2、S3)者，無論炎症壞死程度如何，均應給予抗病毒治療；對輕微炎症壞死且無明顯纖維化(S0、S1)者，可暫不治療，但每隔3～6個月應檢測肝功能。⑶ ALT水平並不是預測患者對IFNα應答的重要指標。既往曾報道，用普通IFNα治療ALT正常的丙型肝炎患者無明顯效果，因而不主張應用IFNα治療。但最近有研究發現，用PEG-IFNα-2a與利巴韋林聯合治療ALT正常的丙型肝炎患者，其病毒學應答率與ALT升高的丙型肝炎患者相似。因此，對於ALT正常或輕度升高的丙型肝炎患者，只要HCV RNA陽性，也可進行治療，但尚須積累更多病例作進一步臨床研究。
3．丙型肝炎肝硬化：⑴ 代償期肝硬化(Child-Pugh A級)患者，盡管對治療的耐受性和效果有所降低，但為使病情穩定、延緩或阻止肝衰竭和HCC等並發症的發生，建議在嚴密觀察下給予抗病毒治療。⑵ 失代償期肝硬化患者，多難以耐受IFNα治療的不良反應，有條件者應行肝臟移植術。
4．肝移植後丙型肝炎復發：HCV相關的肝硬化或HCC患者經肝移植後，HCV感染復發率很高。IFNα治療對此類患者有效果，但有促進對移植肝排斥反應的可能，可在有經驗的專科醫生指導和嚴密觀察下進行抗病毒治療。
(二)特殊丙型肝炎患者的治療
1．兒童和老年人：有關兒童慢性丙型肝炎的治療經驗尚不充分。初步臨床研究結果顯示，IFNα單一治療的SVR率似高於成人，對葯物的耐受性也較好。65歲或70歲以上的老年患者原則上也應進行抗病毒治療，但一般對治療的耐受性較差。因此，應根據患者的年齡、對葯物的耐受性、並發症(如高血壓、冠心病等)及患者的意願等因素全面衡量，以決定是否給予抗病毒治療。
2．酗酒及吸毒者：慢性酒精中毒及吸毒可能促進HCV復制，加劇肝損害，從而加速發展為肝硬化甚至HCC,的進程。由於酗酒及吸毒患者對於抗病毒治療的依從性、耐受性和SVR率均較低，因此，治療丙型肝炎必須同時戒酒及戒毒。
3．合並HBV或HIV感染者：合並HBV感染會加速慢性丙型肝炎向肝硬化或HCC的進展。對於HCV RNA陽性/HBV DNA陰性者，先給予抗HCV治療；對於兩種病毒均呈活動性復制者，建議首先以IFNα加利巴韋林清除HCV，對於治療後HBV DNA仍持續陽性者可再給予抗HBV治療。對此類患者的治療尚需進行深入研究，以確定最佳治療方案。
合並HIV感染也可加速慢性丙型肝炎的進展，抗HCV治療主要取決於患者的CD4+細胞計數和肝組織的纖維化分期。免疫功能正常、尚無即刻進行高活性抗逆轉錄病毒治療(HAART)指征者，應首先治療HCV感染；正在接受HAART治療、肝纖維化呈S2或S3的患者，須同時給予抗HCV治療；但要特別注意觀察利巴韋林與抗HIV核苷類似物相互作用的可能性，包括乳酸酸中毒等。對於嚴重免疫抑制者(CD4+陽性淋巴細胞<2×108/L)，應首先給抗HIV治療，待免疫功能重建後，再考慮抗HCV治療。
4．慢性腎功能衰竭：對於慢性丙型肝炎伴有腎功能衰竭且未接受透析者，不應進行抗病毒治療。已接受透析且組織病理學上尚無肝硬化的患者(特別是准備行腎移植的患者)，可單用IFNα治療(應注意在透析後給葯)。由於腎功能不全的患者可發生嚴重溶血，因此，一般不應用利巴韋林聯合治療。

抗病毒治療應答的類型及影響因素

(一)抗病毒治療應答的類型
依據所觀察的指標不同，可分為生化學應答、病毒學應答及組織學應答。
1．生化學應答：ALT和AST恢復正常。
2．病毒學應答：(1) 早期病毒學應答(EVR)：指治療12周時血清HCV RNA定性檢測陰性(或定量檢測小於最低檢測限)，或定量檢測降低2個對數級(Log)以上。有早期EVR者易獲得SVR，無EVR者不易獲得SVR，因此EVR可作為預測SVR的指標。(2) 治療結束時病毒學應答(ETVR)：即治療結束時定性檢測HCV RNA為陰性(或定量檢測小於最低檢測限)；(3) SVR：即治療結束至少隨訪24周時，定性檢測HCV RNA陰性(或定量檢測小於最低檢測限)；(4) 無應答(NR)：指從未獲得EVR、ETVR及SVR者。(5) 復發(relapse)：指治療結束時為定性檢測HCV RNA為陰性(或定量檢測小於最低檢測限)，但停葯後HCV RNA又變為陽性；(6) 治療中反彈(breakthrough)：治療期間曾有HCV RNA載量降低或陰轉，但尚未停葯即出現HCV RNA載量上升或陽轉。
3．組織學應答：是指肝組織病理學炎症壞死和纖維化的改善情況，可採用國內外通用的肝組織分級(炎症壞死程度)、分期(纖維化程度)或半定量計分系統來評價。
(二)抗病毒治療應答的影響因素
慢性丙型肝炎抗病毒療效應答受多種因素的影響，下列因素有利於取得SVR：(1) HCV基因型2、3型；(2) 病毒水平<2×106拷貝/ml；(3) 年齡<40歲；(4) 女性；(5) 感染HCV時間短；(6) 肝臟纖維化程度輕；(7) 對治療的依從性好；(8)無明顯肥胖者；(9)無合並HBV及HIV感染者；(10)治療方法：以PEG-IFNα與利巴韋林聯合治療為最佳。

慢性丙型肝炎治療方案

治療前應進行HCV RNA基因分型(1型和非1型)和血中HCV RNA定量，以決定抗病毒治療的療程和利巴韋林的劑量。
(一)HCV RNA基因為1型，或(和)HCV RNA定量≥2×106拷貝/ml者，可選用下列方案之一：
1．PEG-IFNα聯合利巴韋林治療方案：PEG-IFNα-2a 180μg，每周1次皮下注射，聯合口服利巴韋林1 000mg/d，至12周時檢測HCV RNA：(1) 如HCV RNA下降幅度<2個對數級，則考慮停葯；(2) 如HCV RNA定性檢測為陰轉，或低於定量法的最低檢測限，繼續治療至48周；(3) 如HCV RNA未轉陰，但下降≥2個對數級，則繼續治療到24周。如24周時HCVRNA轉陰，可繼續治療到48周；如果24周時仍未轉陰，則停葯觀察。
2．普通IFNα聯合利巴韋林治療方案：IFNα 3MU～5MU，隔日1次肌肉或皮下注射，聯合口服利巴韋林1000mg/d，建議治療48周。
3．不能耐受利巴韋林不良反應者治療方案：可單用普通IFNα、復合IFN或PEG-IFN，方法同上。
(二)HCV RNA基因為非1型，或(和)HCV RNA定量<2×106拷貝/ml者，可採用以下治療方案之一：
1．PEG-IFNα聯合利巴韋林治療方案：PEG-IFNα-2a 180μg，每周1次皮下注射，聯合應用利巴韋林800mg/d，治療24周。
2．普通IFNα聯合利巴韋林治療方案：IFNα 3MU每周3次肌肉或皮下注射，聯合應用利巴韋林800～1000mg/d，治療24～48周。
3．不能耐受利巴韋林不良反應者治療方案：可單用普通IFNα或PEG-IFNα。
註：(1) 國外文獻報道，PEG-IFNα-2b (1.0～1.5μg/kg)與PEG-IFNα-2a (180μg)每周1次皮下注射，聯合利巴韋林口服48周，兩法治療丙型肝炎的SVR率相似，前者在我國也即將被批准上市；(2) 在採用普通IFNα治療時，有人採用所謂"誘導療法"，即每天肌肉注射IFNα 3MU～5MU，連續15～30d，然後改為每周3次。國外研究表明，患者對這一方案的耐受性降低，且能否提高療效尚不肯定；(3) 利巴韋林用量參考：體重>85kg者，1200mg/d；65～85kg者1000mg/d；<65kg者，800mg/d。有文獻報道，利巴韋林的有效劑量為>10.6mg/kg體重。
(三)對於治療後復發或無應答患者的治療
對於初次單用IFNα治療後復發的患者，採用PEG-IFNα-2a或普通IFNα聯合利巴韋林再次治療，可獲得較高SVR率(47％，60％)；對於初次單用IFNα無應答的患者，採用普通IFNα或PEG-IFNα-2a聯合利巴韋林再次治療，其SVR率較低(分別為12％～15％和34％～40％)。對於初次應用普通IFNα和利巴韋林聯合療法無應答或復發的患者，可試用PEG-IFNα-2a與利巴韋林聯合療法。

抗病毒治療的不良反應及處理方法

(一)IFNα的主要不良反應
為流感樣癥候群、骨髓抑制、精神異常、甲狀腺疾病、食慾減退、體重減輕、腹瀉、皮疹、脫發和注射部位無菌性炎症等。
1．流感樣癥候群：表現為發熱、寒戰、頭痛、肌肉酸痛、乏力等，可在睡前注射IFNα，或在注射IFNα同時服用非甾體類消炎鎮痛葯，以減輕流感樣症狀。隨療程進展，此類症狀逐漸減輕或消失。
2．骨髓抑制：一過性骨髓抑制主要表現為外周血白細胞和血小板減少。如中性粒細胞絕對數≤0.75×109/L，血小板<50×109/L，應降低IFNα劑量；1～2周後復查，如恢復，則逐漸增加至原量。如粒細胞絕對數≤0.50×109/L，血小板<30×109/L，則應停葯。對於中性粒細胞明顯降低者，可用粒細胞集落刺激因子(G-CSF)或粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)治療。
3．精神異常：可表現為抑鬱、妄想症、重度焦慮和精神病。其中抑鬱是IFNα治療過程中常見的不良反應，症狀可從煩躁不安到嚴重的抑鬱症。因此，使用IFNα前應評估患者的精神狀況，治療過程中也要密切觀察。抗抑鬱葯可緩解此類不良反應。對症狀嚴重者，應及時停用IFNα。
4．IFNα可誘導自身抗體的產生：包括抗甲狀腺抗體、抗核抗體和抗胰島素抗體。多數情況下無明顯臨床表現，部分患者可出現甲狀腺疾病(甲狀腺功能減退或亢進)、糖尿病、血小板減少、溶血性貧血、銀屑病、白斑、類風濕性關節炎和系統性紅斑狼瘡樣綜合征等，嚴重者應停葯。
5．其他少見的不良反應：包括腎臟損害(間質性腎炎、腎病綜合征和急性腎衰竭等)、心血管並發症(心律失常、缺血性心臟病和心肌病等)、視網膜病變、聽力下降和間質性肺炎等，發生上述反應時，應停止治療。
(二)利巴韋林的主要不良反應
利巴韋林的主要不良反應為溶血和致畸作用。
1．及時發現溶血性貧血：須定期做血液學檢測，包括血紅蛋白、紅細胞計數和網織紅細胞計數。在腎功能不全者可引起嚴重溶血，應禁用利巴韋林。當Hb降至≤100g/L時應減量；Hb≤80g/L時應停葯。
2．致畸性：男女患者在治療期間及停葯後6個月內均應採取避孕措施。
3．其他不良反應：利巴韋林還可引起惡心、皮膚乾燥、瘙癢、咳嗽和高尿酸血症等。

丙型肝炎患者的監測和隨訪

(一)對接受抗病毒治療患者的隨訪監測
1．治療前監測項目：治療前應檢測肝腎功能、血常規、甲狀腺功能、血糖及尿常規。開始治療後的第一個月應每周檢查1次血常規，以後每個月檢查1次直至6個月，然後每3個月檢查1次。
2．生化學檢測：治療期間每個月檢查ALT，治療結束後6個月內每兩個月檢測1次。即使患者HCV未能清除，也應定期復查ALT。
3．病毒學檢查：治療3個月時測定HCV RNA；在治療結束時及結束後6個月也應檢測HCV RNA。
4．不良反應的監測：所有患者要在治療過程中每6個月、治療結束後每3～6個月檢測甲狀腺功能，如治療前就已存在甲狀腺功能異常，則應每月檢查甲狀腺功能。對於老年患者，治療前應作心電圖檢查和心功能判斷。應定期評估精神狀態，尤其是對表現有明顯抑鬱症和有自殺傾向的患者，應給予停葯並密切防護。
(二)對於無治療指征或存在禁忌證及不願接受抗病毒治療的患者的隨訪
1．肝臟活檢：顯示無或僅為輕微損害者，肝病進展的可能性小，但仍應每2
參考資料：http://www.china.org.cn/chinese/health/577608.htm

最後祝你身體健康起來。

5、血紅細胞6.65嗜酸性粒細胞絕對數0.73要不要緊？

血常規顧名思義是通過血液進行各項指標檢查，是否能查出癌症並不是很絕對。做檢查時僅僅有一小部分人會出現癌症方面的異常症狀，症狀並不是很明顯。大部分人做血常規檢查時沒有任何變化，即使癌症病人做血常規檢查，也有可能顯示跟正常人一樣的指標。所以血常規檢查只是一種參考依據，若想確診癌症還需做其他的檢查。
哪些指標異常需引起重視？
1、白細胞
白細胞檢查包括其數量和分類，白細胞的基本功能是防控感染，在不同情況下白細胞的數量變化不一樣，根據白細胞數量和類型分析來診斷和判斷疾病嚴重程度。白細胞升高分為反應性和腫瘤性的，受到細菌感染、患有白血病以及過敏時會使得白細胞計數升高。不過細菌感染所引起的白細胞升高，主要以中性粒細胞升高為主；急性白血病時不成熟的白血病腫瘤細胞增多，慢性白血病期成熟形態的各種白細胞量多，過敏性疾病時嗜酸性粒細胞增多。白細胞下降或是正常骨髓造血低下引起的，如骨髓增生異常綜合征和再生障礙性貧血，也有可能是化療或某些葯物導致的，又或是先天性遺傳性減少。另外，白細胞消耗和破壞過多會使得白細胞計數減少，如艾滋病病毒或其他病毒導致的淋巴細胞減少，受到嚴重細菌感染和傷寒感染所導致的粒細胞減少。

2、紅細胞
做血常規檢查時通過紅細胞計數、血紅蛋白水平及紅細胞比容來分析紅細胞量。若全部升高提示紅細胞增多症，一般跟吸煙患有肺部和心臟疾病有關；造血系統腫瘤也會影響到紅細胞，使得血紅蛋白和紅細胞升高，如真性紅細胞增多症病人血紅蛋白每升高達180克。若以上三個方面都降低很有可能是貧血。
3、血小板
血小板是血液中最小的細胞成分，其基本功能是止血。長時間出現沒有誘因的血小板增多需警惕腫瘤性疾病，如原發性骨髓纖維化或原發性血小板增多症。若血小板數量減少，會使得皮膚、內臟和粘膜出血，也可以表現是月經量增多、鼻子或牙齦出血。血小板減少跟葯物、受到感染以及骨髓造血受到抑制有關。

溫馨提示
做血常規檢查時若出現以上異常，還需進一步做相關檢查。多留意自身症狀，若出現不明原因疼痛、身體進行性消瘦和體重下降和全身乏力，還需去醫院做檢查，看看是不是癌症來臨。

6、常見的化療毒副反應是什麼？

抗腫瘤葯物的毒副作用主要分為兩大類，近期反應和遠期反應。

近期反應包括即刻、早期和間期反應，發生在給葯的4周之內。

包括局部反應（局部靜脈炎）、造血系統的損害（主要為骨髓抑制的表現）、消化道反應、心臟毒性、免疫抑制、泌尿系統損害、神經系統損害等等。

遠期反應包括肺的纖維化、心肌炎、對生育的影響、致畸胎作用等等。

在乳腺癌的化療中，常見的化療毒副反應主要是骨髓抑制、消化道反應和心臟毒性。

骨髓抑制是最常見的，表現為各種血細胞數的減少。一般在用葯後的7～10天出現粒細胞下降，14～28天恢復，有時時間更長一些。粒細胞下降後的主要危險是感染，當粒細胞絕對數小於1×109/L時，感染的機會更大。血小板減少較粒細胞下降出現少，當血小板＜20×109/L時，為出血的高危險期，20×109～50×109/L則為低危險期。

消化道反應是很常見的，一般認為是抗癌葯物刺激了「化學感受器區」後反射性地引起「嘔吐中樞興奮」，臨床上表現為厭食、惡心、嘔吐，其發生率約在80％左右。常在用葯後1小時開始，持續24小時，有時可以連續2～3天。嚴重者可以導致電解質紊亂，加重營養不良及惡液質。此外，有的葯物還可能引起口腔潰瘍、食管炎、結腸炎等消化道症狀。

造成心臟毒性的化療葯物主要是蒽環類葯物，主要是以ADM為代表的。另外，高劑量的CTX、MMC、DDP、5FU、阿糖胞苷等化療葯物也有可能引起心臟毒性。有人認為自由基可以導致心肌細胞膜或線粒體生物膜上磷脂質中不飽和脂肪酸發生過氧化反應、改變膜結構和通透性引起的心臟毒性。而ADM在人體內還原為半醌自由基，繼而產生氧分子自由基，對心臟產生毒性。

由於新的化療葯物的開發，化療技術的進步，聯合用葯以及採用預防用葯來控制化療毒副作用的發生，現在臨床上發生化療毒副作用的情況已有所減少。國外有關乳腺癌化療的文獻報告亦同。

7、平均血小板體積偏低是什麼意思？

平均血小板體積是血常規當中血小板系列的一個檢測指標，它是屬於血常規檢查的項專目之一。通常情屬況下，如果是出現了平均血小板體積偏低，這種情況往往有可能說明病人骨髓抑制，可以見於急性白血病的患者進行化療的時候。

另外，再生障礙性貧血的患者也有可能會出現平均血小板體積偏低。發生脾功能亢進的時候，有可能會出現這種情況。

(7)對數化療抑制骨髓擴展資料：

平均血小板體積增加見於原發性血小板減少性紫癜、骨髓增生異常綜合征、急性白血病緩解期、妊娠晚期、巨幼紅細胞性貧血、血栓病等。平均血小板體積減少見於急性白血病化療期、再生障礙性貧血、脾功能亢進等。

受傷或者其他的原因引起血管破損的時候，大量血小板會馬上聚集在血管破損處，聚集成團，形成血栓，堵在血管裂口的地方；另外，血小板還會釋放出促使血管收縮和血液凝固的物質，防止血液從破損的地方流出。

8、MDS只有白細胞超低是屬於具體MDS的哪個分類？何解？

如果你真想我們幫助你解決問題，你要詳細的公布具體的數值。
因為偏低不是量化詞，低到什麼程度，偏到什麼程度。這不是專業術語，應該是具體的數值。

9、骨髓瘤 培養

雜交瘤技術在具體操作上，各實驗室使用的程序不盡一致。本節中介紹的方法是作者所在實驗室採用的、實踐證明成熟的程序，該程序適合國內大多數實驗室。

在開展雜交瘤技術制備單抗之前，培養骨髓瘤和雜交瘤細胞必須具備下列主要儀器設備：超凈工作台、CO2恆溫培養箱、超低溫冰箱（-70℃）、倒置顯微鏡、精密天平或電子天平、液氮罐、離心機（水平轉子，4000r/min）、37℃水浴箱、純水裝置、濾器、真空泵等。其需要的主要器械包括：100ml、50ml、25ml細胞培養瓶，10ml、1ml刻度吸管，試管，滴管（彎頭、直頭），平皿，燒杯，500ml、250ml、100ml鹽水瓶，青黴素小瓶，10ml、5ml、1ml注射器等，96孔、24孔細胞培養板，融合管（50ml圓底帶蓋玻璃或塑料離心管），眼科剪刀，眼科鑷，血細胞計數板，可調微量加樣器（~50ul，~200ul，~1000ul），彎頭針頭，200目篩網，小鼠固定裝置等。此外，雜交瘤細胞的篩選與檢測的儀器設備，依據檢測單抗的方法不同而各異，請參閱本節有關部分。

淋巴細胞雜交瘤技術的主要步驟包括：動物免疫、細胞融合、雜交瘤細胞的篩選與單抗檢測、雜交瘤細胞的克隆化、凍存、單抗的鑒定等，圖6-1概括了淋巴細胞雜交瘤技術研製單抗的主要過程。

1、動物免疫

(1) 抗原制備制備單克隆抗體的免疫抗原，從純度上說雖不要求很高，但高純度的抗原使得到所需單抗的機會增加，同時可以減輕篩選的工作量。因此，免疫抗原是越純越好，應根據所研究的抗原和實驗室的條件來決定。一般來說，抗原的來源有限，或性質不穩定，提純時易變性，或其免疫原性很強，或所需單抗是用於抗原不同組分的純化或分析等，免疫用的抗原只需初步提純甚至不提純，但抗原中混雜物很多，特別是如果這些混雜物的免疫原性較強時，則必須對抗原進行純化。檢測用抗原可以是與免疫抗原純度相同，也可是不同的純度，這主要決定於所用篩檢方法的種類及其特異性和敏感性。

(2) 免疫動物的選擇根據所用的骨髓瘤細胞可選用小鼠和大鼠作為免疫動物。因為，所有的供雜交瘤技術用的小鼠骨髓瘤細胞系均來源於BALB/c小鼠，所有的大鼠骨髓瘤細胞都來源於LOU/c大鼠，所以一般的雜交瘤生產都是用這兩種純系動物作為免疫動物。但是，有時為了特殊目的而需進行種間雜交，則可免疫其他動物。種間雜交瘤一般分泌抗體的能力不穩定，因為染色體容易丟失。就小鼠而言，初次免疫時以8-12周齡為宜，雌性鼠較便於操作。

(3) 免疫程序的確定免疫是單抗制備過程中的重要環節之一，其目的在於使B淋巴細胞在特異抗原刺激下分化、增殖，以利於細胞融合形成雜交細胞，並增加獲得分泌特異性抗體的雜交瘤的機會。因此在設計免疫程序時，應考慮到抗原的性質和純度、抗原量、免疫途徑、免疫次數與間隔時間、佐劑的應用及動物對該抗原的應答能力等。沒有一個免疫程序能適用於各種抗原。現用的免疫程序中多數是參照制備常規多克隆抗體的方法。表6-1列舉了目前常用的免疫程序。免疫途徑常用體內免疫法包括皮下注射、腹腔或靜脈注射，也採用足墊、皮內、滴鼻或點眼。最後一次加強免疫多採用腹腔或靜脈注射，目前尤其推崇後者，因為可使抗原對脾細胞作用更迅速而充分。在最後一次加強免疫後第3天取脾融合為好，許多實驗室的結果表明，初次免疫和再次免疫應答反應中，取脾細胞與骨髓瘤細胞

融合，特異性雜交瘤的形成高峰分別為第4天和第22天，在初次免疫應答時獲得的雜交瘤主要分泌IgM抗體，再次免疫應答時獲得的雜交瘤主要分泌IgG抗體。筆者體會陽性雜交瘤出現的高峰與小鼠血清抗體的滴度並無明顯的平行關系，且多在血清抗體高峰之前。因此，為達到最高的雜交瘤形成率需要有盡可能多的漿母細胞，這在最後一次加強免疫後第3天取脾進行融合較適宜。已有人報道採用脾內免疫，可提高小鼠對抗原的免疫反應性，且節省時間，一般免疫3天後即可融合。

表6-1 不同免疫抗原的免疫程序

免疫原特性 抗原量 接種次數 間隔時間 單抗的特性 抗體滴度 親和性

免疫原性強（如細胞、細菌和病毒等） 106-107個細胞或1-10ug 2-4 2-4周 高 中等至強

免疫原性中等 10-100ug 2-4 2-4周 中等或高中等或強

免疫原性弱 A.20-400ug 2-4 隨後 2-3 每月 2-3月中等 強

B.10-50ug 其後 200-400ug 2 其後 4 每月 每天 中等 中等

C.10-100ug 2 其後 4 其後「休息」 最後加強 每月 10天 1-2月

中等 中等或強

體內免疫法適用於免疫原性強、來源充分的抗原，對於免疫原性很弱或對機體有害（如引起免疫抑制）的抗原就不適用了。如果制備人單克隆抗體幾乎不大可能採用體內免疫法。因此，針對這些情況，可採用體外免疫。所謂體外免疫就是將脾細胞（或淋巴結細胞，或外周血淋巴細胞）取出體外，在一定條件下與抗原共同培養，然後再與骨髓瘤細胞進行融合。其基本方法是取4-8周齡BALB/c小鼠的脾臟，製成單細胞懸液，用無血清培養液洗滌2-3次，然後懸浮於含10%小牛血清的培養液中，再加入適量抗原（可溶性抗原0.5-5ug/ml，細胞抗原105-106個細胞/ml）和一定量的BALB/c小鼠胸腺細胞培養上清液；在37℃，6%CO2濃度下培養3-5天，再分離脾細胞與骨髓瘤細胞融合。

2、細胞融合

（1） 主要試劑的配製

a、 細胞培養基雜交瘤技術中使用的細胞培養基主要有RPMI-1640或DMEM（Dulberco Modified Eagles Medium）兩種基礎培養基，具體配製方法按廠家規定的程序，配好後過濾除菌（0.22um），分裝，4℃保存。

"不完全RPMI-1640培養基：RPMI-1640培養基原液96ml

100×L.G.溶液1ml

雙抗溶液1ml

7.5% NaHCO3溶液1-2ml

HEPES溶液1ml

"不完全DMEM培養基：DMEM 13.37g

超純水或四蒸水980ml

NaHCO3 3.7g

雙抗溶液10ml

100×L.G.溶液10ml

用1N HCl調試PH至7.2-7.4，過濾除菌，分裝4℃保存。

"完全RPMI-1640或DMEM培養基：不完全RPMI-1640或DMEM培養基80ml

小牛血清15-20ml

用於骨髓瘤細胞SP2/0和建株後的雜交瘤細胞培養。

"HT培養基：完全RPMI-1640或DMEM培養基99ml

HT貯存液1ml

"HAT培養基：完全RPMI-1640或DMEM培養基98ml

HT貯存液1ml

A貯存液1ml

b、 氨基喋呤（A）貯存液（100×，4×10-5mol/L） : 稱取1.76mg氨基喋呤（Aminopterin MW 440.4），溶於90ml超純水或四蒸水中，滴加1mol/L NaOH 0.5ml中和，再補加超純水或四蒸水至100ml。過濾除菌，分裝小瓶（2ml/瓶），-20℃保存。

c、次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷（HT）貯存液(100×,H:10-2mol/L，T：1.6×10-3mol/L): 稱取136.1mg次黃嘌呤(Hypoxanthine,MW 136.1)和38.8mg胸腺嘧啶核苷(Thymidine,MW 242.2)，加超純水或四蒸水至100ml，置45-50℃水浴中使完全溶解，過濾除菌，分裝小瓶（2ml/瓶），-20℃凍存。用前可置37℃加溫助溶。

d、 L-谷氨醯胺（L.G.）溶液（100×，0.2mol/L） : 稱取2.92g L-谷氨醯胺（L-glutamine，MW 146.15），用100ml不完全培養液或超純水（或四蒸水）溶解，過濾除菌，分裝小瓶（4-5ml/瓶），-20℃凍存。

e、 青、鏈黴素（雙抗）溶液（100×）: 取青黴素G（鈉鹽）100萬單位和鏈黴素（硫酸鹽）1g，溶於100ml滅菌超純水或四蒸水中，分裝小瓶（4-5ml/瓶），-20℃凍存。

f、 7.5% NaHCO3溶液 : 稱取分析純NaHCO3 7.5g，溶於100ml超純水或四蒸水中，過濾除菌，分裝小瓶（4-5ml/瓶），蓋緊瓶塞，4℃保存。

g、 HEPES溶液（1mol/L）: 稱取23.83g HEPES（N-2-Hydroxyethylpiperazine-N，-2-ethanesulfonic acid，N-2-羥乙基哌嗪- N，-2-乙基磺酸，MW 238.3）溶於100ml超純水或四蒸水中，過濾除菌，分裝小瓶（4-5ml/瓶），4℃保存。

h、 8-氮鳥嘌呤貯存液（100×）: 稱取200mg 8-氮鳥嘌呤（8-azaguanine，MW 152.1），加入4mol/L NaOH 1ml，待其溶解後，加入超純水或四蒸水99ml，過濾除菌；分裝小瓶，-20℃凍存。使用時按1%濃度加入到培養液中（即終濃度為20ug/ml）。

g. 用新配製的10% Giemsa染液染色10-20分鍾，然後用自來水洗去染液，自然乾燥。（Giemsa染液配方：Giemsa粉0.5g，甘油33ml，55-60℃保溫2小時，加甲醇33ml混勻，保存於棕色瓶內作為原液；取原液1份，加1/15mol/L PH6.8 PBS 9份，即成10% Giemsa染液）。

h. 鏡檢：選擇染色體分散好，無重疊，無失散的細胞進行觀察分析。每份標本應計數100個完整的中期核細胞，並注意觀察是否有標志染色體。

i、 50% PEG: 稱取PEG 1000 或4000 20-50g於三角瓶中，蓋緊，60-80℃水浴融化，0.6ml分裝於青黴素小瓶中，蓋緊，8磅高壓蒸汽15分鍾，-20℃存放備用。臨用前加熱融化，加等量不完全培養基，用少許7.5% NaHCO3調PH至8.0，或購買Sigma或Gibco公司現成產品。

⑵ 髓瘤細胞的准備
融合前骨髓瘤細胞維持的方式，對成功地得到雜交瘤是最為重要的。目標是使細胞處於對數生長的時間盡可能長，融合前肯定不能少於1周。凍存的細胞在復甦後要2周時間才能處於適合於融合的狀態，長過了的骨髓瘤細胞至少幾天才可能恢復。在實驗室中處於對數生長的骨髓瘤細胞維持在含10%小牛血清的培養基中，方法是用6個裝5ml培養基的培養瓶，接種10倍系列稀釋的骨髓瘤細胞。1周後到細胞相當密而又未長過的一瓶重新移植。典型的倍增時間為14-16小時。
骨髓瘤細胞懸液的制備方法如下：
a、於融合前48-36小時，將骨髓細胞擴大培養（一般按一塊96孔板的融合試驗約需2-3瓶100ml培養瓶培養的細胞進行准備）。
b、融合當天，用彎頭滴管將細胞從瓶壁瘤輕輕吹下，收集於50ml離心管或融合管內。
c、 1000r/min離心5-10分鍾，棄去上清。
d、加入30ml不完全培養基，同法離心洗滌一次。然後將細胞重懸浮於10ml不完全培養基，混勻。
e、取骨髓瘤細胞懸液，加0.4%台盼藍染液作活細胞計數後備用。細胞計數時，取細胞懸液0.1ml加入0.9ml台盼藍染液中，混勻，用血球計數板計數。計算細胞數目的公式為：每毫升細胞數=4個大方格細胞數×105/4；或每毫升細胞數=5個中方格細胞數×106/2

⑶ 脾淋巴細胞的准備
取已經免疫的BALB/c小鼠，摘除眼球采血，並分離血清作為抗體檢測時的陽性對照血清。同時通過頸脫位致死小鼠，浸泡於75%酒精中5分鍾，於解剖台板上固定後掀開左側腹部皮膚，可看到脾臟，換眼科剪鑷，在超凈台中用無菌手術剪剪開腹膜，取出脾臟置於已盛有10ml不完全培養基的平皿中，輕輕洗滌，並細心剝去周圍結締組織。將脾臟移入另一盛有10ml不完全培養基的平皿中，用彎頭鑷子或裝在1ml注射器上的彎針頭輕輕擠壓脾臟（也可用注射器內芯擠壓脾臟），使脾細胞進入平皿中的不完全培養基。用吸管吹打數次，製成單細胞懸液。為了除去脾細胞懸液中的大團塊，可用200目銅網過濾。收獲脾細胞懸液，1000r/min離心5-10分鍾，用不完全培養基離心洗滌1-2次，然後將細胞重懸於10ml不完全培養基混勻，取上述懸液，加台酚藍染液作活細胞計數後備用。通常每隻小鼠可得1×108-2.5×108個脾細胞，每隻大鼠脾臟可得5×108-10×108脾細胞。

⑷ 飼養細胞（Feeder cells）的制備
在細胞融合後選擇性培養過程中，由於大量骨髓瘤細胞和脾細胞相繼死亡，此時單個或少數分散的雜交瘤細胞多半不易存活，通常必須加入其他活細胞使之繁殖，這種被加入的活細胞稱為飼養細胞。飼養細胞促進其他細胞增殖的機制尚不明了，一般認為它們可能釋放非種屬特異性的生長刺激因子，為雜交瘤細胞提供必要的生長條件；也可能是為了滿足新生雜交瘤細胞對細胞密度的依賴性。
常用的飼養細胞有胸腺細胞、正常脾細胞和腹腔巨噬細胞。其中以小鼠腹腔巨噬細胞的來源及制備較為方便，且有吞噬清除死亡細胞及其碎片的作用，因此使用最為普遍。其制備方法如下：
按上述采小鼠脾細胞的方法將小鼠致死、體表消毒和固定後，用消毒剪鑷從後腹掀起腹部皮膚，暴露腹膜。用酒精棉球擦拭腹膜消毒。用注射器注射10ml不完全培養基至腹腔，注意避免穿入腸管。右手固定注射器，使針頭留置在腹腔內，左手持酒精棉球輕輕按摩腹部1分鍾，隨後吸出注入的培養液。1000r/min離心5-10分鍾，棄上清。先用5ml HAT培養基將沉澱細胞懸浮，根據細胞計數結果，補加HAT培養基，使細胞濃度為2×105/ml，備用。通常對巨噬細胞來說，96孔培養板每孔需2×104個細胞，24孔板每孔需105細胞。每隻小鼠可得3-5×106個細胞，因此一隻小鼠可供兩塊96孔板的飼養細胞。也可在細胞融合前1-2天制備並培養飼養細胞，這樣使培養板孔底先鋪上一層飼養細胞層。做法是，將上述細胞懸液加入96孔板，每孔0.1ml（相當於2滴），然後置37℃ 6% CO2的培養箱中培養。

⑸ 細胞融合與雜交瘤細胞的選擇性培養
細胞融合的程序已報道的有很多種，這里介紹的是作者所在實驗室常用的一種。
A、將1×108脾細胞與2×107-5×107骨髓瘤細胞SP2/0-Ag14混合於一支50ml融合管中，補加不完全培養基至30ml，充分混勻。
B、 1000r/min離心5-10分鍾，將上清盡量吸凈。
C、在手掌上輕擊融合管底，使沉澱細胞鬆散均勻;置40℃水浴中預熱。
D、用1ml吸管在1分鍾左右（最佳時間為45秒）加預熱至40℃的50% PEG（PH 8.0）1ml，邊加邊輕輕攪拌。
E、用10ml吸管在90秒內加20-30ml預熱至37℃的不完全培養基；20-37℃靜置10分鍾。
F、 1000r/min 5分鍾；棄去上清。
G、 加入5ml HAT培養基，輕輕吹吸沉澱細胞，使其懸浮並混勻，然後補加含腹腔巨噬細胞的HAT培養基至80-100ml。
H、分裝96孔細胞培養板，每孔0.10-0.15ml；分裝24孔板，每孔1.0-1.5ml；然後將培養板置37℃，6% CO2培養箱內培養。
I、 5天後用HAT培養基換出1/2培養基。
J、 7-10天後用HT培養基換出HAT培養基；（第14天後可用普通完全培養基）。
L、經常觀察雜交瘤細胞生長情況，待其長至孔底面積1/10以上時吸出上清供抗體檢測。

3、雜交瘤細胞篩選

雜交瘤細胞在融合後2周左右即可篩選，即把分泌所需抗體的雜交瘤孔從眾多的孔中選出來，通常也稱為抗體檢測。抗體檢測的方法很多，通常根據所研究的抗原和實驗室的條件而定。但作為雜交瘤篩選的抗體檢測方法必須具有快速、准備、簡便，便於一次處理大量樣品等特點。因為往往有幾百個樣品需要在短短幾個小時就報告結果，以便決定雜交瘤細胞的取捨。所以選用抗體檢測方法的原則是快速、敏感、特異、可靠、花費小和節省人力。一般說來，在融合之前就必須建立好抗體檢測方法，並克服可能存在的問題。另一個重要問題是抗體檢測方法所需要的「動力學范圍」，即檢出背景以上的最強與最弱信號之比，依所用的檢測抗原是否純凈而定。如雜交瘤抗體是針對純化的蛋白質抗原的，100%的抗原參與反應，一個陽性/陰性判別系統就夠了。另一方面，如果雜交瘤抗體是針對細胞表面微量的蛋白抗原，檢測系統可能需要能測出微弱信號，則動力學范圍至少應為10：1，最好為100：1。另外，檢測方法的選擇還受所需雜交瘤抗體的類型和預定的用途的影響。結合補體的抗體可以用基於細胞毒性反應的檢測方法來選出。如需結合A蛋白的雜交瘤抗體，就要用結合蛋白A的檢測方法。

下面簡要介紹幾種常用的抗體檢測方法：

⑴ 免疫酶技術

免疫酶技術是將抗原抗體反應的特異性和酶對底物顯色反應的高效催化作用有機結合而成的免疫學技術。由於它特異性強，靈敏度高，現已廣泛用於篩選和鑒定單抗。

A、器材和試劑

a. 包被緩沖液：

碳酸鹽緩沖液：取0.2mol/L Na2CO3 8ml，0.2mol/L NaHCO3 17ml混合，再加75ml蒸餾水，調PH至9.6。

Tris-HCl緩沖液（PH8.0，0.02mol/L）：取0.1mol/L Tris 100ml，0.1mol/L HCl 58.4ml混合，加蒸餾水至1000ml。

b. 洗滌緩沖液（PH7.2的PBS）：KH2PO4 0.2g，KCl 0.2g，Na2HPO4"12H2O 2.9g，NaCl 8.0g，Tween-20 0.5ml，加蒸餾水至1000ml。

c. 稀釋液和封閉液：牛血清白蛋白（BSA）0.1g，加洗滌液至100ml；或用洗滌液將小牛血清配成5-10%使用。

d. 酶反應終止液（2mol/L H2SO4）：取蒸餾水178.3ml，滴加濃硫酸（98%）21.7ml。

e. 底物緩沖液（PH5.0，磷酸鹽-檸檬酸緩沖液）：取0.2mol/L Na2HPO4 25.7ml，0.1ml/L檸檬酸24.3ml，再加50ml蒸餾水。檸檬酸溶液及配成的底物緩沖液不穩定，易形成沉澱，因此一次不宜配製過多。

f. 底物使用液：

OPD底物使用液（測490nm的OD值）：OPD 5mg，底物緩沖液10ml，3% H2O2 0.15ml。

TMBS或TMB底物使用液（測450nm的OD值）：TMBS或TMB（1mg/ml）1.0ml，底物緩沖液10ml，1% H2O2 25ul。

ABTS底物使用液（測410nm的OD值）：ABTS 0.5mg，底物緩沖液1ml，3% H2O2 2ul。

g. 抗體對照：以骨髓瘤細胞培養上清作為陰性對照，以免疫鼠血清作為陽性血清。

h. 抗原：可溶性抗原：盡量純化，以獲得高特異性。

病毒感染的傳代細胞或全菌抗原。

淋巴細胞等懸液。

i. 酶標抗鼠抗體或酶標SPA或其他類似試劑。

j. 細胞固定液：-20℃丙酮；或丙酮-甲醛固定液：Na2HPO4 100mg，KH2PO4 500mg，蒸餾水150ml，丙酮225ml，甲醛125ml；或丙酮-甲醛溶液（1;1）；或-20℃甲醇。

k. 聚苯乙烯微孔板：40孔、96孔、或條孔；硬板或軟板均可使用。

l. 酶聯免疫閱讀儀；或光鏡。

m. 吸管、加樣器及水浴箱、離心機等。

B、 可溶性抗原的酶聯免疫吸附試驗（ELISA）

a. 純化抗原用包被液稀釋至1-20ug/ml。

b. 以50-100ul/孔量加入酶標板孔中，置4℃過夜或37℃吸附2小時。

c. 棄去孔內的液體，同時用洗滌液洗3次，每次3-5分鍾，拍干。

d. 每孔加200ul封閉液4℃過夜或37℃封閉2小時；該步驟對於一些抗原，可省略。

e. 洗滌液洗3次；此時包被板可-20℃或4℃保存備用。

f. 每孔加50-100ul待檢雜交瘤細胞培養上清，同時設立陽性、陰性對照和空白對照；37℃孵育1-2小時；洗滌，拍干。

g. 加酶標第二抗體，每孔50-100ul，37℃孵育1-2小時，洗滌，拍干。

h. 加底物液，每孔加新鮮配製的底物使用液50-100ul，37℃10-30分鍾。

i. 以2mol/L H2SO4終止反應，在酶聯免疫閱讀儀上讀取OD值。

j. 結果判定：以P/N≥2.1，或P≥N 3D為陽性。若陰性對照孔無色或接近無色，陽性對照孔明確顯色，則可直接用肉眼觀察結果。

C、 全菌抗原的ELISAS

a. 新鮮培養的細菌用蒸餾水或PBS懸浮，並調整細菌濃度至1×108個/ml。必須指出，對於人畜共患病病原體需注意安全操作，最好是滅活處理。

b. 每孔中加100ul 5%戊二醛溶液（0.1mol/L NaHCO3 95ml 25%戊二醛溶液5ml），37℃作用2小時，蒸餾水洗滌3次；加上述細菌懸液50ul/孔；37-56℃烘乾；每孔加200ul封閉液4℃過夜或37℃ 2小時封閉。

c. 步驟b也可採用先每孔加50ul細菌懸液，37℃-56℃烘乾，然後用-20℃預冷的無水甲醇室溫作用15分鍾，蒸餾水洗滌3次；每孔加200ul封閉液4℃過夜或37℃ 2小時封閉。

d. 洗滌液洗3次；此時包被板可在-20℃或4℃保存備用。

e. 以下步驟同上法。

D、 用全細胞抗原的ELISA

a. 按常規方法培養細胞，接種病毒，收獲感染細胞和未感染細胞，進行細胞計數，用PBS製成適當濃度懸液。

b. 淋巴細胞懸液的制備採用新鮮外周血加肝素抗凝後，滴加於淋巴細胞分離液之上，1500rpm離心30分鍾，吸取界面細胞洗滌二次，即為新鮮淋巴細胞懸液。該細胞懸液中若仍混有紅細胞，離心後加0.83%的氯化銨溶液，室溫10分鍾，洗滌一次即可。將該細胞懸液稀釋至適當濃度。

c. 每孔加100ul上述a或b的細胞懸液，使每孔含細胞5×104個；1500r/min 15分鍾，甩去上清；室溫乾燥或吹乾後用丙酮-甲醇（1：1）4℃固定10分鍾；可4℃或-20℃保存備用。

d. 以下步驟同上法。

E、抗體捕捉ELISA試驗

本法用抗BALB/c小鼠Ig的多克隆抗體捕捉待檢樣品中的McAb，再依次加抗原、酶標多克隆抗體及底物顯色。該法是常用的ELISA中較理想的一種；其操作步驟如下：

a. 以適當濃度的純化抗鼠Ig抗體包被酶標板，每孔加100ul，37℃ 2小時或4℃過夜。

b. 洗滌、拍干後加待測的McAb樣品，37℃ 1-2小時。

c. 洗滌後加適量的抗原，37℃ 1-2小時。

d. 洗滌後加入酶標多克隆抗體，37℃ 1-2小時。洗滌後加底物顯色，判定結果。