1、培養骨髓間充質幹細胞必須用塑料培養皿嗎
總結下各種孔板細胞接種量 僅供參考 細胞培養瓶(板)生長面積容量與細胞數(大約) 96孔板 4~5X10 4 35mm培養皿 1X10 6 48 孔板 1.3X10 5 60mm培養皿 2.6X10 6 24孔板 2.5X10 5 100mm培養皿 7X10 6 12孔板 5X10 5 150mm培養皿 1.8X10 7 6孔板 1.2X10 6 細胞瓶面積 容量 工作體積 細胞數目 612.5cm2 25ml 2ml 5X10 5 25cm2 50ml 5ml 1X10 68 35cm2 75ml 10ml 2X10 6 75 cm2 250ml 15ml X10 6 150cm2 700ml 40ml 1.1X10 7 補充:不同孔板所加培養液的液面都不宜太深,一般在2~3mm范圍,結合不同孔的底面積就可算出各培養孔的適宜加液量(參考下表)。若加液量過多會影響氣體(氧氣)交換,而且在搬動過程中易溢出造成污染。具體所加細胞密度依實驗的目的不同靈活掌握。
2、骨髓間充質幹細胞與骨髓基質幹細胞是同一種細胞嗎
不是一種細胞,具體來源不同,但是都是幹細胞,只是分別由基質細胞、間充質分離培養得到。只知道下面這些,希望有幫助
1、間充質幹細胞(MSCs)是屬於中胚層的一類多能幹細胞,主要存在於結締組織和器官間質中,以骨髓組織中含量最為豐富,由於骨髓是其主要來源,因此統稱為【骨髓間充質幹細胞】。骨髓間充質幹細胞是胎兒和成年人保留在骨髓血液中的原始幹細胞,具有強大的生命力,能被誘導分化為血管組織和骨組織,再生能力強;未分化的間充質細胞(undifferentiated mesenchymal cell)是保留在成體結締組織內的一些較原始的細胞,它們保持著間充質細胞的分化潛能,在炎症與創傷時可增殖分化為成纖維細胞、脂肪細胞。間充質細胞常分布在小血管尤其是毛細血管周圍,並能分化為血管壁的平滑肌和內皮細胞。位於器官之間、組織之間以至細胞之間,起連接、支持、營養、防禦、保護和修復等功能。
一、具有強大的增殖能力和多向分化潛能,在適宜的體內或體外環境下不僅可分化為造血細胞,還具有分化為肌細胞、肝細胞、成骨細胞、軟骨細胞、基質細胞等多種細胞的能力。
二、具有免疫調節功能,通過細胞間的相互作用及產生細胞因子抑制T細胞的增殖及其免疫反應 ,從而發揮免疫重建的功能。
三、具有來源方便,易於分離、培養、擴增和純化,多次傳代擴增後仍具有幹細胞特性,不存在免疫排斥的特性。
2、基質細胞群包括成纖維細胞、網狀細胞及巨噬細胞等,基質細胞在體外培養可形成CFU-F。造血幹細胞被基質細胞包繞後才能增殖。血細胞是在基質細胞形成的網狀支架中增殖和分化。
小知識: 幹細胞的分類與來源
根據其發育階段,於細胞可分為胚胎幹細胞(Embryonic Stem Cell)和成體幹細胞(Alt Stem Cell)。胚胎幹細胞包括ES細胞(Embryonic Stem Cell)、EG 細胞(Embryonic Germ Cell);成體幹細胞包括神經幹細胞(Neural Stem Ce11, NSC)、血液幹細胞(Hematopoietic Stem Cell,HSC)、骨髓間充質幹細胞(Mesen chymal Stem Cell,MSC),骨髓基質幹細胞,表皮幹細胞(EPidexmis Stem Cell)等。
近年,發現不同胚層起源的成體幹細胞在一定條件下也可相互轉化。如肌肉組織的幹細胞可以「橫向分化」為血液細胞和脂肪細胞。
3、骨髓巨噬細胞和間充質幹細胞的關系
單核細胞來源粒--單系祖細胞,經原單核細胞、幼稚單細胞階段分化成單核細胞,然後由骨髓釋放入血,在血中3~~4天後進入組織和漿膜腔轉變成巨噬細胞。二者是相同但在部位不同名稱不一樣,共同構成單核巨噬細胞系統。 單核-巨噬細胞系統包括血液中
巨噬細胞\幹細胞\骨髓
單核細胞來源粒--單系祖細胞,經原單核細胞、幼稚單細胞階段分化成單核細胞,然後由骨髓釋放入血,在血中3~~4天後進入組織和漿膜腔轉變成巨噬細胞。二者是相同但在部位不同名稱不一樣,共同構成單核巨噬細胞系統。 單核-巨噬細胞系統包括血液中
4、骨髓間充質幹細胞表面標志物cd45是單標還是雙標
不同的幹細胞有自己特異的細胞表面抗原,鑒定細胞的種類最准確直接的方法就是用流式細胞儀檢測其表面抗原。
以骨髓間充質幹細胞(MSC)為例,需要鑒定CD34、CD44、SH1等表面標志。除此之外,骨髓間充質幹細胞還需要進行分化實驗,以回證實其可以分化為骨、軟骨、細胞。以上兩條,即表面標志及分化實驗沒有問題,就可以確定培養的細胞為骨髓間充質幹細胞。
不同的幹細胞有不答同的表面標志及分化能力,所以MSC只是做為一個例子來說明。
5、骨髓基質細胞和骨髓間充質幹細胞的區別
骨髓基質細胞是存在於骨髓中的一類多能幹細胞,具有分化成骨細胞、軟骨細胞、脂肪細胞和其他幾種結締組織細胞(如腱細胞)。亦可轉分化成心肌細胞和骨骼肌細胞。骨髓間充質幹細胞現已被歸為結締組織成體幹細胞。事實上,骨髓基質細胞中的間充質幹細胞數量是很少的,約占細胞總數的10萬分之一,其定向分化也不均一,現在越來越多的研究揭示骨髓間充質幹細胞及其初步分化的祖細胞或稱前體細胞(precusor, progenitor cells)具有一些特殊的表面蛋白特徵;此外,幹細胞具有多向分化及自我更新能力,其細胞復制分裂方式是不對稱分裂,這明顯不同於普通的細胞。通過貼壁法或Percoll等細胞分離介質只能獲得混合的骨髓基質細胞,只有應用免疫磁珠、流式細胞儀等將其進一步分離純化後,才能稱為骨髓間質幹細胞。(河南省幹細胞庫)