1、如何提取小鼠骨髓細胞?
1、頸椎脫臼法處死小鼠(C57型小鼠)，放在75%酒精中侵泡3-5分鍾後，拎出後將小鼠鋪於超凈台上一個消毒托盤上。
2、無菌提取小鼠的四肢骨，用眼科鑷小心捏起小鼠兩髖關節之間的腹部皮膚，用眼科剪小心剪開皮膚，並分離兩下肢的皮膚，往下在腳踝處剪斷，往上在髖關節處剪斷，這樣可以游離出小鼠的兩條下肢。
3、小心剝離肌肉，分別剪下Femurs（大腿骨）and Tibias（脛骨）,剪去兩端軟骨，露出紅色的骨髓腔。注意盡可能少的剪走骨髓腔。用紗布將骨頭上的肌肉用紗布擦拭乾凈。
4、拿一支1ml的無菌注射器，每支吸取1mlHBSS液，並用無菌的針頭套管將之輕輕擰彎。輕輕插入骨髓腔，沖洗骨髓腔以獲得骨髓，一般用2-3ml培養基沖洗兩次，可沖出絕大部分細胞。
5、過濾：用2OO目的濾網過濾，將濾網的中央插入到離心管裡面25px處，然後用注射器吸取骨髓液，慢慢將骨髓液經濾網注入離心管中，去除殘渣。
6、離心：將離心管放置離心機中離心10分鍾（1350r/min）
7、去上清，加入1ml紅細胞裂解液ACK，靜置3分鍾，再加9ml HBSS溶液，進行離心10分鍾，棄上清。
8、用HBSS液洗滌骨髓細胞2次，室溫，1350r/min離心10分鍾。計數活細胞，用培養基調整細胞濃度至1X106個細胞/ml.
9、在試管中加入RPMI-1640培養基，然後再加入20ng/ml的細胞因子GM-CSF、5%FBS、0.1%的2-巰基乙醇，
10、吸取培養基加入到沉澱中混勻，24孔板鋪板培養，每個孔1ml.
2、細胞培養基種類及適合於何種細胞
培養某一類型細胞沒有固定的培養條件。在MEM中培養的細胞，很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長。總之，首選MEM做粘附細胞培養、RPMI-1640做懸浮細胞培養，各種目的無血清培養的首選是AIM V培養基（SFM）。在開始進行新的細胞培養時，可以參考下表所列的條件：
細胞系 細胞類型 種 組織 推薦使用的培養基
293 成纖維細胞 人 胚胎腎 MEM, 10% 熱滅活馬血清
3T6 成纖維細胞 小鼠 胚胎 DMEM, 10% 胎牛血清
A549 上皮細胞 人 肺癌 F-12K, 10%胎牛血清
A9 成纖維細胞 小鼠 結締組織 DMEM, 10%胎牛血清
AtT-20 上皮細胞 小鼠 垂體腫瘤 F-10, 15% 馬血清和2.5% 胎牛血清
BALB/3T3 成纖維細胞 小鼠 胚胎 DMEM, 10% 胎牛血清
BHK-21 成纖維細胞 倉鼠 腎 GMEM, 10% 胎牛血清 或MEM, 10% 胎牛血清 和NEAA
BHL-100 上皮細胞 人 乳房 McCoy'5A, 10% 胎牛血清
BT 成纖維細胞 牛 鼻甲骨細胞 MEM, 10% 胎牛血清 和 NEAA
Caco-2 上皮細胞 人 結腸腺癌 MEM, 20% 胎牛血清 和NEAA
Chang 上皮細胞 人 肝臟 BME, 10% 小牛血清
CHO-K1 上皮細胞 倉鼠 卵巢 F-12, 10% 胎牛血清
Clone 9 上皮細胞 大鼠 肝臟 F-12K, 10% 胎牛血清
Clone M-3 上皮細胞 小鼠 黑素瘤 F-10, 15% 馬血清和 2.5% 胎牛血清
COS-1 成纖維細胞 猴 腎 DMEM, 10% 胎牛血清
COS-3 成纖維細胞 猴 腎 DMEM, 10% 胎牛血清
COS-7 成纖維細胞 猴 腎 DMEM, 10% 胎牛血清
CRFK 上皮細胞 貓 腎 MEM, 10% 胎牛血清 和NEAA
CV-1 成纖維細胞 猴 腎 MEM, 10% 胎牛血清
D-17 上皮細胞 狗 骨肉瘤 MEM, 10% 胎牛血清 和NEAA
Daudi 成淋巴細胞 人 淋巴瘤病人血液 RPMI-1640, 10% 胎牛血清
GH1 上皮細胞 大鼠 垂體腫瘤 F-10, 15% 馬血清和 2.5% 胎牛血清
GH3 上皮細胞 大鼠 垂體腫瘤 F-10, 15% 馬血清和2.5% 胎牛血清
H9 成淋巴細胞 人 T細胞淋巴瘤 RPMI-1640, 20% 胎牛血清
HaK 上皮細胞 倉鼠 腎 BME, 10% 小牛血清
HCT-15 上皮細胞 人 結腸直腸腺癌 RPMI-1640, 10% 胎牛血清
HeLa 上皮細胞 人 子宮頸癌 MEM, 10% 胎牛血清 和NEAA (in suspension, S-MEM)
HEp-2 上皮細胞 人 喉 癌 MEM, 10% 胎牛血清
HL-60 成淋巴細胞 人 早幼粒細胞白血病 RPMI-1640, 20% 胎牛血清
HT-1080 上皮細胞 人 纖維肉瘤 MEM, 10% HI 胎牛血清 和NEAA
HT-29 上皮細胞 人 結腸腺癌 McCoy's 5A, 10% 胎牛血清
HUVEC 內皮細胞 人 臍帶 F-12K, 10% 胎牛血清 和 肝素鹽 100 ug/ ml
I-10 上皮細胞 小鼠 睾丸癌 F-10, 15% 馬血清和 2.5% 胎牛血清
IM-9 成淋巴細胞 人 骨髓瘤病人骨髓 RPMI-1640, 10% 胎牛血清
JEG-2 上皮細胞 人 絨毛膜癌 MEM, 10% 胎牛血清
Jensen 成纖維細胞 大鼠 肉瘤 McCoy's 5A, 5% 胎牛血清
Jurkat 成淋巴細胞 人 淋巴瘤 RPMI-1640, 10% 胎牛血清
K-562 成淋巴細胞 人 骨髓性的白血病 RPMI-1640, 10% 胎牛血清
KB 上皮細胞 人 口腔癌 MEM, 10% 胎牛血清 和NEAA
KG-1 骨髓白細胞 人 紅白血病病人骨髓 IMDM, 20% 胎牛血清
L2 上皮細胞 大鼠 肺 F-12K, 10%胎牛血清
L6 大鼠 骨骼肌成肌細胞 DMEM, 10% 胎牛血清
LLC-WRC 256 上皮細胞 大鼠 癌 Medium 199, 5% 馬血清
McCoy 成纖維細胞 小鼠 未知 MEM, 10% 胎牛血清
MCF7 上皮細胞 人 乳腺癌 MEM, 10% 胎牛血清 NEAA, 10ug/ml 胰島素
WEHI-3b 類巨噬細胞 小鼠 骨髓單核細胞白血病 DMEM, 10% 胎牛血清
WI-38 上皮細胞 人 胚胎肺 BME, 10% 胎牛血清
WISH 上皮細胞 人 羊膜 BME, 10% 胎牛血清
WS1 人 胚胎皮膚 MEM, 10% 胎牛血清 和NEAA
XC 上皮細胞 大鼠 肉瘤 MEM, 10% 胎牛血清 和NEAA
Y-1 上皮細胞 小鼠 腎上腺瘤 F-10, 15% 馬血清和 2.5% 胎牛血清
3、骨髓MSC培養到底用什麼培養基？
幹細胞相關的培養液都必須在5％CO2的氣體百環境中培養使用。否則會對細胞產生影響。氣體是哺乳動物細胞培養生存必需條件之一，所需氣體主要度有氧氣和二氧化碳。氧氣參與三羧酸循環，產生供給細胞生長增殖的問能量和合成細胞生長所需用的各種成分。開放培養時一般把細胞置於95%空氣加5%二氧化碳混合氣體答環境中。二氧化碳既是細胞代謝產物也是細胞生長繁殖所需成分，它在細胞培養中的主要作用在於維持培內養基的pH值。大多數細胞的適宜pH為7.2-7.4，偏離這一范圍對細胞培養將產生有害的影響。一般情況下，細胞耐酸性比耐鹼性大一些，在偏酸環境中更利於容細胞生長。
4、求助：骨髓細胞的性質和無血清培養基不需要加入的成分
AA
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5、為什麼骨髓瘤細胞要用1640培養基培養啊
1640並不是培養骨髓細胞的最佳選擇。市場上有很多專門為培養骨髓細胞的培養液，比如GIBCO MarrowMAX。建議你多查文獻，看看別人是怎麼做的
6、骨髓細胞培養，有哪些細胞是貼壁的
而不是有些人說的。 而有些細胞可以懸浮生長這是由細胞的性質特點決定的。 有些細胞是必須要附著在支持物上才可以生長的。 這些細胞的生長都是需要添加血清的，比如肝細胞，胃上皮細胞等等，比如骨髓細胞白，血病細胞等等，加入血清後會貼壁
7、骨髓細胞有哪些可以培養的細胞系
那就多了，大多數惡性血液病癌細胞都算。細胞系(cell line)指原代細胞培養物經首次傳代成功後所繁殖的細胞群體。 也指可長期連續傳代的培養細胞。(由此便引申出了後來的有限細胞系(FiniteCellLine)、無限細胞系(InfiniteCellLine))，因此，細胞系狹義的是指可連續傳代的細胞(特定環境下口語和書面語都使用)，廣義是指可傳代的細胞
中文名稱：細胞系
外文名稱：cell line
經過40-50次分裂的渡過第二次死亡危機的細胞，稱之為細胞系。如細胞系的生存期有限，則稱之為有限細胞系(FiniteCellLine);已獲無限繁殖能力的細胞系，稱連續或無限細胞系(InfiniteCellLine)。無限細胞系大多已發生異倍化，具異倍體核型，可能成為惡性細胞，因此本質上已是發生轉化的細胞系。無限細胞系有永生性(不死性)，但仍保留接觸抑制和無異體接種致死;有的有永生性，異體接種有致瘤性，說明已惡性化。由某一細胞系分離出來的、在性狀上與原細胞系不同的細胞系，稱亞系(Subline)。
8、急！！細胞培養基按什麼注冊？
培養基在體外診斷試劑注冊中提到，按一類。 查看原帖>>
9、什麼是骨髓瘤細胞8-ag培養基
8－AG（即8－氮鳥嘌呤）是一種鹼性細胞殺傷因子。細胞DNA的合成主要是兩個途徑，一個是主要途徑，一個是補救途徑，而HGPRT酶（即次黃嘌呤－鳥嘌呤核糖轉移酶）是補救途徑嘌呤的主要合成酶，正常情況下，細胞可以同時通過這兩種途徑來合成DNA。而8－AG也是一種嘌呤，自然也可以被認為是一種合成DNA的原料，但由於它是有毒的，它的存在會殺死細胞。而HGPRT酶缺陷的骨髓瘤細胞不能通過補救途徑合成DNA，所以就可以存活。因而經8－AG篩選後的sp2/0細胞都是HGPRT酶缺陷株。