1、血塗片瑞氏染色偏鹼,可出現什麼現象
你說的情況指的是染色液偏鹼性。血塗片瑞氏染色的染色液,對ph值的要求非常高。只有在恰當的ph值范圍內才能染出良好的片子,對顯微鏡觀察提供方便。如果染色偏鹼,那麼染出來的顏色就會偏深偏藍,可能會影響判斷。
2、血塗片放置時間過長未染色會不會影響質量
按照以下注意事項操作就沒有問題的:
1) 玻片的清洗:新玻片常有游離鹼質,因此應用清洗液或10%鹽酸浸泡24小時,然後再徹底清洗。用過的玻片可放入適量肥皂水或合成洗滌劑的清水中煮沸20分鍾,再用熱水將肥皂和血膜洗去,用自來水反復沖洗,必要時再置95%乙醇中浸泡1小時,然後擦乾或烤乾備用。使用玻片時只能手持玻片邊緣,切勿觸及玻片表面;,以保持玻片清潔,乾燥,中性、無油膩。
2) 細胞染色對氫離子濃度十分敏感,在染色過程中玻片必須化學清潔,配製瑞氏染液必須用優質甲醇,稀釋染液必須用緩沖液,沖洗用水應近中性,否則各種細胞染色反應異常,致使細胞的識別困難,甚至造成錯誤。
3) 一張良好的血片,要求厚薄適宜,頭體尾分明,分布均勻,邊緣整齊,兩側留有空隙。血片制好後最好立即固定染色,以免細胞溶解和發生退行性變。
4) 血膜未乾透,細胞尚未牢固附在玻片上,在染色過程中容易脫落,因此血膜必需充分乾燥.
5) 染色時間與染液濃度,室溫高低,細胞多少有關.染液越淡,室溫越低,細胞越多,所需染色時間越長或應適當增加染液量,因此染色時間應視具體情況而定.特別是更換新染料時必須經試染,摸索最佳染色條件.
6) 染液不可過少,以防蒸發乾燥染料沉著於血片上難沖洗干凈.
7) 沖洗時應用流水將染液沖去.不能先倒掉染液,以免染料沉著於血片上.
8) 染色過深可用甲醇或酒精適當脫色,最好不復染,必須復染時,可將染液先稀釋好再復染.
9) 染色時應注意保護血膜尾部細胞,不能劃掉.因為體積較大細胞常在此處出現.
3、迪夫染液染色不好怎麼辦?
Diff-Quik 染色是在 Wright 染色基礎上改良而來的一種快速染色方法,是細胞學檢查中常用的染色方法之一,染液是採用世界衛生組織(WHO)推薦的快速染色方法而配製, 與Wright Stain 類似都是利用 Romanowsky Stain 技術原理改良而來的,染色結果與瑞氏染色液也極其相似,但迪夫快速染色所需的時間極短,一般 90s 以內即可完成染色。
NobleRyder迪夫快速染色液含固定液,主要用於血細胞塗片、骨髓塗片、陰道分泌物塗片、 脫落細胞塗片等染色, 非常適合用於批量浸染, 丏背景清晰無沉渣。 該染色液僅用於科研領域,不宜用於臨床診斷或其他用途。
注意事項:
1、 Diff-Quik Fixative是 Diff 常用固定液,如需大量可用甲醇替代。
2、 血液塗片或骨髓塗片應厚薄均勻,以免影響染色效果。
3、 血細胞塗片染色要求新鮮全血或EDTA 抗凝血。
4、 骨髓塗片染色要求制備好的塗片在空氣中快速搖動或扇干,以防止細胞皺縮變形或因空
氣潮濕而溶血,不能用高溫或火烤來乾燥塗片。
5、 陰道分泌物塗片染色要求新鮮標本塗片後,盡快以火焰或酒精固定,以免細胞變形。
6、 脫落細胞塗片固定可採用自然乾燥或固定液固定。
7、 塗片染色中請勿先去除染液或直接對塗片用力沖洗。不能先倒掉染液,以免染料沉著於
塗片上。
8、 染色液可重復使用,但不能多次重復,若有沉澱物應過濾後使用。
9、 染色過深可用甲醇或酒精適當脫色,zui好不復染。
10、如果染色過深或過淺,應調整染色時間或工作液濃度。
11、pH 值對染色有一定影響,載玻片應清潔、無酸鹼污染,以免影響染色效果。
12、為了您的安全和健康,請穿實驗服並戴一次性手套操作。
4、如對病變組織塗片用瑞特氏染色法染色後鏡檢發現有大量的具有「兩極濃染」特點?
如對病變組織圖片,有對特色藍色巨人身後。鏡檢發現有大量的就有倆幾龍船頭速度都練靜坐的瀑布別有綠的是的,是去忍受後鏡檢發現有大量的具有兩句。容忍的過程,形狀的圖片,各種特色領著去忍受後,竟發現有大量的具有地方就容易點的過段時間這個。病變可能性有各種各樣病。
5、影響革蘭氏染色正確性的因素有哪些
一、影響因素
1、在實驗中經常會出現假陽性和假陰性的結果,假陽性主要是由於脫色不完全,可能是由於塗片過厚,或者是結晶紫染色過度,導致脫色不完全。
2、假陰性可能是因為細胞固定過度,造成細胞壁通透性的改變,而出現假陰性結果;另外,細胞培養時間太長,可能已經有部分細胞發生死亡或者自溶,也導致細胞壁通透性的改變而出現假陰性結果。
二、拓展資料:關於革蘭氏染色(資料來源:網頁鏈接)
1、革蘭氏染色法是細菌學中廣泛使用的一種鑒別染色法,1884年由丹麥醫師Gram創立。未經染色之細菌,由於其與周圍環境折光率差別甚小,故在顯微鏡下極難觀察。染色後細菌與環境形成鮮明對比,可以清楚地觀察到細菌的形態、排列及某些結構特徵,而用以分類鑒定。革蘭氏染色屬復染法。
2、革蘭氏染色法是細菌學中廣泛使用的一種鑒別染色法,這種染色法是由一位丹麥醫生漢斯·克里斯蒂安·革蘭(Hans Christian Gram,1853年-1938年)於1884年所發明,最初是用來鑒別肺炎球菌與克雷白氏肺炎菌之間的關系。未經染色之細菌,由於其與周圍環境折光率差別甚小,故在顯微鏡下極難觀察。染色後細菌與環境形成鮮明對比,可以清楚地觀察到細菌的形態、排列及某些結構特徵,而用以分類鑒定。
6、骨髓塗片可以放冰箱
你可以搜索「骨髓塗片保存方式對瑞氏染色結果影響」這個裡面有
7、製作臨時裝片時 染色會對細胞產生什麼影響
製作臨時裝片時 染色會對細胞產生什麼影響
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染色是生物顯微玻片標本製作中最重要的環節之一。通過染色,將生物組織浸入染色劑內,使組織細胞的某一部分染上與其他部分不同的顏色或深度不同的顏色,產生不同的折射率,以便觀察。不會影響細胞結構的。如果細胞本身有顏色就不需要染色了。
細胞染色常用方法:
細胞染色常用方法主要包括以下幾個即:
1、簡單染色法,常用鹼性染料如美藍等進行簡單染色;
2、革蘭氏染色法,主要包括結晶紫初染、碘液媒染、乙醇(或丙酮)脫色以及番紅復染四個過程;
3、瑞氏染色法,瑞氏染料溶劑主要是由伊紅美藍組成;
4、吉姆薩染色法,吉姆薩染色原理與結果和瑞特染色法基本相同;
5、細胞免疫熒光染色法,免疫熒光染色的主要原理是利用抗原抗體之間的特異性結合。
十五種細胞染色試劑:
1、 酸性品紅(Acid fuchsin)酸性品紅是酸性染料,呈紅色粉末狀,能容於水,略溶於酒精(0.3%)。是良好的細胞制染色劑,在動物製片上應用很廣,在植物製片上用來染皮層、髓部等薄壁細胞和纖維素壁。它跟甲基綠同染,能顯示線粒體。組織切片在染色前先浸在帶酸性的水中,可增強它的染色力。酸性品紅容易跟鹼起作用,所以染色過度,易在自來水中褪色。
2、 剛果紅(Congo red)剛果紅是酸性染料,呈棗紅色粉末狀,能溶於水喝酒精,遇酸呈藍色。它能作染料,也用作指示劑。它在植物製片中常作為蘇木精或其他細胞染料的襯墊劑。用來染細胞質時,能把膠制或纖維素染成紅色。在動物組織製片中用來染神經軸、彈性纖維、胚胎材料等。剛果紅可以跟蘇木靜作二重染色,也可用作類澱粉染色,由於它能溶於水和酒精,所以洗滌和脫水處理要迅速
3、甲基藍(Methyl blue)甲基藍是弱酸性染料,能溶於水和酒精。甲基藍在動植物的製片技術方面應用極廣。它跟伊紅合用能染神經細胞,也是細菌製片中不可缺少的染料。它的水溶液是原生動物的活體染色劑。甲基藍極易氧化,因此用它染色後不能長久保存。
4、固綠(Fast green)固綠是酸性染料,能溶於水(溶解度為4%)和酒精(溶解度為9%)。固綠是一種染含有漿質的纖維素細胞組織的染色劑,在染細胞和植物組織上應用極廣。它和蘇木精、番紅並列為植物組織學上三中最常用的染料。
它和蘇木精、番紅並列為植物組織學上三中最常用的染料。
5.苯胺藍(Aniline blue)是一種混合酸性染料,平常所用很難有一定的標准。此染料一般很難溶於水,也不易溶於酒精(1.5%)。植物製片中可與番紅合用,作為組織染色;也可作藻類植物染色。因為這種染料的成分很不一致,染色效果不易掌握。
6、蘇丹Ⅲ (Sudan Ⅲ)蘇丹Ⅲ是弱酸性染料,不溶解於水,呈紅色粉末狀,易溶於脂肪和酒精(溶解度為0.15%)。常用70%酒精中的飽和溶液。蘇丹Ⅲ是脂肪染色劑。
7、蘇丹Ⅳ (Sudan Ⅳ)蘇丹Ⅳ是弱酸性染料,也是很好的染脂肪染料,現在多用以代替蘇丹Ⅲ,可染樹脂、乳汁管、蠟質以及角質等結構,也可使葉綠體染成暗紅色。
s8、伊紅(Eosin)這類染料種類很多。常用的伊紅Y,是酸性染料,呈紅色帶藍的小結晶或棕色粉末狀,溶於水(15攝氏度是溶解度達44%)和酒精(溶於無水酒精的溶解度為2%)。伊紅在動物製片中廣泛應用,是很好的細胞質染料,常用作蘇木精的襯染劑。
9、鹼性品(復)紅(Basic fuchsin)鹼性品紅是鹼性染料,呈暗紅色粉末或結晶狀,能溶於水(溶解度1%)和酒精(溶解度8%)。鹼性品紅在生物學製片中用途很廣,可用來染色膠原纖維、彈性纖維、嗜復紅性顆粒和中樞神經組織的核質。在生物學製片中用來染維管束植物的木質化壁,又作為原球藻、輪藻的整體染色。在細菌學製片中,長用來鑒別結核桿菌。在爾根氏回應中用作組織化學試劑,已核查脫氧核糖核酸。
10、 結晶紫(Crystal violet)結晶紫是鹼性染料,能溶於水(溶解度9%)和酒精(溶解度8.75%)。結晶紫在細胞學、組織學和細菌學等方面應用極廣,是一種優良的染色劑。它是細胞核染色常用的,用來顯示染色體的中心體,並可染澱粉、纖維蛋白、神經膠質等。凡是用番紅和蘇木精或其他染料染細胞核不能成功時,用它能得到良好的結果。用番紅和結晶紫作染色體的二重染色,染色體染成紅色,紡錘絲染成紫色,所以也是一種顯示細胞分裂的優良染色劑。用結晶紫染纖毛,效果也很好。用結晶紫染色的切片,缺點是不易長久儲存。
11、龍膽紫 (Gentian violet)龍膽紫是混合的鹼性染料,主要是結晶紫和甲基紫的混合物。在必要是,龍膽紫能跟結晶紫互相替用。醫葯上用的紫葯水,主要成分是甲基紫,需要時能代替龍膽紫和結晶紫
12、 中性紅(Neutral red)中性紅是弱鹼性染料,呈紅色粉末狀,能溶於水(溶解度4%)和酒精(溶解度1.8%)。它的鹼性溶液中呈現黃色,在強鹼性溶液中呈藍色,而在弱酸性溶液中呈紅色,所以能用作指示劑。中性紅無毒,常做活體染色的染料,用來染原生動物和顯示動植物組織中活細胞的內含物等。陳久的中性紅水溶液,用作顯示尼爾體的常用染料。
13、番紅(Safranin)番紅是鹼性染料,能溶於水和酒精。番紅是細胞學和動植物組織學生常用的染料,能染細胞核、染色體和植物蛋白質,示維管束植物木質化、木栓化和角質化的組織,還能染孢子囊。
14、亞甲藍或美藍(Methylene blue)亞甲藍或美藍是鹼性染料,呈藍色粉末狀,能溶於水(溶解度9.5%)和酒精(溶解度6%)。亞甲藍是動物學和細胞學染色上十分重要的細胞核染料,其優點是染色不會過深。
15、甲基綠(methyl green)甲基綠是鹼性染料。它是綠色粉末狀,能溶於水(溶解度8%)和酒精(溶解度3%)。甲基綠是最有價值的細胞和染色劑,細胞學上常用來染染色質,跟酸性品紅一起可作植物木質部的染色
8、瑞氏染色血塗片的步驟
(1)鉛筆作標記,將血塗片平放在染色架copy上,蠟筆劃線可防液體外溢。
(2)血塗片自然乾燥後,滴瑞氏染百液(A液)數滴覆蓋血片,染約1min。
(3)滴加稍多體積的緩沖液度,用吸耳球將其與染液吹勻,染約5分鍾。
(4)慢慢搖動知玻片,然後用細的自來水流從玻片的一側沖去染液(不要先倒去染液再沖水),待血片自道然乾燥後(或用濾紙吸干),即可鏡檢。
9、骨髓片、血塗片主要依據瑞氏染色觀察細胞,為什麼還需要其他化學染色?比如鐵染色、過氧化物酶染色等。
骨髓片、血塗片主要依據瑞氏染色觀察細胞,為什麼還需要其他化學染色?比如鐵染色、過氧化物酶染色
10、如何分析血塗片染色結果偏酸、偏鹼的原因
血塗片一般來使用瑞氏染液進行自染色並觀察,瑞氏染液對PH值的要求非常高,如果PH值偏離允許范圍,那麼就會引起染色結果的巨大偏差,從而給顯微鏡觀察造成比較大的困難。
一般來說,瑞氏染液是通過緩沖液來維持PH值的,其范圍在6.4-6.8,因此主要考慮緩沖液是否有問題,配置用的蒸餾水是否有問題,測一下PH值並做一下調整。