骨髓片觀察的流程與內容

1、骨髓片與血片肉眼觀察有什麼區別?

您好，骨髓圖片是可以看見白色的小粒，是骨髓小粒的，血圖片是沒有的。

2、制備小鼠骨髓染色體標本過程中有哪幾個主要步驟影響製片結果

在制備小鼠骨髓細胞染色體標本過程中以下幾個步驟需要注意：

提前3-4小時候注射秋水仙素，時間太長或者太短都會影響染色體中期的數目和形態。

在低滲過程中時間和吹打都很重要，低滲過度染色體膨脹，染色後肥肥的，低滲時間不過染色後染色體顏色很深看不出條帶。

滴片，如果是教學的實驗,要求玻片是冰的,而且要傾斜，滴的高度一般在25-30CM，滴完要過酒精燈，讓固定液蒸發。滴的數量不要太多否則會重疊.如果是醫院里的染色體製片有專門的滴片機。

小鼠骨髓細胞染色體標本製作：

原理：

由於小鼠四肢骨內骨髓細胞中的造血幹細胞是生成各種血細胞和原始細胞，具有高度的分裂能力，本實驗採用這一材料，通過前處理，低滲，固定，製片，染色等步驟製得染色體標本，可觀察到許多處於分裂中期的染色體，可以進行染色體組型分析；

試劑、試劑盒：秋水仙素、姬姆薩染液、固定液、低滲液、生理鹽水；

儀器、耗材：天平、離心機、恆溫培養箱、顯微鏡；

實驗步驟

一、材料和方法

1.  材料：小白鼠。

2.  設備：天平，離心機，恆溫培養箱，顯微鏡。

3.  葯品：秋水仙素，姬姆薩染液，固定液，低滲液，生理鹽水。

二、步驟

秋水仙素處理--取骨髓--低滲處理--固定--離心--再固定--再離心--滴片--染色--鏡檢--封片。

3、一張良好的骨髓塗片有什麼要求

制血骨髓塗片應結合實際情況，若是再生障礙性貧血，可塗厚些，塗片要求頭、體、尾分明，回髓小體豐答富，脂肪滴可見。骨髓塗片是判斷有核細胞增生程度，骨髓塗片採用鐵染色及不同的組化染色等可為缺鐵性貧血及各類白血病提供診斷依據。低倍鏡下選擇細胞分布均勻部位觀察骨髓片有核細胞增生情況，根據骨髓片中有核細胞的密度或有核細胞與成熟紅細胞的比例來估計有核細胞的增生程度。分類記數100-200個白細胞，計算各類白細胞的百分率，描述紅細胞形態，血小板數量和分布情況。如見到幼紅細胞按分類100個白細胞中幼紅細胞的數量來報告，並說明其階段性有核細胞分類計數；計算粒、紅比值；觀察有無其他特殊細胞及寄生蟲。

4、骨髓塗片鏡檢中低倍鏡檢驗的內容包括哪些

取材、塗片、染色情況

骨髓有核細胞增生程度

巨核細胞計數（分類需要油鏡）

有無特殊細胞

5、骨髓穿刺分為哪幾個步驟

骨髓穿刺術(bone marrow puncture)是採取骨髓液的一種常用診斷技術，其檢查內容包括細胞學、原蟲和細菌學等幾個方面。

一）適應證

1.各種血液病的診斷、鑒別診斷及治療隨訪。

2.不明原因的紅細胞、白細胞、血小板數量增多或減少及形態學異常。

3.不明原因發熱的診斷與鑒別診斷，可作骨髓培養，骨髓塗片找寄生蟲等。

（二）操作方法

1.穿刺部位選擇 ①髂前上棘:常取髂前上棘後上方1～2cm處作為穿刺點，此處骨面較平，容易固定，操作方便安全;②前後上棘:位於骶椎兩側、臀部上方骨性突出部位;③胸骨柄:此處骨髓含量豐富，當上述部位穿刺失敗時，可作胸骨柄穿刺，但此處骨質較薄，其後有心房及大血管，嚴防穿透發生危險，較少選用;④腰椎棘突:位於腰椎棘突突出處，極少選用。

2.體位 胸骨及髂前上棘穿刺時取仰卧位。髂後上棘穿刺時應取側卧位。腰椎棘突穿刺時取坐位或側卧位。

3.常規消毒皮膚，戴無菌手套、鋪消毒洞巾，用2%利多卡因作局部浸潤麻醉直至骨膜。

4.將骨髓穿刺針固定器固定在適當長度上（髂骨穿刺約1.5cm，肥胖者可適當放長，胸骨柄穿刺約1.0cm），以左手拇、示指固定穿刺部位皮膚，右手持針於骨面垂直刺入（若為胸骨柄穿刺，穿刺針與骨面成30～40°角斜行刺入），當穿刺針接觸到骨質後則左右旋轉，緩緩鑽刺骨質，當感到阻力消失，且穿刺針已固定在骨內時，表示已進入骨髓腔。

5.用乾燥的20ml注射器，將內栓退出1cm，拔出針芯，接上注射器，用適當力度緩慢抽吸，可見少量紅色骨髓液進入注射器內，骨髓液抽吸量以0.1～0.2ml為宜，取下注射器，將骨髓液推於玻片上，由助手迅速製作塗片5～6張，送檢細胞形態學及細胞化學染色檢查。

6.如需作骨髓培養，再接上注射器，抽吸骨髓液2～3ml注入培養液內。

7.如未能抽得骨髓液，可能是針腔被皮膚、皮下組織或骨片填塞，也可能是進針太深或太淺，針尖未在髓腔內，此時應重新插上針芯，稍加旋轉或再鑽入少許或再退出少許，拔出針芯，如見針芯上帶有血跡，再行抽吸可望獲得骨髓液。

8.抽吸完畢，插入針芯，輕微轉動拔出穿刺針，隨將消毒紗布蓋在針孔上，稍加按壓，用膠布加壓固定。

（三）注意事項

1.穿刺針進入骨質後避免擺動過大，以免折斷。

2.胸骨柄穿刺不可垂直進針，不可用力過猛，以防穿透內側骨板。

3.抽吸骨髓液時，逐漸加大負壓，作細胞形態學檢查時，抽吸量不宜過多，否則使骨髓液稀釋，但也不宜過少。

4.骨髓液抽取後應立即塗片。

5.多次干抽時應進行骨髓活檢。

（四）禁忌證

血友病患者禁作骨髓穿刺。

6、骨髓細胞有絲分裂裝片觀察時看到的是死細胞嗎？

觀察細胞有絲分裂製片的時侯有四個步驟，固定、漂洗、染色、觀察，固定過程已將細胞殺死，這樣染色時細胞膜已經失去選擇透過性，染色體著色利觀察。

7、骨髓檢查的配圖

（一）骨髓塗片檢查
⒈低倍鏡檢查
⑴ 判斷標本是否滿意 滿意的骨髓塗片應薄厚適宜，細胞分布均勻、有核細胞著色清晰。
⑵ 判斷骨髓增生程度 通常藉助骨髓塗片中成熟紅細胞與有核細胞之比來判斷骨髓增生情況，並將其分為五級，見下表。
骨髓增生程度的分級。
骨髓增生程度，成熟紅細胞與有核細胞之比，常見原因。
增生極度活躍 1:1 白血病、紅白血病等。
增生明顯活躍 10:1 白血病、增生性貧血。
增生活躍 20:1 正常骨髓或某些貧血。
增生減低 50:1 造血功能低下。
增生嚴重減低 300:1 典型的再生障礙性貧血。
⑶ 估計巨核細胞系增生情況 於低倍鏡下逐一視野瀏覽計數全部片膜內的巨核細胞數。
⑷ 注意塗片上、下兩緣及片尾處有無體積較大或成堆出現的特殊細胞，如Gaucher細胞、Niemann-Pick細胞及轉移癌細胞等。
⒉油浸鏡檢查 選有核細胞豐富、分布均勻處，油鏡下分類計數至少2 00個有核細胞，同時注意有無質的變化。
⑴ 計算粒系細胞總百分率及各階段細胞所佔百分率，並描述其細胞形態。
⑵ 計算紅系細胞總百分率及各階段細胞所佔百分率，並描述其細胞形態。
⑶ 計算粒、紅比值 粒細胞系各階段細胞總和與紅系各階段細胞總和之比。
⑷ 分別計算淋巴細胞、單核細胞、漿細胞等的百分率。
⑸ 寫出全片所見巨核細胞數。
⑹ 有無寄生蟲及特殊細胞。
⑺ 描述成熟紅細胞形態學。
（二）血塗片觀察
⒈低倍鏡觀察塗血染色是否滿意。
⒉油鏡下分類計數至少100個白細胞，分別報告各類白細胞所佔百分率，描述其形態染色情況及注意有無幼稚細胞出現。
⒊如外周血塗片出現幼紅細胞則按分類100個白細胞過程中見到多少個來報告，並註明其屬於何階段。
⒋描述成熟紅細胞大小、形態、染色情況。
⒌估計血小板數量並描述其形態大小和分布情況.
⒍注意有無寄生蟲。
（三） 正常骨髓象
由於正常骨髓內各細胞系及其各階段百分率范圍較大，因此凡分類符合下列情況者均可視為正常骨髓象。
⒈骨髓增生活躍。
⒉粒細胞系約佔有核細胞的40%～60%，其中原粒細胞<2%，早幼粒細胞 <5%、中、晚幼粒細胞各<15%，桿狀核粒細胞多於分葉核細胞，嗜酸粒細胞一般<5%，嗜鹼粒細胞<1%，細胞大小、形態、染色基本正常。
⒊幼紅細胞總百分率約佔有核細胞的20%左右，其中原紅細胞<1%，早幼紅細胞<5%，中、晚助紅細胞約各佔10%，細胞形態、染色基本正常。
⒋粒、紅比值 正常約為2～4:1。
⒌淋巴細胞百分率約為20%（小兒可達40%），均為成熟淋巴細胞。
⒍單核細胞一般<4%，漿細胞<3%，均為成熟階段者。
⒎巨核細胞系通常於1.5×3cm2骨髓片膜上可見巨核細胞7～35個，多為成熟型。
⒏可見少量網狀細胞、內皮細胞、組織嗜鹼細胞等。雖然它們各佔百分率很低，但卻均為骨髓成分的標志.
⒐核分裂細胞不易見到，僅約為1‰。
⒑成熟紅細胞大小、形態、染色大致正常。
（四） 填寫報告單及提出診斷意見 根據檢驗結果，按要求逐項詳細填寫並加以描述，綜合骨髓象、血象所見結合臨床資料提出具體意見供臨床參考。
⒈作出肯定性診斷 如骨髓、血象細胞學特徵和臨床表現均典型即可作出肯定性診斷.如各型白血病、巨幼細胞性貧血、多發性骨髓瘤、惡性組織細胞病、骨髓轉移瘤等。
⒉作出支持性診斷 如骨髓、血象改變可以解釋臨床表現時即可提出支持性意見.如支持缺鐵性貧血、再生障礙性貧血、粒細胞缺乏症等診斷。
⒊作出排除性診斷 如骨髓、血象所見與臨床診斷不符時可提出否定性意見以排除某些診斷。
⒋骨髓、血象確有某些改變，但對臨床表現提不出支持或否定性意見時，可描述其特點、並盡可能地提出進一步檢查的建議供臨床參考，必要時迫蹤觀察。
骨髓、血象報告單一式兩份，其中一份發給臨床，另一份隨同骨髓檢查申請單及檢驗標本一並存檔妥善保存以供復查、總結、研究及教學使用。