1、如何從小鼠骨髓中分離和培養DC
拉頸處死小鼠，無菌剝離股骨和脛骨，用Hank』S沖出骨髓細胞，PBS洗
滌1次，用0．83％Tris—NH4CL裂解紅細胞，RPMI1640培養液洗滌2次，調整細胞濃度為1×106個／mL，
並加入rmGM—CSF(1000 U／mL)和rmlL－4(500 U／mL)，接種於24孔培養板，置於37~C，5％CO2孵箱中
培養．第3天輕輕搖動培養板，吸走大部分懸浮細胞，加人等量的培養液，並補足細胞因子．隔日半量換液
1次，第7天收集懸浮或稍微貼壁的細胞．
2、如何提取小鼠骨髓細胞?
1、頸椎脫臼法處死小鼠(C57型小鼠)，放在75%酒精中侵泡3-5分鍾後，拎出後將小鼠鋪於超凈台上一個消毒托盤上。
2、無菌提取小鼠的四肢骨，用眼科鑷小心捏起小鼠兩髖關節之間的腹部皮膚，用眼科剪小心剪開皮膚，並分離兩下肢的皮膚，往下在腳踝處剪斷，往上在髖關節處剪斷，這樣可以游離出小鼠的兩條下肢。
3、小心剝離肌肉，分別剪下Femurs（大腿骨）and Tibias（脛骨）,剪去兩端軟骨，露出紅色的骨髓腔。注意盡可能少的剪走骨髓腔。用紗布將骨頭上的肌肉用紗布擦拭乾凈。
4、拿一支1ml的無菌注射器，每支吸取1mlHBSS液，並用無菌的針頭套管將之輕輕擰彎。輕輕插入骨髓腔，沖洗骨髓腔以獲得骨髓，一般用2-3ml培養基沖洗兩次，可沖出絕大部分細胞。
5、過濾：用2OO目的濾網過濾，將濾網的中央插入到離心管裡面25px處，然後用注射器吸取骨髓液，慢慢將骨髓液經濾網注入離心管中，去除殘渣。
6、離心：將離心管放置離心機中離心10分鍾（1350r/min）
7、去上清，加入1ml紅細胞裂解液ACK，靜置3分鍾，再加9ml HBSS溶液，進行離心10分鍾，棄上清。
8、用HBSS液洗滌骨髓細胞2次，室溫，1350r/min離心10分鍾。計數活細胞，用培養基調整細胞濃度至1X106個細胞/ml.
9、在試管中加入RPMI-1640培養基，然後再加入20ng/ml的細胞因子GM-CSF、5%FBS、0.1%的2-巰基乙醇，
10、吸取培養基加入到沉澱中混勻，24孔板鋪板培養，每個孔1ml.
3、跪謝先，我要收集骨髓液，分離單核細胞提取DNA和RNA。應該怎樣保存骨髓液呢
一般生物樣品都是放在-80冰箱保存，不過如果是蛋白的話，-80冰箱保存兩個月也會降解！RNA時間久更短了。
融化時，打一盒冰 ，樣品放在冰上溶解。
運輸條件一般有兩種，一種是放冰袋到泡沫盒中，另一種就是放乾冰到泡沫盒中，
4、如何取小鼠骨髓細胞
1、頸椎脫臼法處死小鼠(C57型小鼠)，放在75%酒精中侵泡3-5分鍾後，拎出後將小鼠鋪於超凈台上一個消毒托盤上。
2、無菌提取小鼠的四肢骨，用眼科鑷小心捏起小鼠兩髖關節之間的腹部皮膚，用眼科剪小心剪開皮膚，並分離兩下肢的皮膚，往下在腳踝處剪斷，往上在髖關節處剪斷，這樣可以游離出小鼠的兩條下肢。
3、小心剝離肌肉，分別剪下Femurs（大腿骨）and Tibias（脛骨）,剪去兩端軟骨，露出紅色的骨髓腔。注意盡可能少的剪走骨髓腔。用紗布將骨頭上的肌肉用紗布擦拭乾凈。
4、拿一支1ml的無菌注射器，每支吸取1mlHBSS液，並用無菌的針頭套管將之輕輕擰彎。輕輕插入骨髓腔，沖洗骨髓腔以獲得骨髓，一般用2-3ml培養基沖洗兩次，可沖出絕大部分細胞。
5、過濾：用2OO目的濾網過濾，將濾網的中央插入到離心管裡面25px處，然後用注射器吸取骨髓液，慢慢將骨髓液經濾網注入離心管中，去除殘渣。
6、離心：將離心管放置離心機中離心10分鍾（1350r/min）
7、去上清，加入1ml紅細胞裂解液ACK，靜置3分鍾，再加9ml HBSS溶液，進行離心10分鍾，棄上清。
8、用HBSS液洗滌骨髓細胞2次，室溫，1350r/min離心10分鍾。計數活細胞，用培養基調整細胞濃度至1X106個細胞/ml.
9、在試管中加入RPMI-1640培養基，然後再加入20ng/ml的細胞因子GM-CSF、5%FBS、0.1%的2-巰基乙醇，
10、吸取培養基加入到沉澱中混勻，24孔板鋪板培養，每個孔1ml.
5、單克隆抗體中的骨髓瘤細胞從哪裡提取?是不是在提取小鼠的免疫細胞的胰臟中？
不是提取小鼠胰臟中免疫細胞。是從骨髓中提取癌變的細胞，這類細胞具有永生性，骨髓瘤細胞在體外培養條件下無限增殖，但不能產生抗體。B淋巴細胞能產生抗體，不能在體外增殖。二者融合以後就能無限增殖又能產生抗體。
6、骨髓如何儲存？
現在國家有這種項目 叫做臍帶血庫 省級單位有。 國家批准了14家。
零下86度冷凍保存
一般是取婦女生產時她的臍帶血 備給她的小孩用
大人的脊髓牽扯到配型等問題 一般都不保存
7、做小鼠骨髓移植照光有什麼要注意的
balb/c小鼠照8個Gy應該沒有問題的，致死劑量是8.5
注意事項
1、小鼠是幾周的，受體鼠最好是8周齡以上的
2、雄的比較容易活下來
3、骨髓單個核輸注每隻尾靜脈1－2X10的7次方，你細胞是不是輸得太少了
4、另外照完得老鼠要按裸鼠那樣飼養，就是在SPF動物房養，用消過毒的籠子，食水都要消毒的
5、食用的水要用酸化水，PH值3－4的
6、如果小鼠照射完看著狀態不好，可以腹腔給一點沒有血清得培養基，如1640
7，想知道小鼠是不是造血衰竭死亡，你最好把剛剛死亡得小鼠骨髓切片，HE染色看一下，以前我碰見過小鼠別得細胞都恢復了，就是巨核恢復得慢，小鼠出血死掉。
8、當然放射源得數字不準，你可以摸一下照射得劑量梯度，如果照射的空白組死亡，而打同基因骨髓細胞的小鼠還活著，就是最佳的照射劑量了，
8、如何從小鼠骨髓細胞中提取DNA
拿到小鼠骨髓細胞樣品，提取DNA，這樣就得到 小鼠骨髓細胞DNA了。