兔的骨髓間充質幹細胞培養

1、骨髓間充質幹細胞與什麼細胞可以共培養

髓核細胞與骨髓間充質幹細胞共培養，影響髓核細胞的活知性，經共培養的髓核細胞增殖速度、蛋白多糖合成量較對照組提高明顯，髓核細胞活性上調道。　

睾丸支持內細胞與骨髓間充質干容細胞在體外共培養的早期，睾丸支持細胞可以顯著促進間充質幹細胞的生長，但在後期則反而抑制間充質幹細胞的生長。

2、骨髓基質細胞和骨髓間充質幹細胞的區別

骨髓基質細胞是存在於骨髓中的一類多能幹細胞，具有分化成骨細胞、軟骨細胞、脂肪細胞和其他幾種結締組織細胞（如腱細胞）。亦可轉分化成心肌細胞和骨骼肌細胞。骨髓間充質幹細胞現已被歸為結締組織成體幹細胞。事實上，骨髓基質細胞中的間充質幹細胞數量是很少的，約占細胞總數的10萬分之一，其定向分化也不均一，現在越來越多的研究揭示骨髓間充質幹細胞及其初步分化的祖細胞或稱前體細胞(precusor, progenitor cells)具有一些特殊的表面蛋白特徵；此外，幹細胞具有多向分化及自我更新能力，其細胞復制分裂方式是不對稱分裂，這明顯不同於普通的細胞。通過貼壁法或Percoll等細胞分離介質只能獲得混合的骨髓基質細胞，只有應用免疫磁珠、流式細胞儀等將其進一步分離純化後，才能稱為骨髓間質幹細胞。（河南省幹細胞庫）

3、培養骨髓間充質幹細胞必須用塑料培養皿嗎

總結下各種孔板細胞接種量 僅供參考 細胞培養瓶（板）生長面積容量與細胞數（大約） 96孔板 4~5X10 4 35mm培養皿 1X10 6 48 孔板 1.3X10 5 60mm培養皿 2.6X10 6 24孔板 2.5X10 5 100mm培養皿 7X10 6 12孔板 5X10 5 150mm培養皿 1.8X10 7 6孔板 1.2X10 6 細胞瓶面積 容量 工作體積 細胞數目 612.5cm2 25ml 2ml 5X10 5 25cm2 50ml 5ml 1X10 68 35cm2 75ml 10ml 2X10 6 75 cm2 250ml 15ml X10 6 150cm2 700ml 40ml 1.1X10 7 補充：不同孔板所加培養液的液面都不宜太深，一般在2~3mm范圍，結合不同孔的底面積就可算出各培養孔的適宜加液量（參考下表）。若加液量過多會影響氣體（氧氣）交換，而且在搬動過程中易溢出造成污染。具體所加細胞密度依實驗的目的不同靈活掌握。

4、骨髓間充質幹細胞培養過程中，細胞局部過密會不會接觸抑制？

大多數細胞在密度較高時會影響細胞狀態，建議將細胞消化後重新接種

5、骨髓間充質幹細胞分離的方法有幾種

目前常用的分離MSC的方法主要有全骨髓法和密度梯度離心法，全骨髓法即根據幹細胞在低血清培養基中有貼壁優勢特性，定期換液除去不貼壁細胞，從而達到純化及擴增MSC的目的。密度梯度離心法即根據骨髓中各細胞成分比重的不同，分離單核細胞進行貼壁培養。二者本質上無多大區別。隨著對MSC表面抗原認識的深入，又有人利用免疫方法如流式細胞儀法、免疫磁珠法等對其進行分離純化。但經過流式或磁珠分選後的細胞出現了增殖緩慢等一些問題，加之成本較高和技術的難度，在某種程度上限制了這些方法的廣泛應用。