1、制備小鼠骨髓染色體標本過程中有哪幾個主要步驟影響製片結果
在制備小鼠骨髓細胞染色體標本過程中以下幾個步驟需要注意:
提前3-4小時候注射秋水仙素,時間太長或者太短都會影響染色體中期的數目和形態。
在低滲過程中時間和吹打都很重要,低滲過度染色體膨脹,染色後肥肥的,低滲時間不過染色後染色體顏色很深看不出條帶。
滴片,如果是教學的實驗,要求玻片是冰的,而且要傾斜,滴的高度一般在25-30CM,滴完要過酒精燈,讓固定液蒸發。滴的數量不要太多否則會重疊.如果是醫院里的染色體製片有專門的滴片機。
小鼠骨髓細胞染色體標本製作:
原理:
由於小鼠四肢骨內骨髓細胞中的造血幹細胞是生成各種血細胞和原始細胞,具有高度的分裂能力,本實驗採用這一材料,通過前處理,低滲,固定,製片,染色等步驟製得染色體標本,可觀察到許多處於分裂中期的染色體,可以進行染色體組型分析;
試劑、試劑盒:秋水仙素、姬姆薩染液、固定液、低滲液、生理鹽水;
儀器、耗材:天平、離心機、恆溫培養箱、顯微鏡;
實驗步驟
一、材料和方法
1. 材料:小白鼠。
2. 設備:天平,離心機,恆溫培養箱,顯微鏡。
3. 葯品:秋水仙素,姬姆薩染液,固定液,低滲液,生理鹽水。
二、步驟
秋水仙素處理--取骨髓--低滲處理--固定--離心--再固定--再離心--滴片--染色--鏡檢--封片。
2、小白鼠骨髓細胞染色體為什麼和人類的染色體不一樣,為
主要是因為小白鼠骨髓細胞染色體都為近端著絲粒染色體!在顯微鏡的觀察下呈現U型或者V型!人類的染色體比較多樣,分為三種:①中央著絲粒染色體,著絲粒位於染色體縱軸的1/2~5/8處;②亞中著絲粒染色體著絲粒位於染色體縱軸的5/8~7/8處;③近端著絲粒染色體,著絲粒位於染色體縱軸的7/8至末端.這種U型的染色體人類也是有的!
3、小鼠骨髓細胞可以直接用於染色體的製作的原因
骨髓細胞有絲分裂旺盛,所以不需要體外培養就可以直接做實驗。外周血淋巴細胞幾乎都是處在G0或者G1期,一般情況下是不分裂的。在培養基中加入植物凝集素時,淋巴細胞受到刺激時轉化為淋巴母細胞,並開始進行有絲分裂。
4、小白鼠骨髓細胞染色體為什麼和人類的染色體不一樣,為什麼成U型
主要是因為小白鼠骨髓細胞染色體都為近端著絲粒染色體!在顯微鏡的觀察下呈現U型或者V型!人類的染色體比較多樣,分為三種:中央著絲粒染色體,著絲粒位於染色體縱軸的1/2~5/8處;②亞中著絲粒染色體著絲粒位於染色體縱軸的5/8~7/8處;③近端著絲粒染色體,著絲粒位於染色體縱軸的7/8至末端。這種U型的染色體人類也是有的!
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5、小鼠骨髓細胞觀察有絲分裂
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6、小鼠骨髓細胞染色體標本制備和觀察實驗報告
首先要提前2小時向小鼠注射秋水仙素,處死小鼠,剪下四肢,剔除肉等,剪碎骨,加生理鹽水,離心取細胞(離心管底部),再經低滲處理,染色,滴冰片,鏡檢。很麻煩,具體的你可以去圖書館查閱相關資料(動物染色體制備)。
7、小白鼠骨髓細胞的染色體是端著絲粒染色體還是近端著絲粒染色體呢?
端著絲粒染色體。但是其他的。。。。。。這個實在不好說,因為很多動物的細胞里會同時存在多種染色體,所以一般不會這么問。