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阻礙骨髓瘤細胞合成途徑用到的HAT

發布時間:2021-05-13 04:26:51

1、單克隆抗體制備過程中所用的骨髓瘤細胞是一種基因缺陷型細胞,在含有此黃嘌呤、氨基酸

選C。
A:有題目可知骨髓瘤細胞之間形成的融合細胞依然基因缺陷,不能生長
B:脾細胞之間形成的融合細胞是不可增殖細胞,題目說「經過數代培養」,所以此時這些細胞早已凋亡,即使有也是很少的,可以忽略不計。
C:正確,他不僅可以增殖而且可以在此培養基生長
D:同B
謝謝,希望可以幫到你

2、HAT選擇培養基的作用是篩選出什麼(在單克隆抗體制備過程中)。

HAT選擇培養基的作用是篩選出(雜交瘤細胞)。
HAT選擇培養基含有次黃嘌呤、氨基喋呤和胸腺嘧啶,其中氨基喋呤可阻斷DNA合成的主要途徑。主要途徑阻斷後,依靠應急途徑即在HGPRT(次黃嘌呤鳥嘌呤磷酸核糖轉移酶)和TK(胸苷激酶)作用下,利用胸腺嘧啶和次黃嘌呤合成DNA,缺少其中一種,DNA合成不能發生。用於雜交的骨髓瘤細胞系均由經有毒葯物誘導而成選擇產生的代謝缺陷型細胞,細胞內均無TK或HGPRT,所以單個或融合骨髓瘤細胞在HAT培養液中將死亡。B細胞雖然有HGPRT和TK,但在體外通常培養條件下,尤其是在單個細胞環境下難於長期存活和增殖傳代。因此只有雜交瘤細胞才能在HAT培養液中生長繁殖

3、正常細胞合成DNA有兩條途徑:a通路(主通路)和b通路(旁路).用於進行單克隆抗體制備的骨髓瘤細胞是DNA

①細胞融合方法有物理法、聚乙二醇的化學法、生物法,而該培養對細胞融合沒有影響,故①錯誤;
②B淋巴細胞在體外不能增殖,不能再培養基上生存下來,故②正確;
③骨髓瘤細胞是b通路缺陷型,剩下的a通路被阻斷也被抑制,不能合成DNA,故③正確;
④只有雜交瘤細胞具有a通路,能進行DNA的復制,且能無限增殖,能在培養基上生存下來,故④正確;
⑤骨髓瘤細胞相互融合的細胞也是b通路缺陷型,剩下的a通路被阻斷也被抑制,不能合成DNA,故⑤正確;
⑥B淋巴細胞和B淋巴細胞相互融合的細胞本身就不能增殖,會被淘汰,故⑥正確.
故選B.

4、為什麼可以利用HAT培養基篩選出雜交瘤細胞

在HAT培養基中含有次黃嘌呤(H)、氨基蝶呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)。
由於選用西黃嘌呤鳥嘌呤磷酸核糖轉移酶缺陷型(HPRT-)骨髓瘤細胞或胸腺嘧啶核苷激酶缺陷(TK-)骨髓瘤細胞為親本,該細胞只能通過全合成途徑合成DNA。因為淋巴細胞具有合成DNA的兩條途徑,因此雜種細胞通過互補作用獲得HRPT或TK基因,可應用培養基中次黃嘌呤及腺嘧啶核苷,通過不就合成途徑合成DNA。
在HAT培養基中,HPRT-或TK-親本骨髓瘤細胞死亡,B淋巴細胞在一般培養基中不能長期生長,一般於二周內均死亡,只有雜種細胞存活。

5、單克隆抗體制備過程中所用的骨髓瘤細胞是一種基因缺陷型細胞,其合成核酸的途徑能被氨基喋呤阻斷.現將從

A、篩選出雜交瘤細胞不止一種,能分裂繁殖,產生抗體,則專一性抗體檢驗呈陰性;故A正確.
B、篩選出一種雜交瘤細胞,能分裂繁殖,產生抗體,專一性抗體檢驗呈陽性;故B正確.
C、沒有活細胞,一定產生抗體;故C錯誤.
D、細胞全部死亡,不能產生抗體;故D正確.
故選C.

6、效應T細胞與骨髓瘤細胞合成單克隆抗體么?

一種效應b細胞只能分泌一種一種抗體,所以可以用效應B細胞與骨髓瘤細胞融合成雜交瘤細胞,選擇可以產生抗體的雜交瘤細胞就可以製造單克隆抗體。
製造生物導彈是用抗體將葯物帶到病變部位,通常用磷酯分子包裹。如果用效應t細胞有一下幾個問題
效應t細胞高度分化,不分裂,不易獲得大量效應t細胞
不同的人的效應t細胞不同,如果亂用會造成排斥反應。

7、篩選雜交瘤細胞的50xhat怎麼配製

1.在HAT培養基[屬於選擇性培養基,含有次黃嘌呤(H)、氨基喋呤(A)和胸腺嘧啶核苷(T)]中進行選擇性培養,未融合的脾細胞因不能在體外長期存活而死亡;未融合的骨髓瘤細胞合成DNA的主要途徑被培養基中的氨基蝶呤阻斷,又因缺乏次黃嘌呤-鳥嘌呤-磷酸核糖轉移酶(HGPRT),不能利用培養基中的次黃嘌呤完成DNA的合成過程而死亡。只有融合的雜交瘤細胞由於從脾細胞獲得了次黃嘌呤-鳥嘌呤-磷酸核糖轉移酶,因此能在HAT培養基中存活和增殖。經過克隆選擇,可篩選出能產生特異性單克隆抗體的雜交瘤細胞,在體內或體外培養,即可無限制地大量制備單克隆抗體。
2.僅僅就「兩個細胞的融合」而言有三種,有「瘤-瘤」型融合細胞、「瘤-B」型融合細胞、「B-B」型融合細胞。(實際上,還有未融合細胞、三細胞融合....等)

8、細胞融合問題請問兩種細胞融合後,在篩選融合細胞是怎

選擇性篩選的參照標準是自己定的,可以由融合前細胞的特性出發,找出其中之一的代謝特點.
比如在篩選雜交瘤細胞時,B細胞是可以進行細胞外途徑的DNA合成的,但是壽命很短.而骨髓瘤細胞是沒有細胞外源合成DNA這一途徑的.所以我們提供的培養基可以是阻斷細胞內源合成DNA途徑的選擇培養基,這樣,單一的瘤細胞會合成不了DNA而死亡,單一的B細胞在一段時間後,也死亡.剩下的只有需要的雜交瘤細胞了.這是經典的HAT選擇培養基的原理.缺失基因的細胞,是不能正常代謝的,一般是會死亡的,但在某些特殊實驗中,人工培養一些缺陷型細胞,以便於標記特徵,便於篩選也是可以的.找出的代謝特點還可以包括,溫度差異,PH差異等,很靈活,也很困難.

9、SP2/0細胞特性,為什麼不能在HAT培養基中生長?

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