骨髓塗片實驗

1、求塗片免疫組化的具體步驟

112 方法: 抽取013ml 骨髓用塗有蛋
白甘油的硅化玻片塗片5～7 張, 同時
用EDTA 抗凝的試管抽取2ml 靜脈血行
流式細胞(FCM) 檢查。
113 免疫組化試劑來源: 來自福州邁
新公司即用型第二代免疫組化Elivision
TMplus 廣譜試劑盒。
114 免疫組化步驟: ①石蠟塗片脫蠟
和水化後, 用PBS (PH714) 沖洗3 次,
每次3min。②根據每一種抗體的要求,
對組織抗原進行相應的修復。③每張塗
片加50ul3 %過氧化氫溶液, 室溫下孵
育10min , 以阻斷內源性過氧化物酶的
活性。PBS 沖洗3 次, 每次3min。④每
張塗片根椐需要加50ul 的第一抗體
( 如CD20 , CD3 , CD45RO , CD45RB ,
TdT, MPO , CD5 , CD79 , CD56 , CD79a ,
CD43 , CD5 , CD10 ) , 室溫下孵育
60min。⑤除去PBS 液, 每張塗片加
50ul 聚合物( Polymer Enhancer) , 室溫
下孵育20min , PBS 沖洗3 次, 每次
3min。⑥除去PBS 液, 每張塗片加50ul
酶標抗鼠/ 兔聚合物(Polymerized HRP -
Anti Ms/ Rb IgG) , 室溫下孵育30min。
PBS 沖洗3 次, 每次3min。⑦除去PBS
液, 每張塗片加50ul 新鮮配製的DAB
或AEC 溶液, 顯微鏡下觀察3～10min。
⑧自來水沖洗, 蘇木紫復染, 011 %鹽
酸分化, 自來水沖洗, PBS 返藍。⑨塗
片經過梯度酒精脫水乾燥, 用DAE 顯
色, 中性樹膠封固。

2、骨髓穿刺 骨髓活檢 骨髓細胞學檢查 骨髓塗片這幾個有什麼區別？

您好：骨髓穿刺是診斷血液科常用的一種診斷方法，骨髓活檢是骨髓穿刺後送檢的病理檢查，可以進一步明確疾病類型。骨髓細胞學檢查就是骨髓活檢，骨髓塗片是穿刺後做檢查之前做的塗片，是一種標本。

3、骨髓塗片鏡檢中低倍鏡檢驗的內容包括哪些

取材、塗片、染色情況

骨髓有核細胞增生程度

巨核細胞計數（分類需要油鏡）

有無特殊細胞

4、骨髓塗片是什麼意思

成年人的造血細胞起源在骨髓裡面，通過檢查骨髓裡面的原始及幼稚細胞，可以判斷是否出現了血液系統的疾病（紊亂，停滯，障礙等等）。

成人的含有骨髓的骨骼（有的骨骼帶腔隙，有的幾乎不帶），一般選擇髂骨 和胸骨柄 的部分 穿刺，此部位骨髓含量豐富，易於穿刺採集。

穿刺採集的骨髓通過一定的技術均勻的塗布在玻片上，製成骨髓塗片，染色後，觀察結果。

5、一張良好的骨髓塗片有什麼要求

制血骨髓塗片應結合實際情況，若是再生障礙性貧血，可塗厚些，塗片要求頭、體、尾分明，回髓小體豐答富，脂肪滴可見。骨髓塗片是判斷有核細胞增生程度，骨髓塗片採用鐵染色及不同的組化染色等可為缺鐵性貧血及各類白血病提供診斷依據。低倍鏡下選擇細胞分布均勻部位觀察骨髓片有核細胞增生情況，根據骨髓片中有核細胞的密度或有核細胞與成熟紅細胞的比例來估計有核細胞的增生程度。分類記數100-200個白細胞，計算各類白細胞的百分率，描述紅細胞形態，血小板數量和分布情況。如見到幼紅細胞按分類100個白細胞中幼紅細胞的數量來報告，並說明其階段性有核細胞分類計數；計算粒、紅比值；觀察有無其他特殊細胞及寄生蟲。

6、骨髓檢查是怎麼做的

首先告訴你，有點痛，在局部麻醉作用下能忍受，沉的感覺高於痛的感覺。骨髓穿刺術 的
1，目的
觀察骨髓內細胞形態及分類，以協助診斷血液系統疾病；敗血症或某些傳染病需骨髓細菌培養及塗片檢查某些寄生蟲病；惡性腫瘤疑骨髓轉移；用於骨髓移植等。
2．適應證
2．1 各類血液病的診斷。
2．2 敗血症，某些傳染病或寄生蟲病需行骨髓細菌培養或塗片尋找瘧原蟲及黑熱病原蟲者。
2.3 網狀內皮系統疾病的診斷。
2．4 惡性腫瘤疑骨髓轉移者。
3．禁忌證
血友病及穿刺部位有感染及皮膚病時不宜做穿刺。
4．用物
清潔盤，骨髓穿刺包，2％碘酒和75％酒精，5ml和20ml滅菌注射器，無菌手套，2％普魯卡因，清潔乾燥玻片，推片，如做骨髓培養，另需20ml滅菌注射器、含培養基的細菌培養瓶，酒精燈，火柴。
5. 病人准備
5．1 患者需洗澡，更換清潔衣服。
5．2 向患者做好解釋工作，以取得配合。
5．3 使患者樹立信心，消除其恐懼、緊張心理。
6．方法
6．1 髂前上棘穿刺術
6．1．1 患者仰卧，取髂前上棘向後1～1．5cm的一段較寬鎔緣為穿刺點，局部常規消毒後鋪洞巾，局部麻醉應達骨膜。
6．1．2 術者左手拇指及食指分別在髂前上棘內外因定皮膚，右手持穿刺針垂直刺入達骨膜後再進1cm即達骨髓腔。
6．1．3 刺人骨髓腔時有落空感，當即抽出針芯，接上20ml無菌乾燥注射器，抽取骨髓約0．2ml左右作塗片檢查；如作培養，取3～5ml骨髓。
6.1．4 術畢即插回針芯，拔出針頭，局部敷以無菌紗布，用膠布固定。
6．2 鎔後上棘穿刺術
6．2．1 患者側卧或俯卧，髂後上棘一般均突出於臀部之上，能骨的兩側；或取骸骨上緣下6～8cm與脊柱旁開2～4cm之交點為穿刺點。
6．2．2 穿刺針的方向幾乎與背部垂直，稍向外側傾斜。
6．3 胸骨柄穿刺術
6．3．1 患者仰卧治療台上，肩背部墊枕使頭盡量後仰，並轉向左側，以充分暴露胸骨上切跡。
6．3．2 術者立於患者頭側，先用左手揭指摸清胸骨上切跡，並緊貼胸骨柄上緣將皮膚向下壓緊，右手持針由切跡中央沿胸骨柄水平方向進針，慢慢旋轉刺入，達胸骨柄上緣骨板之正中深度約0．5～1.0cm。
6．4 脊椎棘突穿刺術
6．4．1 患者側卧或反向坐於椅子上，兩臂置於椅背，頭枕臂上。
6．4．2 以上部腰椎棘突為穿刺點，左手拇指及食指在預定穿刺的棘突上下固定皮膚，右手持針由棘突之側方或中央垂直刺入。
6．5 脛骨穿刺術(僅適用2歲以內的患兒)
6．5．1 患兒仰卧治療台上，由助手固定下肢，選脛骨結節平面下約1cm(或腸骨上中l／3交界處)之前內側面腸骨為穿刺點。
6．5．2 左手拇指及食指固定皮膚，右手持針，在骨面正中部與之成垂直方向刺入。
7．注意事項
7．1 術前應向患者說明檢查目的與方法，以取得配合。
7．2 嚴格無菌操作，以防感染。
7．3 物品准備齊全。
7．4 穿刺針經皮膚達骨膜後，針應與骨面垂直，緩慢旋轉進針，持針須穩妥，切忌用力過猛或針頭在骨面上滑動。如已刺入骨髓腔，此時針頭應固定不動。
7．5 抽取骨髓塗片檢查時，應緩慢增加負壓，當注射器內見血後應立即停止抽吸，以免骨髓稀釋。同時要作塗片及培養者，應先抽骨髓少許塗片，再抽骨髓培養，不可並做一次抽出。取下注射器時，應迅速插回針芯，以防骨髓外溢。
7．6 胸骨柄穿刺時，要求穿刺角度一定要與胸骨柄平行，以防止針尖滑脫或刺穿胸骨柄後壁皮質。
8．護理
8．1 術中注意觀察患者的面色、脈搏、呼吸。
8．2 拔針時用力按壓穿刺點，至不出血為止。
8．3 術後24小時內觀察穿刺部位有無血腫、出血及感染徵象。
8．4 穿刺處換葯1次／日。
8．5 囑患者三日內勿洗浴。

7、骨髓細胞塗片和骨髓活檢

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8、骨髓象是靠骨髓穿刺得到塗片做的，還是根據骨髓活檢？也就是說骨髓活檢的結果算骨髓象嗎？

骨髓象是通過骨髓穿刺液制備塗片進行顯微鏡觀察。骨髓活檢是骨髓組織病理學檢驗的一部分，抽取骨髓組織制備切片，再行觀察。骨髓活檢的結果跟骨髓象相比，適用於原發性或繼發性骨髓纖維化，某些白血病以及淋巴瘤病人，優點是取材多，保持骨髓結構，顯示骨髓細胞之間及組織之間的相互關系，造血細胞密度及百分比，造血組織的分布等，使醫生能全面了解骨髓病理學改變。骨髓活檢的結果成為骨髓象不是特別准確，但是醫生通常用「象」來代表分布形態，比如血象，也不用太計較這個叫法。