1、如何促進小鼠骨髓中的中性粒細胞移動到外周
小鼠骨髓中性粒細胞的分離
實驗器材：器械（眼科小直剪2把，小彎鑷3把），無菌塑料滴管，15ml離心管，4mlEP管，培養皿，1ml注射器，70um尼龍篩網，低溫離心機 試劑：PBS（1×，10×），HBSS，percoll，percoll儲存液（percoll:10×PBS=9:1），percoll溶液（45%，81%，62%，55%，50%，分別用1×PBS稀釋Percoll儲存液到相應濃度）Histopaque1119，小鼠中性粒細胞緩沖液（MNB，既含0.1%牛血清白蛋白，1%葡萄糖的HBSS溶液）
材料：8-12周C57小鼠 實驗步驟：
1.拉頸處死小鼠，分離其脛骨和股骨，用紗布將脛骨和股骨擦乾凈，置於75%酒精中浸泡5min
2.用小直剪剪掉骨髓兩端，暴露骨髓腔，用MNB沖洗，每次1ml，脛骨沖洗兩次，股骨沖洗3次。
3.沖洗液用70um尼龍篩網過濾，離心收集細胞，600g 4℃ 10min,低減速。 4.棄上清，用3ml45%percoll溶液重懸細胞
5.Percoll梯度准備：3ml81%，2ml62%，2ml55%，2ml50%percoll溶液 6.小心的將細胞懸液置於percoll梯度上，1600g,30min,10℃,無制動離心。 7.棄掉62%percoll層以上的溶液，收集62%-81%之間的percoll層。
8.10mlMNB洗兩次，600g,10℃,10min,離心。棄上清，用3mlMNB重懸細胞。
9.將細胞懸液小心得置於3mlHistopaque1119上，1600g,10℃,30min,無制動離心，去除紅細胞層。
10.收集1119和MNB之間的細胞層，10mlMNB 洗兩次，600g, 4℃ 10min,低減速離心 11.按需要將細胞用培養基重懸到一定的濃度。
2、怎樣提取骨髓
我就提取過骨髓，一般是從屁股左測或右側兩邊的骨頭上提取
3、如何取小鼠骨髓細胞
1、頸椎脫臼法處死小鼠(C57型小鼠)，放在75%酒精中侵泡3-5分鍾後，拎出後將小鼠鋪於超凈台上一個消毒托盤上。
2、無菌提取小鼠的四肢骨，用眼科鑷小心捏起小鼠兩髖關節之間的腹部皮膚，用眼科剪小心剪開皮膚，並分離兩下肢的皮膚，往下在腳踝處剪斷，往上在髖關節處剪斷，這樣可以游離出小鼠的兩條下肢。
3、小心剝離肌肉，分別剪下Femurs（大腿骨）and Tibias（脛骨）,剪去兩端軟骨，露出紅色的骨髓腔。注意盡可能少的剪走骨髓腔。用紗布將骨頭上的肌肉用紗布擦拭乾凈。
4、拿一支1ml的無菌注射器，每支吸取1mlHBSS液，並用無菌的針頭套管將之輕輕擰彎。輕輕插入骨髓腔，沖洗骨髓腔以獲得骨髓，一般用2-3ml培養基沖洗兩次，可沖出絕大部分細胞。
5、過濾：用2OO目的濾網過濾，將濾網的中央插入到離心管裡面25px處，然後用注射器吸取骨髓液，慢慢將骨髓液經濾網注入離心管中，去除殘渣。
6、離心：將離心管放置離心機中離心10分鍾（1350r/min）
7、去上清，加入1ml紅細胞裂解液ACK，靜置3分鍾，再加9ml HBSS溶液，進行離心10分鍾，棄上清。
8、用HBSS液洗滌骨髓細胞2次，室溫，1350r/min離心10分鍾。計數活細胞，用培養基調整細胞濃度至1X106個細胞/ml.
9、在試管中加入RPMI-1640培養基，然後再加入20ng/ml的細胞因子GM-CSF、5%FBS、0.1%的2-巰基乙醇，
10、吸取培養基加入到沉澱中混勻，24孔板鋪板培養，每個孔1ml.
4、牛骨髓是怎麼提取出來的
1、牛骨髓提取方法：
選完整的脊椎骨,在醋里輕浸以下10分鍾左右,在清水中洗凈,切成你想要的幾段長,再沸水中輕煮以下,就能順利取出骨髓,再切除兩端.就是你想要的。
2、牛骨髓，葯劑，為牛科動物黃牛或水牛的骨髓。高蛋白、低脂肪及含優質有機鈣的富營養原料，很多壯骨粉、補鈣產品所用原料就是來自牛骨髓。
5、單克隆抗體中的骨髓瘤細胞從哪裡提取?是不是在提取小鼠的免疫細胞的胰臟中？
不是提取小鼠胰臟中免疫細胞。是從骨髓中提取癌變的細胞，這類細胞具有永生性，骨髓瘤細胞在體外培養條件下無限增殖，但不能產生抗體。B淋巴細胞能產生抗體，不能在體外增殖。二者融合以後就能無限增殖又能產生抗體。
6、如何從小鼠骨髓中分離和培養DC
拉頸處死小鼠，無菌剝離股骨和脛骨，用Hank』S沖出骨髓細胞，PBS洗
滌1次，用0．83％Tris—NH4CL裂解紅細胞，RPMI1640培養液洗滌2次，調整細胞濃度為1×106個／mL，
並加入rmGM—CSF(1000 U／mL)和rmlL－4(500 U／mL)，接種於24孔培養板，置於37~C，5％CO2孵箱中
培養．第3天輕輕搖動培養板，吸走大部分懸浮細胞，加人等量的培養液，並補足細胞因子．隔日半量換液
1次，第7天收集懸浮或稍微貼壁的細胞．
7、骨髓是從哪裡抽取的怎樣抽取呢？謝謝指教
不知道是不是你要的?呵呵
有二種主要方法
1、抽取骨髓造血幹細胞：捐獻者作全麻或局麻，從捐獻者髂骨中抽取骨髓血。
2、外周血中採集幹細胞：給捐獻者注射動員劑，進行血液成分單采術，從捐獻者外周血中採集造血幹細胞。
中國造血幹細胞捐獻者資料庫提倡哪種方法採集造血幹細胞？
中國造血幹細胞捐獻者資料庫提倡的採集方式是從外周血中採集造血幹細胞。用科學方法將骨髓血中的造血幹細胞大量動員到外周血中，從捐獻者手臂靜脈處採集全血，通過血細胞分離機提取造血幹細胞，同時，將其它血液成份回輸捐獻者體內。
8、如何提取小鼠骨髓細胞?
1、頸椎脫臼法處死小鼠(C57型小鼠)，放在75%酒精中侵泡3-5分鍾後，拎出後將小鼠鋪於超凈台上一個消毒托盤上。
2、無菌提取小鼠的四肢骨，用眼科鑷小心捏起小鼠兩髖關節之間的腹部皮膚，用眼科剪小心剪開皮膚，並分離兩下肢的皮膚，往下在腳踝處剪斷，往上在髖關節處剪斷，這樣可以游離出小鼠的兩條下肢。
3、小心剝離肌肉，分別剪下Femurs（大腿骨）and Tibias（脛骨）,剪去兩端軟骨，露出紅色的骨髓腔。注意盡可能少的剪走骨髓腔。用紗布將骨頭上的肌肉用紗布擦拭乾凈。
4、拿一支1ml的無菌注射器，每支吸取1mlHBSS液，並用無菌的針頭套管將之輕輕擰彎。輕輕插入骨髓腔，沖洗骨髓腔以獲得骨髓，一般用2-3ml培養基沖洗兩次，可沖出絕大部分細胞。
5、過濾：用2OO目的濾網過濾，將濾網的中央插入到離心管裡面25px處，然後用注射器吸取骨髓液，慢慢將骨髓液經濾網注入離心管中，去除殘渣。
6、離心：將離心管放置離心機中離心10分鍾（1350r/min）
7、去上清，加入1ml紅細胞裂解液ACK，靜置3分鍾，再加9ml HBSS溶液，進行離心10分鍾，棄上清。
8、用HBSS液洗滌骨髓細胞2次，室溫，1350r/min離心10分鍾。計數活細胞，用培養基調整細胞濃度至1X106個細胞/ml.
9、在試管中加入RPMI-1640培養基，然後再加入20ng/ml的細胞因子GM-CSF、5%FBS、0.1%的2-巰基乙醇，
10、吸取培養基加入到沉澱中混勻，24孔板鋪板培養，每個孔1ml.