骨髓巨細胞12

1、巨細胞病毒高出參考值是什麼原因

巨細胞病毒(cytomegalovirus , CMV)【臨床意義】
1.CMV如所有皰疹病毒一樣廣泛存在，除先天性感染、器官移植、輸血以及潛伏病毒被激活等原因外，其他傳染方式均不明了。人巨細胞病毒（HCMV）感染在人群中普遍存在，35歲以上的人有抗體者佔80％。HCMV在健康人群中絕大多數表現為隱性或輕症狀感染。病毒可長期存在於咽部、涎腺、子宮頸、陰道分泌物、精液、乳汁以及血液中。當人免疫功能低下時，常導致嚴重的感染，部分病例可因此喪生。如1/3以上的骨髓移植患者可並發有症狀的CMV感染並導致間質性肺炎，是目前導致骨髓移植失敗的重要原因之一。
2．年齡相關性發病率研究提示，在人的一生中圍生期和生殖期發生CMV感染的危險性增高。圍生期感染可通過宮頸分泌物和母乳來傳播，而在性成熟期血清轉化的突然升高則提示性病傳播的可能性。雖然產前CMV感染的發生頻率較低，但它可通過胎盤由母親傳遞給胎兒，並成為新生兒精神發育遲緩和其他先天性缺陷的主要感染性原因。2000名嬰兒中只有1名會出現嚴重的巨細胞包涵體病（CID)，而獲得宮內無症狀性感染的卻有10倍之多。
3．在出生最初3周的新生兒尿液、呼吸道分泌物或者其他體液分離出HCMV是先天性感染最敏感和特異的確診依據。尿液所含的病毒量較高，因此為首選的標本。由於母體IgG抗體能被動通過胎盤，IgG抗體測定在HCMV先天性感染診斷方面的應用價值有限。由於母體的IgM不會通過胎盤屏障，因此新生兒血清中出現CMV特異性IgM抗體，高度提示先天性或新生兒感染的可能性。如果嬰兒具有典型症狀，其HCMV抗體的滴度持續與母體的相當或者更高，存在先天性感染的可能性很大。如果母體和嬰兒的HCMVIgG抗體均為陰性，可排除先天性HCMV感染。
4．如果沒有實驗室檢查的支持，如病毒分離、IgM特異性抗體陽性或IgG特異性抗體水平顯著升高，臨床上不能診斷CMV感染。

2、巨細胞病毒到底是指那一種病？

【巨細胞病毒(Cytomegaoviyns,CMV)】:是一種皰疹病毒組DNA病毒。分布廣泛,有與其他動物皆可遭受感染，引起以生殖泌尿系統，中樞神經系統和肝臟疾患為主的各系統感染，從輕微無症狀感染直到嚴重缺陷或死亡。
巨細胞病毒(Cytomegalovirus CMV)亦稱細胞包涵體病毒，由於感染的細胞腫大，並具有巨大的核內包涵體，故名。
一、生物學性狀
CMV具有典型的皰疹病毒形態，其DNA結構也與HSV相似，但比HSV大5%。本病毒對宿主或培養細胞有高度的種特異性，人巨細胞病毒(HCMV)只能感染人，及在人纖維細胞中增殖。病毒在細胞培養中增殖緩慢，復制周期長，初次分離培養需30～40天才出現細胞病變，其特點是細胞腫大變園，核變大，核內出現周圍繞有一輪「暈」的大型嗜酸性包涵體。
二、致病性
CMV在人群中感染非常廣泛，我國成人感染率達95%以上，通常呈隱性感染，多數感染者無臨床症狀，但在一定條件下侵襲多個器官和系統可產生嚴重疾病。病毒可侵入肺、肝、腎、唾液腺、乳腺其他腺體，以及多核白細胞和淋巴細胞，可長期或間隙地自唾液、乳汗血液、尿液、精液、子宮分泌物多處排出病毒。通常口腔，生殖道，胎盤，輸血或器官移植等多途徑傳播。
(一)先天性感染
妊娠母體CMV感染可通過胎盤侵襲胎兒引起先天性感染，少數造成早產、流產、死產或生後死亡。患兒可發生黃疸，肝脾腫大，血小板減少性紫斑及溶血性貧血。豐活兒童常遺留永久必性智力低下，神經肌內運動障礙，耳聾和脈絡視網膜炎等。
(二)圍產期感染
產婦泌尿道和宮頸排出CMV，則分娩時嬰兒經產道可被感染，多數和症狀輕微或無臨床症狀的亞臨床床感染，有的有輕微呼吸道障礙或肝功能損傷。
(三)兒童及成人感染
通過吸乳、接吻、性接觸、輸血等感染、通常為亞臨床型，有的也能導致嗜異性抗體陰性單核細胞增多症。由於妊娠，接受免疫抑制治療，器官移植，腫瘤等因素激活潛伏在單核細胞、淋巴細胞中病毒，引起單核細胞增多症、肝炎、間質性肺炎、視網膜炎、腦炎等。
(四)細胞轉化和可能致癌作用
經紫外線滅活的CMV可轉化嚙齒類動物胚胎纖椎母細胞。在某些腫瘤如宮頸癌、結腸癌、前列腺癌、Kaposis肉瘤中CMV DNA檢出率高，CMV抗體滴度亦高於正常人，在上述腫瘤建立的細胞株中還發現病毒顆粒，提示CMV與其皰疹病毒一樣，具有潛在致癌的可能性。
四、免疫性
機體的細胞免疫功能對CMV感染的發生和發展起重要作用，細胞免疫缺陷者，可導致嚴重的和長期的CMV感染，並使機體的細胞免疫進一步受到抑制，如殺傷性T細胞活力下降，NK細胞功能減低等。
機體原發感染CMV後能產生特異性抗體和殺傷性T淋巴細胞，激活NM細胞。抗體有限CMV復制能力，對相同毒株再感染有一定抵抗力，但不能抵抗內源性潛伏病毒的活化，及CMV其他不同毒株的外源性感染。而通過特異性殺性T淋巴細胞和抗體依賴細胞毒性細胞能發揮最大的抗病毒作用。
五、微生物學診斷
唾液、尿液、子宮頸分泌液等標本離心沉澱，將脫落細胞用姬姆薩染色鏡檢，檢查巨大細胞及核內和漿內嗜酸性包涵體，可作初步診斷。
分離培養可將標本接種於人胚肺纖維母細胞中，由於CMV生長周期長，細胞病變出現慢，為了快速診斷，可將培養24小時的感染細胞固定，用DNA探針進行原位雜交，檢測CMV DNA。
用ELISA檢測lgM抗體和lgG抗體，適用於早期感染和流行病學調查。LgG抗體可終身持續存在，lgM抗體與急性感染有關。
不論是初次感染或復發感染，當病毒血症時，可用葡聚糖液提取外周血單個核細胞，製成塗片，加CMV單克隆抗體，採用免疫酶或熒光染色，檢測細胞內抗原。
近年應用免疫印跡法和分子雜交技術直接從尿液，各種分泌物中檢測CMV抗原和DNA是既迅速又敏感，准確的方法。
六、防治原則
丙氧鳥苷(ganciclovir DHPG)有防止CMV擴散作用。如與高滴度抗CMV免疫球蛋白合用，可降低骨髓移植的CMV肺炎並發症死亡率，如果耐丙氧鳥苷的CMV感染可選用磷甲酸鈉，雖能持久地減少CMV擴散，但效果比前者差。國外研製CMV病毒活疫苗，能誘導產生抗體，但排除疫苗的致癌潛能，有待解決

3、巨細胞病毒是一種什麼病？謝謝你們！謝謝！

巨細胞病毒是一種皰疹病毒組DNA病毒，亦稱細胞包涵體病毒，會引起以生殖泌尿系統、中樞神經系統和肝臟疾患為主的各系統感染，從輕微無症狀感染直到嚴重缺陷或死亡。巨細胞病毒感染以後一般沒有明顯的症狀，主要通過病毒篩查而檢查出來。如果檢查出巨細胞病毒感染，最好是積極治療。治療主要使用抗病毒的葯物，比如丙氧鳥苷。這種病大多數屬於母嬰傳染。生孩子前最好做檢查，如果檢查出有病毒感染，要積極用葯治療，阻斷母嬰傳播。

4、巨細胞病毒（CMV-IgGII) 結果是142 IU/ml 參考值<12

巨細胞病毒（CMV）是一種皰疹病毒，分布廣泛。 CMV感染可引起泌尿生殖系統，中樞神經系統，肝，肺和血液循環系統病變，可能是惡性腫瘤的發生有關。新報告的艾滋病，巨細胞病毒感染可能有關。常通過性交傳播。因此列為性傳播疾病。
更廣泛的人群中，巨細胞病毒感染可引起全身各器官組織病變，胎兒，嬰兒造成嚴重損害，甚至死亡，可能與宮頸癌等惡性腫瘤的發病率。因此，了解CMV積極預防巨細胞病毒感染是非常重要的。

[病理]
CMV [病原體]
唾液中的病毒屬於皰疹病毒亞科，是一種病毒，人類皰疹病毒組。 ，由分子量約150X106線性雙鏈DNA。其最大的由162個殼微粒（病毒殼粒）正二十面體構成。典型的皰疹病毒結構。形式的單純皰疹病毒和水痘 - 帶狀皰疹病毒非常相似，難以區分。
CMV只有在組織培養的人成纖維細胞的增殖，但不能在其他動物細胞的生長，增殖速度很慢，而且其復制周期為36-48小時時間超過8個小時的皰疹病毒復制周期的。初步分離需要超過一個月的特殊細胞，細胞成為公園的擴展，一個巨大的細胞和細胞核，核的「光環」圍繞大型嗜酸性包涵體。在生物體內的靶細胞是上皮細胞。廣泛的交叉反應之間的各種人類巨細胞病毒株。的
CMV高達2小時的20％乙醚在生存。 pH值<5，或放置在56℃30分鍾，或5分鍾的紫外線照射可以是足夠滅活。巨細胞病毒感染的抗凍結和解凍，或存儲在-20℃或-50℃的不穩定，10％的家用漂白劑使其感染顯著減少。的
CMV感染其特徵在於典型的細胞質和核的夾雜物，也被稱為巨細胞病毒的巨細胞。在人體組織中肥大細胞，引起巨細胞包涵體病。

發病機制中的原發感染，巨細胞病毒，在宿主細胞中無限期存在成潛伏狀態。提示屍檢肺，肝，胰腺，唾液腺，中樞神經系統及腸也可能是病毒潛伏的地方可能涉及的各種組織和器官。先天性感染的嚴重程度，和缺乏沉澱的抗體和T細胞響應於巨細胞病毒有關的能力。兒童和成人外周血中巨細胞病毒感染，抑制活化的細胞毒性T淋巴細胞表型，如果主機T-細胞功能受損，潛伏的病毒可能會復活，並導致各種綜合征。組織移植巨細胞病毒激活引起的疾病條件的慢性刺激。一些有實力的T細胞免疫抑制劑如抗胸腺細胞球蛋白，臨床CMV綜合征的高發期。此外，CMV可以使用的功能的輔助因子，使潛伏感染艾滋病毒的活化。

感染的患者和他們的急性感染性疾病的人感染源的來源。已發現在血液，唾液，眼淚，尿液，精液，糞便，子宮頸和陰道分泌物，乳汁和其他的巨細胞病毒。傳輸的乳汁，唾液和尿液，可持續數星期至數年。

易感人群
巨細胞病毒在世界各地，人們有廣泛的易感性。人是巨細胞病毒的唯一宿主。
血清學調查:40-100％的成年巨細胞病毒抗體流行的季節性趨勢。
感染率在不同的國家和不同的經濟狀況有所不同。在亞洲和非洲，90％的人口受感染，其中大多數是在一個年輕的年齡，抗體，感染年齡較早，而西方國家的感染後期發生的。調查還顯示，經濟收入群體，低收入人群感染率較高。這位70歲的人群抗體陽性率超過20歲的人群中。女性易患年齡20-30歲的男性，年齡50-60歲，年齡在35歲後，男人和女人之間的抗體陽性率基本上是相同的。雖然身體已經產生循環抗體，但病毒仍能夠持續或間歇性的排除，因此，是造成慢性或隱性感染。
大多數人一輩子巨細胞病毒感染，但主要是無症狀的隱性感染。成人巨細胞病毒感染和免疫功能密切相關。病毒往往會持續一生，在潛伏感染的形式，只有當宿主的免疫狀態失去平衡，如器官和骨髓移植，癌症，數學，妊娠和免疫抑制劑的應用等，潛伏的病毒復活。潛伏的病毒的復活和無症狀攜帶者可能會導致病毒的傳播。接受器官移植和免疫抑制治療的結果，往往器官，並進入血液中潛伏的病毒，或免疫激活潛伏的病毒和巨細胞病毒感染的艾滋病患者的發病率很高的發病率。

巨細胞病毒傳輸途徑的傳播途徑：
（1）先天性感染：妊娠（宮內感染），巨細胞病毒可通過胎盤傳播給胎兒。
（2）獲得性感染（圍產期感染）：分娩時，如宮頸分泌物中病毒可通過產道傳播給新生兒。
（3）產後乳汁分泌病毒，母乳喂養可直接傳染給嬰兒。
（4）長期接觸，排毒，唾液，尿液，眼淚可以傳播。
（5）同源性CMV感染可通過輸血，器官移植傳播。的同源性巨細胞病毒感染是一個嚴重的輸血和器官移植，多次輸血或原發和復發感染的危險性增加的大量輸血，輸入含白細胞血液，器官或骨髓移植後巨細胞病毒感染的風險較高的風險也很高。性傳播
（6）：由於該病毒往往是存在於泌尿生殖道分泌物，精液或宮頸分泌物通過性交可直接蔓延。
由於從精液，宮頸分泌物，眼淚，糞便（口腔性慾，吻肛）感染。巨細胞病毒感染途徑（中環）表表1

母親到胎兒，新生兒，兒童，成人

陰道感染，接觸感染

（唾液，尿）

輸血
肝炎
呼吸道感染隱性感染

肝炎

呼吸道感染
>

→成熟不好的孩子體重增加慢免疫抑制劑引起的肺炎和
胃腸道黏膜
肝炎病毒血症
┌→無創
│ BR />└→感染 - →尿糖陽性的健康新生兒傳染性單核細胞增多症傳染性單核細胞增多症病毒在

傳染性單核細胞增多症樣疾病→病毒尿中紅細胞增多症，肝功能障礙
短暫的血小板 />減少隱性感染輸血

不明原因的發熱無症狀感染

→全身性巨細胞包涵體病
↓

，或精神發育遲滯的跡象生存

[免疫學雜志
巨細胞病毒感染可引起機體的免疫功能，尤其是細胞免疫功能下降。 CMV感染具有顯著影響的胸腺和脾細胞，單核吞噬細胞，NK細胞和CTL細胞的功能。

實驗室的胸腺，脾臟急性CMV感染的新生豚鼠，抑制，胸腺，T細胞的數量減少成年小鼠巨細胞病毒感染，88％的胸腺巨細胞病毒的檢測。
巨細胞病毒感染脾功能受影響，脾淋巴細胞增殖活性降低ConA刺激脾細胞產生IL-2顯著減少。
<br免疫細胞巨細胞病毒感染引起的免疫抑制細胞內病毒的復制有關。 CMV復制，其特徵在於，所述單核吞噬細胞與巨細胞病毒感染的細胞，最容易具有重要的調節功能和單核吞噬細胞，T細胞，B細胞和一些尚未確定的單核細胞中的淋巴細胞在免疫反應中的效應子功能。巨細胞病毒感染可引起多種淋巴細胞免疫功能受損。的
巨細胞病毒感染的急性單核細胞增多症。外周血淋巴細胞的有絲分裂增殖反應，巨細胞病毒抗原和HSV抗原減弱，誘導干擾素的水平，CD4/CD8比值下降至1.7±0.7 0.2 +0.2降低T細胞活性。改變一些持續相當長的時間，10個月後的疾病，大多數患者T細胞亞群比例還沒有完全恢復正常。
巨細胞病毒感染的免疫抑製作用是由大單核細胞感染病毒和CD8細胞功能障礙。單核吞噬細胞在抗CMV免疫中起著舉足輕重的作用，不僅可以直接吞服，防病毒，更重要的是可以處理的免疫反應，目前的抗原，細胞因子的分泌，調節和擴展。當CMV感染，單核吞噬細胞功能的影響，巨細胞病毒感染引起的巨噬細胞的吞噬作用降低細胞內氧自由基減少，FC受體，補體受體表達的改變，和的抗原呈遞功能低級農產品IL-1也減少了減少IL- 1和IL-2反應。 Moses等胸腺細胞增殖測定中，IL-1活性降低，IL-1產生的減少可以導致在TH / TS細胞比例失衡。
NK細胞拮抗作用的巨細胞病毒擴散。 NK細胞積極參與在整個過程中的抗巨細胞病毒感染的NK活力高，但不一定有一種保護性反應，但活動性感染的證據。 NK細胞不能防止出現原發性巨細胞病毒感染，但一旦感染了在場的，NK細胞，巨細胞病毒感染的早期，限制擴散，使感染的限制。 NK細胞，CTL細胞是抗CMV的重要效應細胞。在CMV復制早期，感染性病毒體的產生之前，他們可以切割被感染的細胞，使細胞之間的病毒流產的蔓延。在小鼠模型中，病毒的影響3-5天，由NK細胞介導的??抗病毒效應由IFN增強NK細胞活性。 6-21天，脾，外周血細胞殺傷活性的CTL。 NK細胞，CTL細胞活性的高低決定了巨細胞病毒感染的敏感性及感染恢復易於身體。巨細胞病毒感染的細胞，NK細胞和CTL細胞的活性也受到嚴重影響。此外，特定的細胞免疫防止CMV感染復發作用。是檢測巨細胞病毒感染的腎移植受者的T細胞反應的發生，發現有20個14巨細胞病毒細胞毒性反應，6個細胞毒性反應者有嚴重的臨床後果。因此，一個特定的T細胞存在，有防止CMV感染復發。

身體減少由巨細胞病毒感染，巨細胞病毒感染的毒力，有可能是多種的抗體的抗體。牛奶，宮頸分泌物，唾液，雖然特異性抗體，包括中和抗體。但仍可檢測出巨細胞病毒抗體並不能阻止病毒的傳播。不能阻止的宮內胎兒從母體被動獲得的抗體，傳播的感染的產道或牛奶。有研究表明，在小鼠腹腔或靜脈注射致命CMV攻擊前，0.2毫升高滴度的抗CMV球蛋白，可完全保護動物死亡。 CMV等，然後次要攻擊，動物仍全部存活，表明抗體減少巨細胞病毒毒力的作用。

孕婦感染巨細胞病毒會發生什麼？
孕婦巨細胞病毒感染，病毒可以通過胎盤感染胎兒，引起胎兒先天性感染，流產和死胎。
出生的嬰兒先天性感染可無症狀，但也有嚴重者可累及多器官，甚至導致死亡。症狀可見肝脾腫大，黃疸，瘀點或特發性血小板減少性紫癜，脈絡膜視網膜炎，小頭畸形。所有的孩子都將有不同程度的聽力，視力減退，意識，運動障礙，智力低下和其他活著。通過產道或在出生後的哺乳感染，是後天感染，一般症狀輕微，預後良好，肝功能異常和個人。

[臨床表現]
巨細胞病毒感染的症狀是什麼？
健康成人巨細胞病毒感染多無明顯臨床症狀，部分患者可有傳染性單核細胞增多症，性能，發熱，乏力，咽喉痛，淋巴結腫大，肌肉疼痛，多發性神經炎，外周血異型淋巴細胞，脾腫大的症狀。
孕期宮內感染給胎兒，易發生自發性流產和死胎或早產可能會損壞。新生兒症狀可見肝脾腫大，黃疸，肝炎，血小板減少性紫癜，溶血性貧血，神經系統的退行性變，小頭畸形，智力低下，視力，聽力障礙。
新生兒感染可無全身症狀，有的僅表現為呼吸障礙的症狀，有的肝功能異常。沒有神經系統的損害。

巨細胞病毒感染的自然史是一個非常復雜的，排毒原發感染後，往往幾個星期，幾個月，甚至幾年，然後到潛在感染。經常復發感染，再解毒。即使多年後原發感染後，潛伏的病毒再活化，再感染時可有不同抗原性病毒株。巨細胞病毒感染的臨床表現的個體的免疫功能和與年齡有關。示於表2，無論是從垂直傳輸，並行傳輸或醫源性感染的症狀和體征是多種多樣的。
表2CMV感染性疾病的臨床過程和疾病的類型（Baerlocher）
嚴重的類型：黃疸，貧血，肝脾腫大，血小板減少，感染的新生兒（先天性）
減少性紫癜，違反中央神經系統，肺炎，心肌炎）
B。溫和型：假死，心臟肥大，高膽紅素血症
2。出生後無症狀期，哺乳期的CMV再感染（先天/後天？）
A.全身
B。呼吸系（百日咳樣）C類型。肝脾腫大
。胃腸型
?腎型？
3。後天型
一。型流感
B。單核細胞增多症型
?呼吸型
D。胃腸型戊型肝炎

F。由於特殊的醫療防禦能力低
克。無症狀型？
的4.1,2,3長期後果關於收購巨細胞病毒感染，常見於輸血在臨床組織細胞增生症的單核細胞後，由於免疫功能紊亂，精神，運動遲緩
血管，視網膜炎症，肺炎和胃腸道感染。多數網格 - 巴氏綜合症的患者。

[診斷]
巨細胞病毒感染的臨床表現不能確診的，必須依靠實驗室是指一個病毒分離從臨床標本（或特異性抗體4倍以上的增加或持續的抗體效價），以明確診斷。
病毒隔離

最好的唾液，尿液，生殖道分泌物，乳汁，和白血細胞，接種到人體成纖維細胞的繁殖和分離，細胞病變效應（CPE可以觀察到的巨細胞固定和HE染色）出現在數天或數周後，核內包涵體，核周暈和嗜酸性粒細胞胞漿內夾雜物，很象「貓頭鷹眼」（貓頭鷹的眼睛）也可以使用單克隆或多克隆抗體染色等方法檢查。

兩個最常用的是補體的血清抗體檢測

綜合測試（CF），間接免疫熒光法（IIF），免疫酶試驗（EIA），間接血凝檢測CMV-IgG和IgM抗體的試驗（IHA）和放射免疫分析法（RIA）。當單份血清樣品，以確定巨細胞病毒感染的歷史，你應該立即離開的血清樣本，和間隔2周，4周，8周，然後離開結合病毒分離的血清樣品，可用於診斷為原發性感染。

DNA探針

已被廣泛的CMV的32P標記的探針，一些標本，混合比病毒分離是更敏感的方法的靈敏度最高的檢測中使用。

聚合酶鏈反應（PCR）

（一）標本收集和處理

採集標本，包括病人的血，尿，腺體組織。由全血制備的血沉棕黃層（血沉棕黃外套），可以存儲在-80℃;尿標本，可以儲存於液氮中。冷凍保存的標本應避免反復凍融。

尿標本2500r/min離心10分鍾，以除去細胞碎片，並收集上清液。預處理尿液中含有PCR抑制劑，如所要求的聚乙二醇（PEG6000）：50？ L尿上清液與50？ L的20％PEG6000和25？ L-2摩爾/ L的NaCl，混合，在冰浴中6小時; 15000r/min離心30分鍾沉澱收集。 6400r/min離心3分鍾;盡可能抽吸除去上清液，將沉澱物懸浮於蒸餾水中。該懸浮液可直接用於PCR擴增，擴增應該是在100℃下進行加熱10分鍾的快速設置冰浴冷卻。

（b）編制的模板DNA

1。血液標本制備模板DNA

A：中加入NaCl使血清終濃度的葡萄糖150mmol / L; 10？ l本血清在70℃45秒，直接進行PCR擴增。

方法B：制備的血沉棕黃層（BCP）：（1）的BCP，收取沉澱用PBS洗滌兩次。 ②加入500？ ?6mol / L的鹽酸胍同質化。 ③加入30？ ?10mmol / L的EDTA，10 mmol / L氯化鈉，30？ L20％十二烷基肌氨酸鈉和5？ ，?蛋白酶K（10mg/ml時），混合，60℃反應1h。 ④加入1130？ L乙醇沉澱1小時，-20℃。 ⑤通過離心收集沉澱的DNA。 ⑥進行洗滌兩次，用70％的乙醇中，並最後將沉澱物懸浮於10毫摩爾/ L的Tris-HCl，1mmol / L的EDTA少量。 4℃備用。
2。冰凍組織標本制備模板DNA：①低溫恆溫器機切5到10嗎？米冰凍組織塊放置在1.5ml塑料管。 （2）配製緩沖液中加入10％福爾馬林溶液。 ③10分鍾1?2分鍾，輕輕倒出上清液，離心分離後，用乙醇沉澱，洗滌2次。 ④乾燥，在室溫10?60分鍾。 ⑤加入提取緩沖液（100mmol / L的Tris-鹽酸，4毫摩爾/ L的EDTA，pH為8.0，400 G /毫升的蛋白酶K），從而使剛剛淹沒的沉澱物（約50至100·L）的沉澱搗碎。福爾馬林固定，石蠟包埋組織經脫蠟和乾燥，請點擊這里。 ⑥37℃放置在液體中。 ⑦放置在沸水中7分鍾滅活蛋白酶K⑧通過離心收集上清液，取1?10的？ L可以進行PCR擴增。

3。尿液標本制備模板DNA：①100？ L尿上清液用100？升6 mol / L的異硫氰酸胍，7？升2mol / L的NaCl和20？ L玻璃粉末懸浮液（DNA PREP，日本旭硝子公司，日本東京）混合。 （2）在室溫下攪拌10min，以6400r/min離心2分鍾，收集沉澱物。 ③的沉澱物用50％乙醇洗滌，10mmo / L的Tris-HCl，pH7.4的50毫摩爾/ L的NaCl，洗一次，6400r/min離心1分鍾。 ④同樣的沉澱物用水洗滌2次，並收集沉澱物。 ⑤加入50？ L的蒸餾水在55℃，15分鍾。 ⑥15000r/min離心2分鍾，收集上清液（包括巨細胞病毒DNA），進行PCR擴增，此加熱該懸浮液，在100℃下10分鍾，並在冰浴中迅速冷卻。的

（三）引物和探針

引，及探針的設計是根據公布的巨細胞病毒立即早期蛋白基因的啟動子區域的四個外外顯子序列的開始，晚期抗原gp64基因和磷酸化蛋白pp71基因序列。中常用的引物和探針的表3中列出。

（4）PCR擴增步驟

1.10×反應緩沖液：100毫摩爾/ L的Tris-鹽酸，pH為8.4，500毫摩爾/ L的KCl，25毫摩爾/ L的氯化鎂，2毫克/ ml的明膠。

的Taq DNA聚合酶：5U /？升。

10×dNTP濃度：4種的dNTP的各種2.0 mmol / L的。

底漆：100pmol的/ L.
2。常規PCR擴增

10×反應緩沖液反應混合物（50 L）？大號

10×dNTP的嗎？ ?

模板DNA的5？升

Taq DNA聚合酶0.2？升（IU）

每種引物，0.5？升

蒸餾水3.8？升

加1?2滴礦物油。

反應混合物加熱到94℃5分鍾，然後30秒，在95°C，55°C 40年代，在72°C 60秒，35至40個擴增循環。

表3 CMV PCR擴增用引物和探針
引物

探針
序列（5'→3'）位置
片斷

大小

IE1 CCACCCGTGGTGCCAGCTCC
早期基因
159（BP）

IE2
CCCGCTCCTCCTGAGCACCC

IE3（探頭）
CT??

LA1
CCGCAACCTGGTGCCCATGG
晚GP64 139

LA2 CGTTTGGGTTGCGCAGCGGG

LA3（探頭）
外顯子1 /> 139

IE1b
GGAATCCGCGTTCCAATGCA

IE1a
AGATCGCCTGGAGACGCCAT
早
/> IE2a
ATGGAGTCCTCTGCCAAGAG
早期的外顯子2
72

IE2b
CCGTGGCACCTTGGAGGAAG

IE3a
> GTGACCAAGGCCACGACGTT
外顯子3月初
167

IE3b
TCTGCCAGGACATCTTTCTC

IE4a
ACAGATTAAGGTTCGAGTGC
外顯子4月初
179

IE4b
CAATACACTTCATCTCCTCG

IE4c
TTACCAAGAACTCAGCCTTC
早期基因第4外顯子
> 158

IE4d
GTGCGTGAGCACCTTGTCTC

IE4e TATACCCAGACGGAAGAGAAATTCA
早期基因第4外顯子
426

IE4f
ATAAGCCATAATCTCATCAGGGGAG

PP1A
TAGCGCGCATACATCCCGAGTACAT <BR / PP71基因
316

Pp1b
ATGACGTTGCTCCGTGGAAAGAGACC
Pp71

3。的套筒式（嵌套）PCR擴增：①的反應混合物中相同的組合物（2），只有的引物IE2a和IE4b（包括整個外顯子3的721B），每個100pmol。在94℃60秒，150秒，52℃72℃480S，擴增20循環。 ②取2？ L的擴增產物，引物各加100pmol的IE3a和IE3b額外的試劑。然後，在94℃60秒，150秒，52℃72℃180秒，擴增20循環。

（e）產品標識

放大分析的產品可以是固相雜交和液相雜交試驗（膜）。

1。固相雜交：

①預雜交3×SSPE，5×登哈特，0.5％SDS和25％甲醯胺的解決方案。膜的擴增產物在42℃預雜交30?60分鍾。 ②加入標記的探針（10cpm / G，2ng/ml），混合30?60分鍾。 ③0.2×SSPE .01％SDS在室溫下洗滌??膜3次，5分鍾/次，洗，在60℃，10分鍾/次，然後在室溫下洗滌??一次??以上，5min /次。 ④放射自顯影。
2。液相雜交和凝膠電泳：

①取1/10體積的擴增產物在0.5?1.0pmol在探頭混合。 ②加入最終濃度為葡萄糖150mmol / L的NaCl，10毫摩爾/ L，鈉，磷酸和1mmol / L EDTA溶液，使總體積為20？ ?③95℃10分鍾，然後在56°C為60分鍾。 ④離心10秒被添加的樣品緩沖液中，在8％的聚丙烯醯胺凝膠上進行電泳。 ⑤電泳完成後，用溴化乙錠染色，然後將其暴露於X-射線膠片放射自顯影。

HCMV DNA分子的鹼基序列還沒有被發現。雖然它的DNA的限制性內切酶片段長度多形性，但其基因??組中的離散性的是不清楚。可確定使用一個單一的引物對，進行PCR擴增，90％的人巨細胞病毒的野生型菌株;而使用不同HCMV序列的兩套以上的引物，可以檢測到幾乎所有的病毒株。因此，在這種情況下，通過PCR用引物位於不同區域的基因組中的兩個或多於兩個的雙。

HCMV模板DNA制備過程中，有時會產生一些小的DNA片段，PCR反應往往會導致一定程度的底部產品，從而影響測定結果。在這種情況下可以嵌套PCR法，其基本原理是使目標DNA的擴增是分為兩個步驟：首先，使用一對引物用於擴增靶DNA，包括長的DNA片段，然後取少量使用引物擴增產物的目標DNA只那麼第二放大。通過控制每個步驟，擴增循環數，以防止小的DNA片段所造成的假陽性。此方法也可避免假陰性結果。

PCR檢測HCMV標本具有高靈敏度的。相當於幾十個病毒DNA分子或1?5PFU這從HCMV感染的組織培養上清液中的病毒的DNA序列可以被檢測到。可以檢測到擴增產物的Southern雜交分析的尿液樣本到1pgHCMV DNA序列的水平;利用這個系統，僅在4×104個細胞的病毒基因組，可以檢測到與非放射性的寡核苷酸探針，增加了2×103倍相比，斑點雜交。

PCR技術檢測HCMV感染的臨床應用價值，因為前的臨床症狀的出現或感染的血清學證據的體液中病毒DNA，HCMV感染的早期指標可以用作。 HCMV感染通過胎盤，產道感染傳播，受感染的新生兒死亡率較高，因此利用PCR的早期診斷和及時治療，產前和產後護理也很重要。的關系，也可以使用這種方法，是否為HCMV與許多嚴重的疾病器官或組織移植供體的識別。此外，PCR檢測的穩定性的指標，但也有半定量分析，並因此可以被用來作為一種手段的評價的各種抗病毒療效。

[治療]
發現在懷孕早期原發性巨細胞病毒感染，盡快盡可能終止妊娠。妊娠後期感染，應進一步檢查胎兒畸形，並採取相應的治療措施。抗病毒治療的臨床症狀或先天性巨細胞病毒病。如阿糖胞苷，磺胺類配糖體，如干擾素，但效果還有待進一步觀察。的
治療巨細胞病毒感染，並且可以適用於各種的抗病毒制劑如GCV，抗巨細胞病毒的免疫球蛋白制劑，干擾素和轉移因子。但這些葯物不會從根本上解決問題，往往停葯後反彈，這種病毒潛伏的病毒可作為艾滋病的原因之一，與來自不同國家的學者都致力於控制其感染。美國學者最近開發出兩種活疫苗，在第一次測試後相當有效的。一種是由AD169病毒株，另從鎮，菌株製成，已經清楚地表明抗巨細胞病毒的功效胃腸外給葯後巨細胞病毒抗體增加，從而增強機體免疫功能。

[預防]
巨細胞病毒對人類的巨大危險，所以我們應積極預防其發生。
（1）鍛煉身體的健身意識。提高機體的免疫功能和抗病能力，尤其是婦女的生育年齡，以減少巨細胞病毒對胎兒的嚴重危害。
（2）我們需要保護懷孕或患有慢性消耗性疾病，免疫功能低下的病人，讓他們遠離感染源。
（3）要注意環境衛生，飲食和健康。
（4）牛奶中的巨細胞病毒陽性不應該進行母乳喂養。
（5）免疫預防。尚在研究和探索。

你的結果是正常的 請放心

5、骨髓移植後18天骨穿檢查巨細胞病毒是5.65怎麼辦

你好，巨細胞病毒感染是一種皰疹病毒感染，應積極抗病毒治療。並提高免疫力。

6、骨巨細胞

?

7、巨細胞病毒是怎麼回事

巨細胞病毒是一種皰疹病毒組DNA病毒，亦稱細胞包涵體病毒，會引起以生殖泌尿系統、中樞神經系統和肝臟疾患為主的各系統感染，從輕微無症狀感染直到嚴重缺陷或死亡。巨細胞病毒感染以後一般沒有明顯的症狀，主要通過病毒篩查而檢查出來。如果檢查出巨細胞病毒感染，最好是積極治療。治療主要使用抗病毒的葯物，比如丙氧鳥苷。這種病大多數屬於母嬰傳染。生孩子前最好做檢查，如果檢查出有病毒感染，要積極用葯治療，阻斷母嬰傳播。

8、什麼是巨細胞病毒？

巨細胞病毒是一種皰疹病毒組DNA病毒，該病毒進入細胞內以後會導致細胞增大和腫大，且具有巨大的核內包涵體，是一種典型的皰疹病毒形態。人類和動物都可以遭受該病毒的感染，但人巨細胞病毒只能感染人。

人身上容易潛伏有巨細胞病毒，潛伏部位常在唾液腺、乳腺、腎臟、子宮頸、睾丸、白細胞以及其它腺體中，病毒可長期或間歇地自唾液、乳汁、尿液、精子及子宮頸分泌物中排出。但在大多數免疫正常個體呈無症狀感染，而在免疫抑制個體、胎兒和嬰幼兒如果感染則可出現明顯病症。

該病毒被感染後容易引起以生殖泌尿系統，中樞神經系統和肝臟疾患為主的各系統感染，從輕微無症狀感染直到嚴重缺陷或死亡。

(8)骨髓巨細胞12擴展資料

人巨細胞病毒的種類

1、根據病毒感染的時間可分為先天性感染和後面感染。先天性感染大多是由孕婦在懷孕過程當中接觸到了該病毒，該病毒慢慢滲入胎盤導致胎兒感染，隱性的感染容易在新生兒分娩時被感染。

2、根據病毒感染的次序可分為原發性感染和再發性感染，原發性感染大多是因為宿主首次感染該病毒，且之前並沒有產生任何抗體。再發性感染是潛伏在宿主體內的病毒被重新激活或增值，導致病毒異變並再次感染。