1、試述什麼是細胞化學染色,說明其基本步驟,並指出在臨床中有哪些應用
您可以參考:
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2、急求骨髓塗片鐵染色法技術流程
1)4%的鹽酸溶液.:40ml(38%濃鹽酸)+340ml蒸餾水
2)40g/L亞鐵氰化鉀液
3)鹼性復紅:1g復紅+10ml無水乙醇+90ml(5%石碳酸溶液),用時取3ml加100ML水.
4)37%甲醛
3、骨髓細胞檢查報告中的化學染色中的POX陽性13%是指什麼?
POX是細胞的過氧化物酶染色,染色後,在顯微鏡下觀察,細胞中有藍黑色顆粒的為陽性,POX陽性13%就是指呈陽性的細胞占總細胞數的13%
4、骨髓細胞染色常用什麼方法,各是用於何種檢測。
骨髓細胞內外鐵染色,是進行貧血分類的常用組織化學染色方法,一般均採用普魯士蘭染色法,該法雖操作簡便,但若掌握不好,常使玻璃上沉積大量污染鐵,無法判定結果,我們曾查閱多種材料,對該項試驗的一些細節問題均無詳細介紹。最近我們參照各家材料,經過多次試驗從玻片處理試劑配製、試驗的時間、溫度、最後漂洗的手法復染時間的控制等步驟上,對細胞內外鐵染色的方法進行探討,摸索出了一套較滿意的染色方法,現介紹如下。
【作者單位】: 黑龍江省寶泉嶺農場醫院
【關鍵詞】: 骨髓細胞 鐵染色 染色方法 組織化學 試劑配製 玻片處理 氰化鉀 貧血分類 普魯士蘭 染色法
【分類號】:R361
【正文快照】:
骨髓細胞內外鐵染色,是進行貧血分類的常用組織化學染色方法。一般均採用普魯士蘭染色法,該法雖操作簡便,但若掌握不好,常使玻璃上沉積大量污染鐵,無法判定結果,我們曾查閱多種材料,對該項試驗的一些細節同題均無詳細介紹。最近我們參照各家材料,經過多次試驗從玻片處理試劑
5、骨髓片、血塗片主要依據瑞氏染色觀察細胞,為什麼還需要其他化學染色?比如鐵染色、過氧化物酶染色等。
骨髓片、血塗片主要依據瑞氏染色觀察細胞,為什麼還需要其他化學染色?比如鐵染色、過氧化物酶染色
6、性白血病患者一般要做哪些細胞化學染色
急性白血病分為急性淋巴細胞白血病(簡稱急淋,ALL)和急性髓細胞白血病(包括M0、M1、M2a、M2b、M3、M4、M5、M6、M7)。由於急性白血病骨髓中是以原始和/或幼稚細胞增生為主,僅僅根據瑞氏染色下的細胞形態,容易做出錯誤的判斷,因此不論急性白血病細胞形態學表現是否典型,均應做細胞化學染色。建議急性白血病應至少做:過氧化物酶染色POX、特異性酯酶染色、非特異性酯酶染色及過碘酸-雪夫反應PAS。
由於白血病細胞具有高度異質性,同一類型白血病在不同患者中,其細胞化學成分也不盡相同,經常會出現細胞化學染色結果不典型、摸稜兩可或結果與形態結果不相符的現象,所以根據細胞形態學和細胞化學染色並不能對所有急性白血病的細胞類型做出正確的判斷,還需要結合染色體檢查、細胞免疫學檢查及分子生物學檢查等進行全面分析。
7、常用免疫組織化學染色方法有哪些
常用免疫組織化學染色方法, LSAB法.(SP法)(Labelled streptavidim biotln) 1.切片脫蠟至水. 2.0.3%H2O2甲醇處理切片10-20分鍾. 3.水洗. 4.抗原修復. 5.PBS洗3次,1分鍾/次. 6.加入血清孵育10分鍾. 7.摔去血清,加入一抗孵育30-60分鍾. 8.PBS洗3次,每次2分鍾.加入二抗,孵育20分鍾. 9.PBS洗3次,每次2分鍾. 10.加入SP復合物孵育20-30分鍾. 11.PBS洗3次,每次2分鍾. 12.DAB-H2O2孵育5-10分鍾. 13.PBS洗,水洗. 14.Harris蘇木素染核5-10分鍾. 15.水洗,分化 ,藍化,脫水,透明並封固.
8、常用的細胞染色方法有哪些
常用的細胞染色方法有:
1、簡單染色法,常用鹼性染料如美藍等進行簡單染色;
2、革蘭氏染色法,主要包括結晶紫初染、碘液媒染、乙醇(或丙酮)脫色以及番紅復染四個過程;
3、瑞氏染色法,瑞氏染料溶劑主要是由伊紅美藍組成;
4、吉姆薩染色法,吉姆薩染色原理與結果和瑞特染色法基本相同;
5、細胞免疫熒光染色法,免疫熒光染色的主要原理是利用抗原抗體之間的特異性結合。
染色是生物顯微玻片標本製作中最重要的環節之一。先把破壞細胞膜的選擇透過性,再使用染色劑,將生物組織浸入染色劑內,使組織細胞的某一部分染上與其他部分不同的顏色或深度不同的顏色,產生不同的折射率,以便觀察。
另外,銀染法也較常用。當組織塊浸入硝酸銀溶液中時,有的組織結構能直接把硝酸銀還原,使銀粒附於其上,呈棕黑色或棕黃色。有些結構本身對硝酸銀無直接還原能力,若加入還原劑,可使硝酸銀還原沉澱顯色。
(8)骨髓細胞化學染色常用方法擴展資料:
染色細胞固定有物理法與化學法,物理法為乾燥和火焰固定,化學法最常用的是甲醛、乙醇、丙酮和醋酸等。
1、偶氮偶聯法:利用人工合成的酶底物,在酶作用下,產生分解產物,再與重氮鹽結合引起偶氮偶聯,使其形成不溶性的偶氮色素,以此證明酶的存在。
2、聯苯胺法:粒細胞和單核細胞中的過氧化物酶作用於過氧化氫,釋放新生態氧,使無色的聯苯胺形成藍色沉澱。
3、普魯士藍法:細胞內、外鐵與酸性亞鐵氰化鉀作用,形成藍色亞鐵氰化鐵沉澱。
4、雪夫反應:過碘酸氧化細胞內糖類中乙二醇基形成乙醛基,醛基與雪夫試劑作用,使無色品紅形成紅色沉澱。
5、金屬沉著法:其他尚有物理學方法,如脂溶性染料染色(顯示脂質)、熒光顯示、放射自顯影以及體外活體染色亦常用於臨床血液細胞學診斷。
9、血細胞染色方法是怎麼建立的?
19世紀德國的化學工業、染料工業、制葯工業的發展十分迅速。1856年,英國化學家W.H.帕金首先發明了染料的人工合成方法。不久,德國化學家A.W.霍夫曼相繼合成了染料鹼性品紅和苯胺藍。人們在應用染料過程中發現,其不僅可以染色布料、毛皮,而且還可以染色布料、毛皮,而且還可以使動物組織著色。更有趣的是,有些染料能使某些特定的細胞而不是所有的細胞著色,還有一些染料能使一種細胞的某一部分而不是整個細胞著色。於是,染料成了科學家觀察有機體結構的一種非常有用的工具。起初,能應用於有機體染色的染料為數不多,19世紀末,隨著德國染料工業的迅速發展,生產出了各種染料,極大地拓展了科學家觀察研究的范圍。醫學家開始用特殊染料使有機體的組織和細胞染色,在顯微鏡下進行觀察研究。
德國醫學家艾利希正是在這種背景下發明血細胞染色方法的。艾利希的叔父魏格特是德國著名的病理學家和組織學家,也是細菌和組織染色方法的創立者。他發明的許多人體組織和細胞的染色方法,有些一直尚用至今。艾利希在魏格特的影響下,自幼愛好動物學和化學。在大學學習階段,他就對化學染料與有機體組織細胞染色的關系產生了極大的興趣,並開拓研究某些化學物質對動物組織的作用。他不僅對機體的化學過程充滿興趣,而且也十分關注機體中更小的成分——細胞的構造和成分。當時還很少有醫生將化學與醫學結合起來研究的,值得慶幸的是,斯特拉斯堡大學教授、艾利希的老師沃爾德耶爾恰好持有這種觀點。沃爾德耶爾贊同艾利希的研究計劃,並鼓勵這個青年人在科學研究上走自己的路。在斯特拉斯堡大學學習期間,艾利希就發表了萊於化學物質在體內的分布及其與葯物作用關系的論文。
雖然艾利希對用化學方法研究生命現象充滿興趣,但他對當時大學里死板的教學方法十分厭惡,所以艾利希經常逃課,尤其是化學課。結果是艾利希不能通過課程考試,不得不留級一年。然而,他並不懊惱,而是繼續將時間都傾注在搗弄各種染料上。由於專心研究,不修邊幅,以致於染料弄得到處都是。數年後,一位教授指著艾利希曾使用過的工作台說:「艾利希工作的痕跡實際上是不可摧毀的。」德國著名科學家羅伯特·科赫也時常提及一個有關艾利希的小故事:他去布雷斯勞大學鑒定白喉桿菌時,被邀請參觀實驗室。實驗室的負責人指著艾利希的辦公桌告訴他:這是艾利希的工作台。艾利希是一個非常出色的染料師,但考試卻經常不極格。
當時,德國學生為了獲得學位,經常在幾所大學學習。艾利希曾在布雷斯勞大學、斯特拉斯堡大學、布賴斯高地大學、弗萊堡大學和萊比錫大學等多所學校學習過。在布雷斯勞大學時,他對實驗室的工作十分感興趣,他發明的染色技術揭示了許多細胞的基本構造。剛發現炭疽桿菌的科赫在布雷斯勞大學訪問時曾與艾利希探討了染色問題,從此,艾利希和科赫結下了深厚的友誼。
艾利希不僅熱衷於實驗觀察,而且善於獨立思考。在大學學習期間,一次在觀察鉛中毒死者的組織變化時,他發現凡是生前診斷為嚴重鉛中毒病人的身體組織,在作屍體病理檢查時,把組織浸入含鉛溶液中,這些組織的細胞也最容易吸收和積蓄鉛。艾利希敏銳地意識到人體的不同組織和器官對特定的化學物質可能存在著不同的「親和力」。於是,他開始用各種染料對人體組織標本進行染色,以確定能使特定組織和細胞染色的染料及其之間的相互關系。
1878年,艾利希在萊比錫大學畢業並獲醫學博士學位。他的博士論文是關於染料應用於顯微鏡觀察的理論和實踐問題,主要內容是關於如何應用各種苯胺染料進行動物組織染色的理論和技術。這一問題包含了艾利希關於染料和染色方法的許多設想:實際上已經奠定了他今後為醫學做出巨大貢獻的思想基礎。1891年,艾利希在一本關於有機體組織對染料的不同反應的著作中,介紹了血細胞的染色方法。1898年,他與同事又合作出版了一本論貧血的著作,總結了正常和病理情況下對血液的觀察,內容包括血液觀察的方法學、正常和病理情況下的紅細胞、各種白細胞、淋巴細胞以及白血病的細胞特點等。
在研究過程中,艾利希發現染料分為酸性、鹼性和中性三類,不同的染料對於白細胞內的顆粒染色結果不同,由此他第尋次提出了白細胞的分類方法。艾利希因為這些著名的觀察和方法學的建立,被譽為現代血液學的奠基人。